【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于临床种植体骨科，具体涉及一种增强临床种植体的骨结合的方法。
技术介绍
1、钛由于其良好的骨结合能力和优异的生物相容性，已被广泛用作种植体材料，但在糖尿病、骨质疏松等疾病环境中，种植体周围成骨效果大大减弱。
2、目前，传统壳聚糖涂布钛表面被用来缓释mirna、多肽或生长因子等，由于壳聚糖(cs)、透明质酸(ha)良好的生物相容性和生物安全性，其功能化种植体表面能很好的加强骨整合。本课题组从釉基质蛋白(emd)中首次成功分离出单一组分的釉原蛋白p148，我们前期研究发现其有很强的成骨能力。但将p148直接作为涂层涂布于种植体表面时，会面临其突释、被mmp-2、9等生物酶快速降解并可能产生炎症反应，从而引起排斥反应。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种增强临床种植体的骨结合的方法，旨在解决传统壳聚糖涂布钛表面被用来缓释mirna、多肽或生长因子等，由于壳聚糖(cs)、透明质酸(ha)良好的生物相容性和生物安全性，其功能化种植体表面能很好的加强骨整合。本课题组从釉基质蛋白(emd)中首次成功分离出单一组分的釉原蛋白p148，我们前期研究发现其有很强的成骨能力。但将p148直接作为涂层涂布于种植体表面时，会面临其突释、被mmp-2、9等生物酶快速降解并可能产生炎症反应，从而引起排斥反应的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种增强临床种植体的骨结合的方法，包括以下步骤：
3、s1、提取猪下颌第二磨牙后，加入pb
4、s2、将显影搪瓷白坯置入容器后加入盐酸胍，然后利用离心设备进行离心制备，最后利用上清透析分离冻干后获取釉原蛋白粉；
5、s3、将釉原蛋白粉与盐酸胍混合后利用离心设备进行二次离心制备，收集附在表面的物质作为色谱样品收集到样品瓶内；
6、s4、检验粗提取釉原蛋白，根据marker可判断出p173、p161、p148和trap位置，并且对p148进行提取；
7、s5、将钛盘植入物与多巴胺投入容器内，并在自我聚合的作用下获得聚多巴胺涂层种植体；
8、s6、对聚多巴胺涂层种植体进行隔夜处理，然后在聚多巴胺涂层种植体表面组装修饰壳聚糖后进行洗涤和卷曲；
9、s7、完成上述在ph值7.4的情况下，在聚多巴胺涂层种植体表面组装修饰透明质酸和提取出来的p148；
10、s8、重复循环s6至s7进行反复洗涤和卷曲，获取聚多巴胺涂层钛片植入物。
11、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s1中的pbs(磷酸盐缓冲液)为4摄氏度。
12、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s2和s3中离心设备的参数为：转速为14000rcf，温度为4摄氏度，运行时间为20分钟。
13、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s4中检验粗提取釉原蛋白采用sds-page。
14、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s5和s6中聚多巴胺涂层种植体需要在ph值8.5的情况下操作。
15、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s6中洗涤和卷曲的时间分别为5分钟。
16、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s6中洗涤和卷曲均在ph值7.4的情况下进行。
17、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s8中循环洗涤和卷曲次数为10次。
18、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述s2和s3中离心设备型号为：td3ws。
19、作为本专利技术一种增强临床种植体的骨结合的方法优选的，所述。
20、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
21、通过从釉基质衍生物的混合物中提取出含量最多的p148组分，并进一步通过壳聚糖、透明质酸逐层组装实现对p148的长期保护和缓释，并利用lbl技术促进与cs和ha组成的生物层的化学偶联，涂层可持续释放p148，mapk的经典通路erk1/2信号通路可能是其促进bmscs成骨分化的机制，并且在大鼠体内模型中，经p148功能化的ti植入物显著增强了bmscs的成骨分化和骨整合，从而增强临床种植体的骨结合，减少排斥性。
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1.一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述S1中的PBS(磷酸盐缓冲液)为4摄氏度。
3.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述S2和S3中离心设备的参数为：转速为14000rcf，温度为4摄氏度，运行时间为20分钟。
4.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述S4中检验粗提取釉原蛋白采用SDS-PAGE。
5.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述S5和S6中聚多巴胺涂层种植体需要在PH值8.5的情况下操作。
6.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述S6中洗涤和卷曲的时间分别为5分钟。
7.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述S6中洗涤和卷曲均在PH值7.4的情况下进行。
8.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在
9.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述S2和S3中离心设备型号为：TD3WS。
...【技术特征摘要】
1.一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述s1中的pbs(磷酸盐缓冲液)为4摄氏度。
3.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述s2和s3中离心设备的参数为：转速为14000rcf，温度为4摄氏度，运行时间为20分钟。
4.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特征在于：所述s4中检验粗提取釉原蛋白采用sds-page。
5.根据权利要求1所述的一种增强临床种植体的骨结合的方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：王忠山，郭慧慧，王春宝，陶沛，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：
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