【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及抗体的领域。特别地，其涉及用于治疗涉及异常细胞的疾病的治疗性抗体，包括人类抗体的领域。此外，其涉及将egfr与cmet结合的抗体，包括多特异性抗体，以及它们在将egfr阳性细胞与cmet阳性细胞，具体是肿瘤细胞结合的用途。
技术介绍
1、表皮生长因子(egf)受体(egfr)是细胞外蛋白配体的表皮生长因子家族(egf家族)成员的细胞表面受体。egfr也称为erbb-1受体。所述受体在过去被赋予各种名称(egfr；erbb；erbb1；her1；pig61；mena)。在本专利技术中，其在人类中的名称erbb-1、egfr或her1可互换使用。egfr是erbb受体家族的成员，具以下四个密切相关的受体酪氨酸激酶亚科：erbb-1(egfr)、erbb-2(her2/c-neu；her2)、erbb-3(her 3)和erbb-4(her 4)。
2、egfr存在于细胞表面，可通过与其特异性配体(包括表皮生长因子和转型生长因子α(tgfα))结合而被活化。在被其生长因子配体活化后，受体可进行从无活性的主要单体形式到有活性的同二聚体的转变。除了在与配体结合后形成同二聚体之外，egfr也可与erbb受体家族的另一成员(例如erbb2)配对，以产生活化的异二聚体。二聚体也可在没有配体结合的情况下形成，且活化的egfr簇可能在与配体结合后形成。
3、egfr二聚化刺激内在的细胞内蛋白酪氨酸激酶(ptk)的活性。此活性诱导导致细胞增殖和分化的数个信号转导级联。egfr的激酶结构域可交叉磷酸化与其复合的其他
4、涉及egfr的突变已在数种类型的癌症中被发现。其为类别不断增加的抗癌疗法的目标。此类疗法包括用于肺癌的egfr酪氨酸激酶抑制剂(egfr-tki)例如吉非替尼(gefitinib)和厄洛替尼(erlotinib)，以及用于结肠癌和头颈癌的抗体例如西妥昔单抗(cetuximab)和帕尼单抗(panitumumab)。
5、西妥昔单抗(cetuximab)和帕尼单抗(panitumumab)为抑制受体的单克隆抗体。临床开发中的其他单克隆抗体有札鲁木单抗(zalutumumab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)和马妥珠单抗(matuzumab)。单克隆抗体旨在阻断细胞外配体诱导的受体活化，主要是通过阻断配体与该受体的结合。由于结合位点被阻断，信号诱导分子可能无法有效附着，因此也无法活化下游信号。配体诱导的受体活化也可通过将失活受体构形(马妥珠单抗(matuzumab))稳定化而抑制。
6、迄今为止，egfr靶向治疗与随时间发展出的治疗抗性有关。人们说明了针对egfr-tki的抗性的各种机制。在晚期非小细胞肺癌(nsclc)患者中，抗性机制包括二级或三级突变的发生(例如，t790m、c797s、l718q、外显子20插入突变)、替代信号的活化(例如，met、hgf、axl、hh、igf-1r)、异常下游路径(例如，akt突变、pten缺失)、egfr-tkis-介导的细胞凋亡路径受损(例如，类似bcl2的11/bim缺失多态性)和组织学转型。尽管已识别出一些抗性机制，但其他机制仍有待识别。此外，就第三代tki抗性机制而言，nsclc的分子异质性影响其对目前发现的广谱抗性畸变的贡献。类似地，接受egfr抗体治疗的结直肠癌患者也会随着时间发展出抗性。这可能是通过kras突变的出现而发生。对于那些没有kras突变的患者，met原致癌基因的扩增可能与抗-egfr治疗期间的获得性抗性相关(bardelli等人,2013；cancer discov.jun；3(6):658-73.doi:10.1158/2159-8290.cd-12-0558)。肿瘤可能从一开始就具有抗性，也可能在治疗过程中发展出抗性。在许多egfr阳性癌症中发现对egfr-靶向治疗的抗性，并已说明本领域需要更有效的egfr癌症治疗，这些治疗可以改善照护标准，且在解决egfr-靶向治疗抗性方面具有优势。
7、met原致癌基因受体酪氨酸激酶(cmet)和肝细胞生长因子(hgf)的失调已在多种肿瘤中报导。已在数种癌症中观察到配体-驱动的cmet活化。在肺癌、乳癌和多发性骨髓瘤中观察到升高的血清和肿瘤内hgf(j.m.siegfried等人,ann thorac surg 66,1915(1998)；p.c.ma等人,anticancer res 23,49(2003)；b.e.elliott等人,can j physiolpharmacol 80,91(2002)；c.seidel等人,med oncol15,145(1998))。cmet的过度表达、cmet扩增或突变已在各种癌症如结直肠癌、肺癌、胃癌和肾癌中报导，并可驱动非配体依赖性受体活化(c.birchmeier等人,nat rev mol cell biol 4,915(2003)；g.maulik等人,cytokine growth factor rev 13,41(2002))。hgf的表达也与hgf/cmet信号路径的活化有关，也是egfr靶向治疗筛选下的肿瘤逃逸机制之一。此外，以cmet酪氨酸激酶抑制剂(如卡马替尼(capmatinib)或特泊替尼(tepotinib))治疗，与cmet畸变逃逸机制的出现有关。
8、cmet受体是通过将共同前驱物蛋白水解加工成单次跨膜、双硫键连接的α/β异二聚体而形成。cmet的细胞外部分由三种结构域类型组成。n-末端区域折叠形成一个大的导向蛋白(semaphoring)(sema)结构域，它包含整个α-亚单元和部分β-亚单元。丛状蛋白-导向蛋白-整合素(psi)结构域位于sema结构域之后，包括四个双硫键。此结构域通过四个免疫球蛋白-丛状蛋白-转录(ipt)结构域连接到跨膜螺旋，其与免疫球蛋白类似结构域相关。在细胞内，cmet受体包含侧接有独特的近膜和羧基末端序列的酪氨酸激酶催化域(organ及tsao.therapeutic advances in medical oncology 3.1_增刊(2011):s7-s19，其通过援引整体并入本文)。
9、cmet的配体，肝细胞生长因子(hgf；也称为分散因子)及其剪接异构体(nk1、nk2)为cmet受体的已知配体。hgf于1991年被发现为有效的促有丝分裂原/成形基因。hgf/cmet信号传递路径在多种癌症的发展和进展中扮演重要作用。人类癌症中hgf或cmet的失调和/或过度活化与预后不良有关。cmet可通过度表达、扩增或突变而活化。活化可促进癌症的发展、进展、侵袭性生长和转移。cmet可以通过与hgf相关和与非hgf依赖性的方式被活化。在cmet过度表达的情况下会发生非hgf依赖性活化。在没有配体的情况下，大量的cmet也可能触发(异)二聚化和细胞内信号传递。额外的配体似乎不影响此种cmet过度表达细胞的功能。cmet扩增与cmet过度表达有关，并已成为肿瘤亚型的生物标志物。
10、hgf在全身广泛表本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂与双特异性抗体的组合物，所述双特异性抗体包含可结合人类表皮生长因子受体(EGFR)的胞外部分的第一可变结构域和可结合人类MET原致癌基因受体酪氨酸激酶(cMET)的胞外部分的第二可变结构域，其中所述第一可变结构域包含重链可变区，所述第一可变结构域的所述重链可变区具有CDR1序列SYGIS、CDR2序列WISAYX1X2NTNYAQKLQG和包含序列X3X4X5X6HWWLX7A的CDR3，其中X1＝N或S；X2＝A或G；X3＝D或G；X4＝R、S或Y；X5＝H、L或Y；X6＝D或W、及X7＝D或G；在X1至X7以外的位点具有0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合，且其中所述第二可变结构域包含重链可变区，所述第二可变结构域的所述重链可变区具有SEQ ID NO:1-23序列之一的氨基酸序列产生0至10个、优选0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合的氨基酸序列，所述组合物用于治疗个体的癌症的方法。
2.一种治疗患有癌症的个体的方法，所述治疗包含向所述个体施用有效量的第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂与双特异性抗体的组合物，所述
3.一种双特异性抗体与第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂的组合物用于制备治疗个体癌症的药物的用途，所述双特异性抗体包含可结合人类表皮生长因子受体(EGFR)的胞外部分的第一可变结构域和可结合人类MET原致癌基因受体酪氨酸激酶(cMET)的胞外部分的第二可变结构域，其中所述第一可变结构域包含重链可变区，所述第一可变结构域的所述重链可变区具有CDR1序列SYGIS、CDR2序列WISAYX1X2NTNYAQKLQG和包含序列X3X4X5X6HWWLX7A的CDR3，其中X1＝N或S；X2＝A或G；X3＝D或G；X4＝R、S或Y；X5＝H、L或Y；X6＝D或W、及X7＝D或G；在X1至X7以外的位点具有0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合，且其中所述第二可变结构域包含重链可变区，所述第二可变结构域的所述重链可变区具有SEQ ID NO:1-23序列之一的氨基酸序列产生0至10个、优选0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合的氨基酸序列。
4.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症为EGFR阳性和/或cMET阳性癌症。
5.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含EGFR和/或cMET畸变。
6.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症对酪氨酸激酶抑制剂的治疗具有抗性。
7.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症对EGFR酪氨酸激酶抑制剂和/或cMET酪氨酸激酶抑制剂具有抗性。
8.根据权利要求7所述的用途或方法，其中所述EGFR酪氨酸激酶抑制剂抗性包含对第一代酪氨酸激酶抑制剂、第二代酪氨酸激酶抑制剂和/或第三代酪氨酸激酶抑制剂的抗性，优选为对第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂的抗性。
9.根据权利要求7所述的用途或方法，其中所述cMET酪氨酸激酶抑制剂抗性包含对卡马替尼(Capmatinib)、特泊替尼(Tepotinib)、克唑替尼(Crizotenib)、卡博替尼(Cabozantinib)、赛沃替尼(Savolitinib)、格沙替尼(Glesatinib)、西曲伐替尼(Sitravatinib)、BMS-777607、梅沙替尼(Merestinib)、替凡替尼(Tivantinib)、戈伐替尼(Golvatinib)、福瑞替尼(Foretinib)、AMG-337或BMS-794833，优选为卡马替尼(Capmatinib)或特泊替尼(Tepotinib)的抗性。
10.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述个体已经通过酪氨酸激酶抑...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种第三代egfr酪氨酸激酶抑制剂与双特异性抗体的组合物，所述双特异性抗体包含可结合人类表皮生长因子受体(egfr)的胞外部分的第一可变结构域和可结合人类met原致癌基因受体酪氨酸激酶(cmet)的胞外部分的第二可变结构域，其中所述第一可变结构域包含重链可变区，所述第一可变结构域的所述重链可变区具有cdr1序列sygis、cdr2序列wisayx1x2ntnyaqklqg和包含序列x3x4x5x6hwwlx7a的cdr3，其中x1＝n或s；x2＝a或g；x3＝d或g；x4＝r、s或y；x5＝h、l或y；x6＝d或w、及x7＝d或g；在x1至x7以外的位点具有0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合，且其中所述第二可变结构域包含重链可变区，所述第二可变结构域的所述重链可变区具有seq id no:1-23序列之一的氨基酸序列产生0至10个、优选0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合的氨基酸序列，所述组合物用于治疗个体的癌症的方法。
2.一种治疗患有癌症的个体的方法，所述治疗包含向所述个体施用有效量的第三代egfr酪氨酸激酶抑制剂与双特异性抗体的组合物，所述双特异性抗体包含可结合人类表皮生长因子受体(egfr)的胞外部分的第一可变结构域和可结合人类met原致癌基因受体酪氨酸激酶(cmet)的胞外部分的第二可变结构域，其中所述第一可变结构域包含重链可变区，所述第一可变结构域的所述重链可变区具有cdr1序列sygis、cdr2序列wisayx1x2ntnyaqklqg和包含序列x3x4x5x6hwwlx7a的cdr3，其中x1＝n或s；x2＝a或g；x3＝d或g；x4＝r、s或y；x5＝h、l或y；x6＝d或w、及x7＝d或g；在x1至x7以外的位点具有0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合，且其中所述第二可变结构域包含重链可变区，所述第二可变结构域的所述重链可变区具有seq id no:1-23序列之一的氨基酸序列产生0至10个、优选0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合的氨基酸序列。
3.一种双特异性抗体与第三代egfr酪氨酸激酶抑制剂的组合物用于制备治疗个体癌症的药物的用途，所述双特异性抗体包含可结合人类表皮生长因子受体(egfr)的胞外部分的第一可变结构域和可结合人类met原致癌基因受体酪氨酸激酶(cmet)的胞外部分的第二可变结构域，其中所述第一可变结构域包含重链可变区，所述第一可变结构域的所述重链可变区具有cdr1序列sygis、cdr2序列wisayx1x2ntnyaqklqg和包含序列x3x4x5x6hwwlx7a的cdr3，其中x1＝n或s；x2＝a或g；x3＝d或g；x4＝r、s或y；x5＝h、l或y；x6＝d或w、及x7＝d或g；在x1至x7以外的位点具有0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合，且其中所述第二可变结构域包含重链可变区，所述第二可变结构域的所述重链可变区具有seq id no:1-23序列之一的氨基酸序列产生0至10个、优选0至5个氨基酸插入、缺失、取代、添加或其组合的氨基酸序列。
4.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症为egfr阳性和/或cmet阳性癌症。
5.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含egfr和/或cmet畸变。
6.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症对酪氨酸激酶抑制剂的治疗具有抗性。
7.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症对egfr酪氨酸激酶抑制剂和/或cmet酪氨酸激酶抑制剂具有抗性。
8.根据权利要求7所述的用途或方法，其中所述egfr酪氨酸激酶抑制剂抗性包含对第一代酪氨酸激酶抑制剂、第二代酪氨酸激酶抑制剂和/或第三代酪氨酸激酶抑制剂的抗性，优选为对第三代egfr酪氨酸激酶抑制剂的抗性。
9.根据权利要求7所述的用途或方法，其中所述cmet酪氨酸激酶抑制剂抗性包含对卡马替尼(capmatinib)、特泊替尼(tepotinib)、克唑替尼(crizotenib)、卡博替尼(cabozantinib)、赛沃替尼(savolitinib)、格沙替尼(glesatinib)、西曲伐替尼(sitravatinib)、bms-777607、梅沙替尼(merestinib)、替凡替尼(tivantinib)、戈伐替尼(golvatinib)、福瑞替尼(foretinib)、amg-337或bms-794833，优选为卡马替尼(capmatinib)或特泊替尼(tepotinib)的抗性。
10.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述个体已经通过酪氨酸激酶抑制剂，优选为egfr酪氨酸激酶抑制剂和/或cmet酪氨酸激酶抑制剂进行了先前治疗。
11.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述个体已经通过第一代egfr酪氨酸激酶抑制剂、第二代egfr酪氨酸激酶抑制剂或第三代egfr酪氨酸激酶抑制剂进行了先前治疗。
12.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述个体已经通过cmet酪氨酸激酶抑制剂进行了先前治疗。
13.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含活化egfr突变、经证实的酪氨酸激酶抑制剂抗性突变、三级酪氨酸激酶抑制剂抗性突变、减弱第三代酪氨酸激酶抑制剂与egfr的结合的突变、获得性酪氨酸激酶抑制剂抗性突变、egfr基因扩增、cmet突变或cmet畸变。
14.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含外显子19缺失突变，优选为框内外显子19缺失、外显子20错义突变、或外显子21突变，例如l858r。
15.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含egfr外显子20突变，优选为外显子20插入突变。
16.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含获得性酪氨酸激酶抑制剂抗性突变，例如赋予奥希替尼(osimertinib)抗性的突变。
17.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含外显子20突变，其选自近环插入、远环插入，优选为v769_d770insasv、d770_n771inssvd、h773_v774insnph、h773_v774insh、d770_n771insg、d770delinsgy、n771_p772insn、v774_c775inshv、d770_n771insgl、h773_v774insph、a763_y764insfqea、d770_n771delinsegn、d770_n771insgd、d770_n771insh、d770_n771insp、h773_v774insah、h773_v774insgnph、h773delinssnpy、n771_p772insh、n771_p772insvdn、n771delinsgy、n771delinskh、n771delinsrd、p772_h773delinshnpy、p772_h773insgt、p772_h773inspnp、p772_h773inst、v769_d770insa、v769_d770insgg、v769_d770insgsv、v769_d770insgvv及v769_d770insmasv；或突变t790m、l792x(如l792h、c796x(如g796r、g796s、g796d)、c797x(如c797s、c797g)、l798i，或框内外显子20插入，例如m766_a767insasv或h773-v774insnph、ins761(eafq)、ins770(asv)、ins771(g)、ins774(nph)、m766_a7671ns a、s768_v769inssva、p772_h773insns、d761_e762insx1-7、a763_y764insx1-7、y764_y765 insx1-7、m766_a767insx1-7、a767_v768 insx1-7、s768_v769 insx1-7>v769_d770insx1-7>d770_n771 insx1-7>n771_p772 insx1-7>p772_h773 insx1-7、h773_v774 insx1-7、或v774_c775 insx1-7。
18.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包括cmet畸变，例如cmet扩增、cmet过度表达、cmet途径的信号传递增强、cmet基因扩增、hgf表达增强、和/或cmet蛋白质活性增强。
19.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述癌症包含cmet外显子14跳跃突变。
20.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述第一代egfr酪氨酸激酶抑制剂包含或就是吉非替尼(gefitinib)、厄洛替尼(erlotinib)或埃克替尼(icotinib)。
21.根据前述权利要求中任一项所述的用途或方法，其中所述第二代egfr酪氨酸激酶抑制剂包含或就是阿法替尼(afatinib)、达克替尼(dacomitinib)、xl647、ap2611...
【专利技术属性】
技术研发人员：玉龙·吉尔斯·拉默特斯范布伦，詹卢卡·劳斯，罗伯特·保尔·多恩博斯，
申请(专利权)人：美勒斯公司，
类型：发明
国别省市：
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