System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() SSR分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用制造技术_技高网

SSR分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用制造技术

技术编号:43391710 阅读:4 留言:0更新日期:2024-11-19 18:06
本发明专利技术公开了SSR分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用,属于分子标记及其检测技术领域。所述SSR分子标记编号为17482,位于松毛虫赤眼蜂的第3号染色体上;所述SSR分子标记引物由如SEQ ID NO.25所示的上游引物和如SEQ ID NO.26所示的下游引物组成。利用该SSR分子标记可以批量快速筛选掉高、低对照(两性孤雌)繁殖力品系,对松毛虫赤眼蜂基因组数据进行了微卫星位点的预测,并对微卫星的长度、数量及其碱基组成进行了详细分析,通过毛细管电泳在不同品系的松毛虫赤眼蜂之间比较筛选出具有多态性的可用于分子标记的微卫星位点,为松毛虫赤眼蜂繁殖力性状的分子标记开发和定向遗传改良奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子标记及其检测,特别是涉及ssr分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用。


技术介绍

1、松毛虫赤眼蜂(trichogramma dendrolimi)属膜翅目(hymenoptera),细腰亚目(apoerita),小蜂总科(chaleidoidea),赤眼蜂科(trichogrammatidae),体长仅0.50-1.40毫米,肘状触角,复眼、单眼均为红色,三个单眼排列在前额上端。翅透明,前翅近扇形,翅面密生规则排列的细毛,翅脉黄色,痣脉、缘脉及缘前脉成连续的s形,缘脉紧接翅前缘;翅沿生缘毛;痣脉后方生横毛列,翅面生7条明显纵毛列及不规则排列纤毛。后翅狭窄,成刀状,边缘生缨毛。胸部与腹部连接处宽阔,足跗节3节。雄蜂体黄,腹部黑褐色,外生殖器由阳基和阳茎构成。雌蜂在25℃以上培养出来的个体全部黄色,腹部产卵器由鞘和产卵管构成,不伸出或稍伸出于腹部末端,产卵管针状。松毛虫赤眼蜂的寄主范围十分广泛,覆盖鳞翅目、双翅目、鞘翅目、膜翅目等7个目500多种农林害虫,其中以亚洲玉米螟、二化螟、稻纵卷叶螟、棉铃虫等鳞翅目害虫最多。

2、在进行田间放蜂时,优质赤眼蜂种群的选择是放蜂成功的关键之一,赤眼蜂品种优良与否主要在于其是否能寄生害虫的卵以及寄生数量的多少。相对应的,在实验条件下,赤眼蜂繁殖力的高低也是评价其优良与否的重要条件之一。

3、分子标记作为遗传育种的关键工具,其基础在于核苷酸序列的差异,具有稳定性高、不易受环境因素干扰、信息量丰富等优越性(洪靖君,2002)。在基因定位研究中,常见分子标记包括rflp、rapd、aflp、ssr、sts、snp等。目前未见关于将分子标记用于筛选高繁殖力的松毛虫赤眼蜂的相关报道。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供ssr分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用,以解决上述现有技术存在的问题,用于快速筛选高繁殖力松毛虫赤眼蜂。

2、为实现上述目的,本专利技术提供了如下方案:

3、本专利技术技术方案之一,ssr分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用,所述ssr分子标记编号为17482,位于松毛虫赤眼蜂的第3号染色体上;

4、所述ssr分子标记引物由如seq id no.25所示的上游引物和如seq id no.26所示的下游引物组成。

5、本专利技术技术方案之二,ssr分子标记引物在制备鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的产品中的应用,所述ssr分子标记引物由如seq id no.25所示的上游引物和如seq idno.26所示的下游引物组成。

6、本专利技术技术方案之三,一种用于鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的产品,所述产品包括所述ssr分子标记引物。

7、本专利技术技术方案之四,一种松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的鉴定方法,包括以下步骤:以待检测的松毛虫赤眼蜂dna样本为模板,利用所述ssr分子标记引物或所述产品进行pcr扩增,对扩增产物进行鉴定;

8、若扩增产物长度为179bp,则所述待检测的松毛虫赤眼蜂为高繁殖、低繁殖力品系;

9、若扩增产物长度为185bp,则所述待检测的松毛虫赤眼蜂为对照繁殖力品系。

10、本专利技术技术方案之五,所述ssr分子标记引物或所述产品在松毛虫赤眼蜂高繁殖力性状分子辅助标记选育中的应用。

11、基于上述技术方案,本专利技术具有以下技术效果:

12、本专利技术提供一种松毛虫赤眼蜂高、低繁殖力性状分子辅助标记选育方法,可以批量快速从众多地理品系中筛掉对照繁殖力品系,减少后期生物学筛选高繁殖力品系工作量,对松毛虫赤眼蜂基因组数据进行了微卫星位点的预测,并对微卫星的长度、数量及其碱基组成进行了详细分析,通过毛细管电泳在不同品系的松毛虫赤眼蜂之间比较筛选出具有多态性的可用于分子标记的微卫星位点,为后续松毛虫赤眼蜂繁殖力性状的分子标记开发和定向遗传改良研究奠定基础。

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【技术保护点】

1.SSR分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用,其特征在于,所述SSR分子标记编号为17482,位于松毛虫赤眼蜂的第3号染色体上;

2.SSR分子标记引物在制备鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的产品中的应用,其特征在于,所述SSR分子标记引物由如SEQ ID NO.25所示的上游引物和如SEQ ID NO.26所示的下游引物组成。

3.一种用于鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1所述SSR分子标记引物。

4.一种松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:以待检测的松毛虫赤眼蜂DNA样本为模板,利用权利要求1所述SSR分子标记引物或权利要求3所述产品进行PCR扩增,对扩增产物进行鉴定;

5.根据权利要求4所述的鉴定方法,其特征在于,所述PCR扩增的扩增体系为25μL,其中包括1μL模板DNA,0.5μL dNTP(mix),2.5μLTaqBuffer(with MgCl2),0.2μL Taq酶,0.5μL上游引物,0.5μL下游引物,和19.8μL ddH2O。。

>6.根据权利要求4所述的鉴定方法,其特征在于,所述PCR扩增的扩增程序为:预变性95℃5min;变性94℃30s,退火60℃-0.5℃/cycle 30s,延伸72℃30s,10个循环;变性94℃30s,退火55℃30s,30个循环;最后终延伸72℃10min。

7.权利要求1所述SSR分子标记引物或权利要求3所述产品在松毛虫赤眼蜂高繁殖力性状分子辅助标记选育中的应用。

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【技术特征摘要】

1.ssr分子标记引物在鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力中的应用,其特征在于,所述ssr分子标记编号为17482,位于松毛虫赤眼蜂的第3号染色体上;

2.ssr分子标记引物在制备鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的产品中的应用,其特征在于,所述ssr分子标记引物由如seq id no.25所示的上游引物和如seq id no.26所示的下游引物组成。

3.一种用于鉴定松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1所述ssr分子标记引物。

4.一种松毛虫赤眼蜂的繁殖能力的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:以待检测的松毛虫赤眼蜂dna样本为模板,利用权利要求1所述ssr分子标记引物或权利要求3所述产品进行pcr扩增,对扩增产物进行鉴定;

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【专利技术属性】
技术研发人员:董辉董晴单莹周金成梁洪宇车午男
申请(专利权)人:沈阳农业大学
类型:发明
国别省市:

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