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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物分选的,尤其涉及一种微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置。
技术介绍
1、现有技术主要有荧光流式细胞分选,光镊技术提取等方案。荧光流式细胞分选主要针对7微米以上的细胞等样本,但对于微生物在1微米左右的检测灵敏度往往达不到实际要求,同时,抗体染料、流体压力过大这些都可能对样品活性潜在损伤,即使有分选但却也无法进行继续培养和放大,无法用于合成生物学的菌株筛选。光镊技术在样品分离也会带来较大损伤、设备操作较为复杂,分离效率较低,在合成生物学应用中也受到很大限制。
技术实现思路
1、本专利技术的目的就是针对现有技术中存在的缺陷提供一种微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,达到显著提升1微米左右的微生物的检测灵敏度,同时防止过程中的潜在损伤,分选后的微生物可以进行继续培养和放大以用于合成生物学的菌株筛选,并且操作便捷,分离效率更高的效果。
2、为了达到上述目的,本专利技术所采用的技术方案是:一种微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,包括分选控制模块、流体驱动模块、信号检测模块、固化光源和微流控分选芯片;
3、所述微流控分选芯片腔室底面均匀分布了大量与单个样品大小相当的微坑;
4、用光固化水凝胶溶液重悬细胞或微生物样品;
5、将所述样品并注入所述微流控分选芯片,保持一定流速使所述样品均匀铺满所述微流控分选芯片腔室;
6、所述样品静置以后落入所述微流控分选芯片腔室底面均匀分布的大量与单个所述样品大小相当的
7、所述信号检测模块对微坑阵列中的所述样品进行荧光或者拉曼光谱检测,并根据不同的特异性检测方式筛选并记录目标所述样品所在的位置;
8、将所述微流控分选芯片移动至所述分选控制模块,所述固化光源对目标所述样品所在位置照射,目标所述样品周围的水凝胶固化后包裹目标所述样品;
9、将清洗液注入所述微流控分选芯片进行清洗,将未固化的所述样品的残留清洗干净;
10、将凝胶裂解液注入所述微流控分选芯片,将固化的水凝胶裂解,获得液相的目标所述样品。
11、进一步地,所述流体驱动模块内设置储液腔和控制液路,所述控制液路包含真空泵、夹管阀、连接软管;所述微流控分选芯片的芯片入液口连接所述流体驱动模块的输出管路及所述储液腔,所述微流控分选芯片的芯片出液口连接所述流体驱动模块的废液管路。
12、进一步地,将所述样品悬液加入所述储液腔,通过所述夹管阀关闭所述输出管路;
13、所述真空泵连接所述废液管路,所述真空泵工作使得分选芯片内形成一定真空度;
14、关闭所述真空泵,打开所述夹管阀,负压使得所述样品被吸入所述微流控分选芯片的所述芯片入液口;
15、所述样品液体进入所述微流控分选芯片后平铺开;
16、静置一定时间,所述样品随机分配到多个所述微坑中。
17、进一步地,所述分选控制模块包含运动控制机构,所述运动控制机构移动所述微流控分选芯片,并将所述信号检测模块和所述微流控分选芯片对位进行信号检测并找到所需目标所述样品所在的微坑位置。
18、进一步地,所述分选控制模块记录所述微坑位置;
19、所述运动控制机构移动所述微流控分选芯片使得相应的所述微坑位置对准所述固化光源;
20、所述固化光源针对相应所述微坑位置固化目标所述样品;
21、通过所述流体驱动模块将其余未固化的液体通过所述芯片出液口经由所述废液管路吸走;
22、残留的目标所述样品留待后续使用。
23、进一步地,所述固化光源为蓝色或紫色光,所述固化光源使用激光或者单色led光源配合微孔以实现和所述微坑相当的光斑。
24、进一步地,所述信号检测模块选择荧光显微成像模块或者拉曼光谱检测模块以实现不同的筛选目标样品的需求。
25、进一步地,所述光固化水凝胶溶液采用gelma溶液重悬细胞或微生物样品。
26、通过包括分选控制模块、流体驱动模块、信号检测模块、固化光源和微流控分选芯片;所述微流控分选芯片腔室底面均匀分布了大量与单个样品大小相当的微坑;用光固化水凝胶溶液重悬细胞或微生物样品;将所述样品并注入所述微流控分选芯片,保持一定流速使所述样品均匀铺满所述微流控分选芯片腔室;所述样品静置以后落入所述微流控分选芯片腔室底面均匀分布的大量与单个所述样品大小相当的微坑;所述信号检测模块对微坑阵列中的所述样品进行荧光或者拉曼光谱检测,并根据不同的特异性检测方式筛选并记录目标所述样品所在的位置;将所述微流控分选芯片移动至所述分选控制模块,所述固化光源对目标所述样品所在位置照射,目标所述样品周围的水凝胶固化后包裹目标所述样品;将清洗液注入所述微流控分选芯片进行清洗,将未固化的所述样品的残留清洗干净;将凝胶裂解液注入所述微流控分选芯片,将固化的水凝胶裂解,获得液相的目标所述样品的方法与结构,达到显著提升1微米左右的微生物的检测灵敏度,同时防止过程中的潜在损伤,分选后的微生物可以进行继续培养和放大以用于合成生物学的菌株筛选,并且操作便捷,分离效率更高的效果。
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1.一种微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于:
2.根据权利要求1所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,所述流体驱动模块(2)内设置储液腔和控制液路,所述控制液路包含真空泵、夹管阀、连接软管;所述微流控分选芯片(5)的芯片入液口(52)连接所述流体驱动模块(2)的输出管路(21)及所述储液腔,所述微流控分选芯片(5)的芯片出液口(53)连接所述流体驱动模块(2)的废液管路(22)。
3.根据权利要求2所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,
4.根据权利要求1所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,所述分选控制模块(1)包含运动控制机构,所述运动控制机构移动所述微流控分选芯片(5),并将所述信号检测模块(3)和所述微流控分选芯片(5)对位进行信号检测并找到所需目标所述样品所在的微坑(51)位置。
5.根据权利要求4所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,
6.根据权利要求5所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特
7.根据权利要求1所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,所述信号检测模块(3)选择荧光显微成像模块或者拉曼光谱检测模块以实现不同的筛选目标样品的需求。
8.根据权利要求1所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,所述光固化水凝胶溶液采用GelMA溶液重悬细胞或微生物样品。
...【技术特征摘要】
1.一种微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于:
2.根据权利要求1所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,所述流体驱动模块(2)内设置储液腔和控制液路,所述控制液路包含真空泵、夹管阀、连接软管;所述微流控分选芯片(5)的芯片入液口(52)连接所述流体驱动模块(2)的输出管路(21)及所述储液腔,所述微流控分选芯片(5)的芯片出液口(53)连接所述流体驱动模块(2)的废液管路(22)。
3.根据权利要求2所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,
4.根据权利要求1所述的微流控芯片上微生物分选的方法及其应用装置,其特征在于,所述分选控制模块(1)包含运动控制机构,所述运动控制机构移动所述微流控分选芯片(5),并将所述信号检测模块(3)和...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴旭东,帅宇,
申请(专利权)人:卓微农业科技盐城有限公司,
类型:发明
国别省市:
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