【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品防腐，尤其涉及一种常温长保天然防腐剂及其制备方法和应用。
技术介绍
1、食品的防腐保鲜一般可两个方面入手：一为杀菌(控制食品中的初始菌象及菌落数)，二为防腐剂(通过抑制或灭杀的方式抑制微生物的增殖)。
2、对于杀菌技术，一般在食品工业中常用的杀菌技术为热力灭菌，该种技术是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡的一种灭菌方法。故而灭菌效果与灭菌温度有着直接关系，灭菌温度越高对于食品中细菌的灭杀效果也越好。但实际食品生产中并非选用越高的杀菌温度越好，因为较高的灭菌温度对细菌杀灭效果较好但易破坏食品中的营养成分和食品的天然特性，导致食品丧失部分营养与色香味。而较低的杀菌温度可较好的保留食品的营养与色香味，但对于微生物的杀灭效果相对逊色。对此，对于高温会影响品质的天然食品，首选较低的杀菌温度，但这样无疑也对防腐剂的选择提出更高的要求。
3、对于防腐剂技术，近些年来消费者对于“0防腐”食品的需求度越来越高，故而对于追求健康营养属性的食品而言，防腐剂使用的选择上也将天然防腐剂做为首选。然而，现阶段天然防腐剂行业刚起步有待发展的现状，天然防腐技术相较于化学防腐剂其抑菌效果与广谱性均要逊之。同时，用于高温影响品质的食品，且具有常温长保作用效果的防腐剂很少，限制了相关食品的发展。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术提供了一种常温长保天然防腐剂及其制备方法和应用。针对食品菌种特点，通过防腐成分筛选和复配的方法，制备得到相应的常温长保效果
2、第一方面，本专利技术提供了一种常温长保天然防腐剂的制备方法，包括以下步骤：
3、步骤1.在37℃下将食品破化腐败；
4、步骤2.将腐败样品分离菌落，并纯化得到菌种；
5、步骤3.将菌种进行低温储藏；
6、步骤4.鉴定所述菌种，并确定属种；
7、步骤5.根据步骤4的鉴定结果，获取备选的天然防腐成分单体；
8、步骤6.使用琼脂稀释法，对所述天然防腐成分单体进行抑菌效果测试，初步筛选高效天然防腐成分；
9、步骤7.天然防腐成分的复配，选取最佳协同配比方案；
10、步骤8.将所述最佳协同配比方案进行产品风味测试：
11、步骤9.将所述最佳协同配比方案进行保质期测试；
12、步骤10.根据步骤8和步骤9的测试结果，筛选具有最佳常温长保效果的复配防腐方案作为天然防腐剂产品。
13、进一步的，所述步骤1中，将灭菌处理后且未添加任何防腐剂的食品样品放置于37℃下进行培养，直至样品出现明显腐败。
14、进一步的，所述步骤2中，包括以下步骤：
15、2.1将步骤1已出现明显腐败的样品取样，然后加入无菌生理盐水进行稀释，搅拌均质，制成重量比1:10的样品均液；
16、2.2吸取所得均液，加入无菌生理盐水中震荡均匀制成重量比1:100的样品均液；
17、2.3重复步骤2.1和步骤2.2的操作，制备10倍系列稀释的样品均液；
18、2.4选取步骤2.3所得样品均液，吸取相应样品均液于无菌培养皿中；
19、2.5及时将冷却的营养琼脂培养基倾注培养皿，转动培养皿使其混合均匀；
20、2.6水平放置待营养琼脂凝固后，将平板翻转，置于37℃下培养；
21、2.7选择样品合适稀释度的平板，同时观察记录各平板内所有单个菌落的形态特征，并将形态特征不同的腐败菌落进行标记；所述样品合适稀释度为平板内菌落为可见单个且边缘清晰的状态，所述所有单个菌落的形态特征包括大小、形状、边缘状态、表面性状、隆起度、色泽、透明度、硬度等；
22、2.8从标记的菌落中挑取少量菌种使用平板划线法在无菌营养琼脂培养基表面划线，然后将划线平板倒置，于37℃下培养后观察，若平板内所有菌落形态均相同则得到纯化的菌种，若平板内出现不同形态的菌落则标记后分别使用平板划线法进行分离，直至划线平板内所有菌落形态均相同。
23、进一步的，所述步骤3中，使用传代培养保藏法将步骤2分离纯化的腐败菌菌种进行低温储藏。
24、进一步的，所述步骤4中，包括以下步骤：
25、4.1挑取步骤2得到的纯化菌种，通过制片、干燥、固定、染色、脱色、复染、水洗、干燥等步骤分别制成染色玻片标本后，分别观察并记录各腐败菌的革兰氏染色情况和细菌形态学特征；
26、4.2根据步骤4.1中对各腐败菌的形态学以及染色反应的情况，使用bergey细菌鉴定手册进行检索，初步锁定各腐败菌的科属后根据相应的群的鉴别特征进行相应的生理生化实验，从而确定腐败菌的属种。
27、进一步的，所述步骤5中，根据步骤4的腐败菌鉴定结果，通过资料检索和实验等方法获得备选的天然防腐成分。
28、进一步的，所述步骤6中，使用琼脂稀释法对步骤5获取的备选天然防腐成分单体进行抑菌效果测试，测试菌种为步骤2分离纯化的腐败菌种；各天然防腐成分单体测试浓度为最低抑菌浓度mic及2倍mic，培养条件为37℃，观察各培养皿中的菌落生长情况，根据菌种类型和相应抑菌效果，筛选高效天然防腐成分。
29、进一步的，步骤6中所述琼脂稀释法包括以下步骤：
30、6.1按步骤5中通过查询文献资料获取的各天然抑菌成分的mic、2mic浓度，加入融化并冷却至50℃的定量琼脂培养基中，制成含mic及2mic浓度的天然抑菌成分平板；
31、6.2用移液枪吸取1ml的已稀释好的腐败菌菌悬液，其接种量＞5000cfu，加至无菌培养皿中，倒入配置好的含mic或2mic浓度天然抑菌成分的培养基，摇匀；
32、6.3放置于37℃下培养，在暗色、无反光物体表面观察腐败菌的生长情况。
33、进一步的，所述步骤7中，将已知浓度的菌悬液和步骤6的筛选方案一同添加至肉汤培养液中放置培养，放置于37℃培养按一定时间梯度取样进行菌落计数，测试各种天然抑菌成分之间的抑菌作用为协同、拮抗或独立作用，选取最佳协同配比。
34、进一步的，所述步骤8中，在食品混拌最后一步，将步骤7所得复配防腐方案按比例添加至食品中混拌均匀，装袋二次杀菌后进行感官评价，测试该防腐方案对食品感官风味的影响。
35、进一步的，所述步骤9中，对使用步骤7所得复配防腐方案的食品进行保质测试，测试条件包括温度和时间，测试指标包括菌落总数、大肠菌群、感官品鉴等。
36、第二方面，本专利技术提供了一种第一方面任一项所述常温长保天然防腐剂的制备方法得到的防腐剂。
37、第三方面，本专利技术提供了一种第一方面任一项所述常温长保天然防腐剂的制备方法得到的防腐剂在食品防腐中的应用。
38、本专利技术提供的上述技术方案与现有技术相比至少具有如下优点：
39、本专利技术提供了一种常温长保天本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，将灭菌处理后且未添加任何防腐剂的食品样品放置于37℃下进行培养，直至样品出现明显腐败。
3.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤3中，使用传代培养保藏法将步骤2分离纯化的腐败菌菌种进行低温储藏。
5.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，包括以下步骤：
6.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤5中，根据步骤4的腐败菌鉴定结果，通过资料检索和实验等方法获得备选的天然防腐成分。
7.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，在步骤6中，所述琼脂稀释法包括以下步骤：
8.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤7中，将已知浓度
9.一种权利要求1～8任一项所述常温长保天然防腐剂的制备方法得到的防腐剂。
10.一种权利要求1～8任一项所述常温长保天然防腐剂的制备方法得到的防腐剂在食品防腐中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，将灭菌处理后且未添加任何防腐剂的食品样品放置于37℃下进行培养，直至样品出现明显腐败。
3.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤3中，使用传代培养保藏法将步骤2分离纯化的腐败菌菌种进行低温储藏。
5.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，包括以下步骤：
6.根据权利要求1所述常温长保天然防腐剂的制备方法，其特征在于，所...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴雁姿，刘嘉霖，夏新伟，陈亮，杜海楠，
申请(专利权)人：深圳市星期零食品科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。