【技术实现步骤摘要】
本技术属于外泌体提取,涉及一种prp衍生的外泌体提取装置。
技术介绍
1、腱骨结合部损伤及愈合问题在膝关节交叉韧带、肩关节肩袖以及跟腱止点等重要位置尤显突出。为了增强腱骨愈合的速度和成功率,近年来富血小板血浆(prp)已经在运动医学得到广泛应用。prp是一种血液衍生物,可提供超生理剂量的细胞因子和生长因子,包括转化生长因子-β、表皮生长因子、血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子和成纤维细胞生长因子(fgf),用于促进骨愈合、肌腱修复、清除坏死组织、减轻炎症反应和术后疼痛、加速关节软骨修复及再生等。除了生长因子,prp还可产生多种不同的细胞外囊泡,包括外泌体,具有多种重要生物学功能,能够转运血小板的主要生长因子。有研究者发现prp-exo可以促进大鼠模型中肌腱损伤的恢复,显著增加肌腱标志基因的表达。此外,研究指出prp-exo可能是prp治疗关节炎的主要机制,因为prp-exo可在oa软骨细胞中诱导软骨基因的表达,同时,prp-exo可以相应地抑制促炎因子的释放。
2、在prp-exo研究的过程中需要对prp衍生的外泌体进行提取操作,由于在外泌体提取的过程中需要使用exoeasy maxi试剂盒进行提取操作,提取的过程中需要对多种试剂和混合物进行混合摇匀,现有的提取装置采用操作人员手持晃动翻转颠倒的方式进行摇匀,这种操作方式的安全性较低,容易导致试管从手中脱落,且摇匀的效果较差。
技术实现思路
1、本技术的目的是针对上述问题,提供一种prp衍生的外泌体提取装置。
3、一种prp衍生的外泌体提取装置,包括底板,所述底板上侧的侧壁固定连接有提取操作台,所述底板的左侧放置有超速离心机,所述提取操作台包括固定连接于底板上侧的竖板,所述竖板的竖直侧壁固定连接有试管架,所述试管架上均匀开设有多个放置孔,所述放置孔内设置有多个试管,所述竖板的竖直侧壁固定连接有承托板,所述承托板位于试管架的下方,所述底板上放置有污垢收集桶,所述竖板的竖直侧壁固定连接有均匀混合机构。
4、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述均匀混合机构包括转动连接于竖板上的转轴,所述转轴外固定套设有安装板,所述安装板上固定连接有固定夹板,所述安装板外活动套设有滑动块,所述滑动块上固定连接有移动夹板,所述安装板的上侧固定连接有固定板,所述固定板与移动夹板之间固定连接有弹簧,所述固定夹板与移动夹板相对的一侧均开设有限位槽。
5、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述污垢收集桶包括桶体,所述桶体的上端螺纹连接有桶盖,所述桶盖上开设有集污孔,且集污孔内转动安装有密封盖。
6、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述安装板靠近竖板的一侧固定连接有第一磁石,所述竖板的竖直侧壁固定连接有第二磁石,所述第一磁石与第二磁石相接触的一侧极性相反。
7、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述底板上侧的侧壁对称固定连接有两个防护板,两个所述防护板的具体材质为透明玻璃。
8、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述承托板上侧的侧壁均匀开设有多个与放置孔相对应的放置槽,多个所述放置槽的槽底均固定连接有缓冲垫片。
9、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述固定夹板上固定连接有操作握柄,所述操作握柄外固定套设有防滑套,所述防滑套的具体材质为橡胶。
10、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述安装板的竖直侧壁固定连接有防护垫片,所述防护垫片的材质海绵。
11、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述超速离心机的底部固定连接有底座,所述底座的材质为绝缘塑料。
12、在上述的一种prp衍生的外泌体提取装置中,所述限位槽内固定连接有保护垫片。
13、与现有的技术相比,本技术的优点在于:
14、本技术通过设置的底板、超速离心机、竖板、试管架、放置孔、试管、承托板、污垢收集桶和均匀混合机构,提取时,将prp放置在试管中然后放置在超速离心机中在4℃下以3000g离心15分钟,从而能够去除prp中额外的细胞碎片和细胞碎片,将离心后澄清的上清液小心地转移到新的试管中,不要干扰颗粒,沿离心试管的外侧或底部形成涂片,然后将1体积的缓冲液xbp添加到1体积的prp中,将试管夹持在均匀混合机构上,操作均匀混合机构对试管进行轻轻颠倒五次以使混合物升温至室温,设置的均匀混合机构能够对试管进行稳定的夹持,且转动的过程中也十分稳定不会脱落,且受不稳定外界因素的影响较小,从而能够将样品充分均匀混合,混合之后总共获得了16ml的prp/xbp混合物,将其添加到exoeasy试剂盒中的离心柱中并以500g离心1分钟,离心完成后取出并丢弃流出液后,将色谱柱放回同一试管中,重复上述步骤,直到提取液的总体积不超过8ml,然后将提取液以5000g离心1分钟以去除膜上残留的液体,然后向提取液中加入10ml缓冲液xwp,并以5000g的速度将体积离心5分钟以去除残留的缓冲液,然后将离心柱中的混合液转移到新的试管中,接下来,将400μl buffer xe添加到膜中并孵育1分钟,然后500g离心收集洗脱液5分钟,再次加入exoeasy离心柱膜,孵育1分钟,最后,在5000g离心5分钟后收集洗脱液,洗脱液通过exoeasy maxi kit用于分离外泌体,所有步骤均在4℃下进行,最终得到的外泌体小心地重新悬浮在无菌pbs中并储存在-80℃以供后续实验,完成对外泌体的稳定提取,相较于现有的提取装置,本技术的提取装置能够对混合液进行均匀稳定的混合,能够避免提取液混合时脱手,从而能够提高prp衍生的外泌体的提取安全性和效果。
15、本技术的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本技术的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
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1.一种PRP衍生的外泌体提取装置,包括底板(1),其特征在于,所述底板(1)上侧的侧壁固定连接有提取操作台,所述底板(1)的左侧放置有超速离心机(2),所述提取操作台包括固定连接于底板(1)上侧的竖板(3),所述竖板(3)的竖直侧壁固定连接有试管架(4),所述试管架(4)上均匀开设有多个放置孔(5),所述放置孔(5)内设置有多个试管(6),所述竖板(3)的竖直侧壁固定连接有承托板(7),所述承托板(7)位于试管架(4)的下方,所述底板(1)上放置有污垢收集桶(8),所述竖板(3)的竖直侧壁固定连接有均匀混合机构。
2.根据权利要求1所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述均匀混合机构包括转动连接于竖板(3)上的转轴(9),所述转轴(9)外固定套设有安装板(10),所述安装板(10)上固定连接有固定夹板(11),所述安装板(10)外活动套设有滑动块(12),所述滑动块(12)上固定连接有移动夹板(13),所述安装板(10)的上侧固定连接有固定板(14),所述固定板(14)与移动夹板(13)之间固定连接有弹簧(15),所述固定夹板(11)与移动夹板(13)
3.根据权利要求2所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述污垢收集桶(8)包括桶体(17),所述桶体(17)的上端螺纹连接有桶盖(18),所述桶盖(18)上开设有集污孔,且集污孔内转动安装有密封盖(19)。
4.根据权利要求3所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述安装板(10)靠近竖板(3)的一侧固定连接有第一磁石(20),所述竖板(3)的竖直侧壁固定连接有第二磁石(21),所述第一磁石(20)与第二磁石(21)相接触的一侧极性相反。
5.根据权利要求4所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述底板(1)上侧的侧壁对称固定连接有两个防护板(22),两个所述防护板(22)的具体材质为透明玻璃。
6.根据权利要求5所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述承托板(7)上侧的侧壁均匀开设有多个与放置孔(5)相对应的放置槽(23),多个所述放置槽(23)的槽底均固定连接有缓冲垫片(24)。
7.根据权利要求6所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述固定夹板(11)上固定连接有操作握柄(25),所述操作握柄(25)外固定套设有防滑套(26),所述防滑套(26)的具体材质为橡胶。
8.根据权利要求7所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述安装板(10)的竖直侧壁固定连接有防护垫片(27),所述防护垫片(27)的材质海绵。
9.根据权利要求8所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述超速离心机(2)的底部固定连接有底座(28),所述底座(28)的材质为绝缘塑料。
10.根据权利要求9所述的一种PRP衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述限位槽(16)内固定连接有保护垫片(29)。
...【技术特征摘要】
1.一种prp衍生的外泌体提取装置,包括底板(1),其特征在于,所述底板(1)上侧的侧壁固定连接有提取操作台,所述底板(1)的左侧放置有超速离心机(2),所述提取操作台包括固定连接于底板(1)上侧的竖板(3),所述竖板(3)的竖直侧壁固定连接有试管架(4),所述试管架(4)上均匀开设有多个放置孔(5),所述放置孔(5)内设置有多个试管(6),所述竖板(3)的竖直侧壁固定连接有承托板(7),所述承托板(7)位于试管架(4)的下方,所述底板(1)上放置有污垢收集桶(8),所述竖板(3)的竖直侧壁固定连接有均匀混合机构。
2.根据权利要求1所述的一种prp衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述均匀混合机构包括转动连接于竖板(3)上的转轴(9),所述转轴(9)外固定套设有安装板(10),所述安装板(10)上固定连接有固定夹板(11),所述安装板(10)外活动套设有滑动块(12),所述滑动块(12)上固定连接有移动夹板(13),所述安装板(10)的上侧固定连接有固定板(14),所述固定板(14)与移动夹板(13)之间固定连接有弹簧(15),所述固定夹板(11)与移动夹板(13)相对的一侧均开设有限位槽(16)。
3.根据权利要求2所述的一种prp衍生的外泌体提取装置,其特征在于,所述污垢收集桶(8)包括桶体(17),所述桶体(17)的上端螺纹连接有桶盖(18),所述桶盖(18)上开设有集污孔,且集污孔内转动安装有密封盖(19)。
4.根据权利要求3所述的一种...
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