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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物分离培养,具体涉及一种降解淀粉的酿酒酵母其筛选方法和应用。
技术介绍
1、淀粉普遍存在于粮食、水果等多种酿酒原料中。在酿酒工业中通常通过蒸煮、糊化、微生物糖化等方式使原料中的淀粉转变为葡萄糖,再进一步发酵成乙醇。
2、自然界中可以降解淀粉的微生物主要是芽孢杆菌属细菌及霉菌。芽孢杆菌属细菌应用最广,主要有解淀粉芽孢杆(bacillus amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis),还有枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)以及蜡状芽孢杆菌(bacilluscereus)等。霉菌主要有曲霉属(aspergillus)及青霉属(penicillium);其中,常见的有米曲霉(aspergillus oryzae)、烟曲霉(aspergillus fumigatus)和黑曲霉(aspergillusniger)等。但上述微生物又不具备酒精发酵特性,因此在生长中,需要添加蒸煮或微生物糖化工艺。据报道在淀粉质原料的传统酒精发酵中,原料的蒸煮占酒精生产总能耗的4%左右,为了节能、节水、简化工艺和缩短生产周期,筛选淀粉降解活性强且具有发酵特性的酿酒酵母菌株具有巨大应用价值。
技术实现思路
1、本专利技术旨在解决上述技术问题,提供一种降解淀粉的酿酒酵母,其具有淀粉降解活性强和发酵特性好的特点。
2、本专利技术的技术方案为:
3、一种降解淀粉的酿酒酵母,所述酿酒酵母命名为酿酒酵母(s
4、本专利技术还提供所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,包括以下步骤:
5、(1)采摘新鲜芒果,取出果肉并打浆,使果浆自然发酵,得到芒果发酵汁;
6、(2)每天取芒果发酵汁1ml稀释,涂布ypd固体平板和wl鉴定培养基,28℃培养3天,用接种针挑取不同形态的单个菌落接种于ypd液体培养基,得到不同单菌株菌液;
7、(3)再吸取0.1ml不同单菌株菌液涂布ypd固体平板,获得菌株的纯菌落;
8、(4)将菌株的纯菌落用ypd液体培养基复壮,用接种针点接到淀粉培养基平板上,待菌液自然干燥后,于28℃恒温培养箱内培养1-2天,菌体长至0.2-0.3mm圆形大小时,取卢戈氏碘液0.18-0.22ml滴在菌落上,待充分渗透之后,观察菌落周围透明圈,选取有透明圈的菌株,得到初筛菌株;
9、(5)将初筛菌株按照1×106cfu/ml接种于ypd液体培养基中,28℃培养24h后,取种子液1ml接种于9ml淀粉培养基中,发酵120h,得到发酵液;
10、(6)取发酵液于8000r/min离心5min,吸取上清液,用蒸馏水稀释10倍后取5ml,加入1.5ml淀粉显色剂,再加20ml蒸馏水稀释后摇匀,显色5min,在560nm处测其a560,计算淀粉降解率,选取淀粉降解率最高的菌株,即为酿酒酵母yqmsf2-4。
11、优选地,本专利技术所述ypd固体平板含酵母浸粉10g、蛋白胨20g、葡萄糖20g、琼脂20g,水加至1000ml;所述ypd液体培养基含酵母浸粉10g、蛋白胨20g、葡萄糖20g,水加至1000ml。
12、优选地,本专利技术所述淀粉培养基含蛋白胨10g、酵母提取物5g、nacl 10g、可溶性淀粉20g、琼脂粉18g,调整ph值为7.0,加水至1000ml。
13、优选地,本专利技术所述步骤(1)中,自然发酵6-7天。
14、优选地,本专利技术所述储液a含磷酸二氢钾5.5g、氯化钾4.25g氯化钙1.25g硫酸镁1.25g,加水定容至400ml;所述储液b含氯化铁0.25、硫酸锰0.25,加水定容至100ml;储液c的制备是将0.44g溴甲酚绿溶解于20ml浓度为50%的酒精中。优选地,所述wl鉴定培养基含1wt%酵母粉、2wt%蛋白胨、2wt%葡萄糖、2wt%琼脂、4wt%储液a、0.1wt%储液b,在121℃灭菌20分钟后加入氯霉素1wt%、储液c 0.1wt%和2.2wt%丙酸钠,水加至100wt%,调ph值为6.5。
15、本专利技术还提供所述降解淀粉的酿酒酵母在食品发酵中的应用,特别是在食品为水果、粮食、含淀粉蔬菜中发酵中应用,其具有很强的产酒精和降解淀粉能力。
16、由于采用上述技术方案,本专利技术的有益效果为:
17、1、本专利技术的酿酒酵母具有很强的淀粉降解活性,淀粉降解率高达97.65%,可应用于淀粉蔬菜以及粮食酒的发酵,具有很强的降解淀粉能力。
18、2、本专利技术的酿酒酵母具有很好的发酵特性,具有很强的好产酒精能力,很适合在果酒发酵中应用,特别适合应用在含淀粉水果中的发酵。
19、菌种保藏说明:本专利技术的酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)yqmsf2-4,于2024年5月24日,保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc),保藏地址:广州市先烈中路100号,广东省科学院微生物研究所,其保藏编号为gdmcc no:64680。
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1.一种降解淀粉的酿酒酵母,其特征在于:所述酿酒酵母命名为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YQMSF2-4,所述菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏号为:GDMCC No:64680。
2.如权利要求1所述降解淀粉的酿酒酵母,其特征在于:其来源于芒果。
3.如权利要求1所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.如权利要求3所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于:所述步骤(1)中,自然发酵6-7天。
5.如权利要求3所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于:所述YPD固体平板含酵母浸粉10g、蛋白胨20g、葡萄糖20g、琼脂20g,水加至1000mL;所述YPD液体培养基含酵母浸粉10g、蛋白胨20g、葡萄糖20g,水加至1000mL。
6.如权利要求3所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于:所述淀粉培养基含蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl 10g、可溶性淀粉20g、琼脂粉18g,调整pH值为7.0,加水至1000mL。
7.如权利要
8.如权利要求7所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于:所述储液A含磷酸二氢钾5.5g、氯化钾4.25g氯化钙1.25g硫酸镁1.25g,加水定容至400ml;所述储液B含氯化铁0.25、硫酸锰0.25,加水定容至100ml;储液C的制备是将0.44g溴甲酚绿溶解于20ml浓度为50%的酒精中。
9.如权利要求1所述降解淀粉的酿酒酵母在食品发酵中的应用。
10.如权利要求9所述降解淀粉的酿酒酵母在食品发酵中的应用,其特征在于:所述食品为水果、粮食、含淀粉蔬菜中的一种。
...【技术特征摘要】
1.一种降解淀粉的酿酒酵母,其特征在于:所述酿酒酵母命名为酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)yqmsf2-4,所述菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏号为:gdmcc no:64680。
2.如权利要求1所述降解淀粉的酿酒酵母,其特征在于:其来源于芒果。
3.如权利要求1所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.如权利要求3所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于:所述步骤(1)中,自然发酵6-7天。
5.如权利要求3所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于:所述ypd固体平板含酵母浸粉10g、蛋白胨20g、葡萄糖20g、琼脂20g,水加至1000ml;所述ypd液体培养基含酵母浸粉10g、蛋白胨20g、葡萄糖20g,水加至1000ml。
6.如权利要求3所述降解淀粉的酿酒酵母的筛选方法,其特征在于:所述淀粉培养基含蛋白胨10g、酵母提取物5g、nacl 10g、可溶性...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨莹,叶冬青,孙健,李丽,何雪梅,管敬喜,饶川艳,吴翠琼,李杰民,
申请(专利权)人:广西壮族自治区农业科学院,
类型:发明
国别省市:
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