【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及皮肤修复领域，尤其涉及一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺。
技术介绍
1、皮炎是临床较为常见的疾病，根据世界变应性组织推荐使用的皮炎分类方式，皮炎分为接触性皮炎、湿疹、过敏性皮炎及其他类型皮炎。其中，由接触外界物质引起的接触性皮炎(化妆品、尿布、漆性皮炎)中，能进一步归类的湿疹如特应性皮炎、脂溢性皮炎、淤积性皮炎、自身敏感性皮炎、伤口周围感染性皮炎、湿疹、慢性单纯性苔藓、癣菌疹、手部皮炎、多形日光疹等；不能进一步归类的湿疹如小腿湿疹、春季湿疹、夏季湿疹、痒疹等。皮炎和湿疹常作为同义词用来指一种皮肤炎症，代表皮肤对于化学制剂、蛋白、细菌与真菌等种种物质的变应性反应。目前对于皮炎治疗药物，西医主要采用的多是皮质激素类药物，内服抗组胺及抗生素类药物，其中，抗组胺类药主要起镇静止痒作用，抗生素用于感染的皮损，含皮质激素的药物外搽对于轻症皮炎疗效显著。然而近年来，由于外用激素制剂引发的皮肤损害急剧增加，不良反应显著。如果长期频繁或大量使用含皮质类激素的药物，会对导致成为敏感肌肤，并可能伴有全身的皮肤敏感；长期大量外用激素还可经皮吸收进入血运循环，引起糖尿病等；滥用抗生素可能导致细菌抗药性加强，人体免疫功能减退，致使病情反复难愈。
2、为此，需要一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺解决这个问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，旨在解决
技术介绍
中提出的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案:>
3、一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，所述制备方法包括如下步骤：s1、斜面培养基的制作；s2、接种斜面菌种；s3、制作灭菌培养液；s4、培养摇瓶种子液；s5、培养种子罐种子液；s6、将种子罐中的种子液进行发酵；s7、将发酵液分离纯化得到医用透明质酸钠凝胶。
4、优选的，所述s1中制备方法为：称量马铃薯100g、糖10g、琼脂10～12g、水500ml，将马铃薯洗净、去皮及芽眼，切碎后加占配制量1.3倍的水，煮沸20分钟。然后用纱布过滤，取得500ml的滤液，通过漏斗装置将滤液分装于试管中，装量约占试管高度的1/4，确保不玷污管口及管壁，每7～10支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包严，在加热排冷气后，压力在0.1～0.15mpa下灭菌30分钟，降压至零时取出培养基，趁热摆成斜面。
5、优选的，所述s2中制备方法为：待s1中的斜面培养基温度下降至室温后，在其表面接种链球菌菌株，待链球菌迅速繁殖直到长满斜面，取出链球菌群得到斜面菌种。
6、优选的，所述s3中制备方法为：称取蛋白陈10g、牛肉浸膏5g、酵丹膏5g、葡萄糖5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.3g，加水溶解至1l，115℃灭菌30min得到灭菌培养液。
7、优选的，所述s4中制备方法为；将s2中得到的斜面菌种接种于装有s3中的灭菌培养液400ml的1l锥形瓶中，37℃温度下培养12-16h，在光学显微镜下观察菌体是否生长良好，无杂污染，即可得到摇瓶种子液。
8、优选的，所述s5中制备方法为：按摇瓶种子液的配方配制培养液100l，加入种子罐中，通入蒸汽加热，在115℃下灭菌30min，然后冷却至37℃，用火焰接种法将摇瓶种子液接种于种子罐中，通气量50l/min，搅拌120rpm/37c培养12-16小时，在光学显微镜下观察菌体生长良好，无杂菌污染，即可得到种子罐种子液。
9、优选的，所述s6中制备方法为：按摇瓶种子液配方配制发酵液，并将葡萄糖的含量提高到5％配制发酵培养液1000l，加入1.4立方米的发酵罐中，通入蒸汽加热，在115℃灭菌30min，冷却至37℃后，将种子罐中的种子液通过移种管道移至发酵罐中，维持通气量500～600l/min，搅拌转速120rpm，在37℃发酵40～46h，在发酵过程中，发酵液的ph值不断下降，加5mo l l氧化钠溶液，调节ph值至6.5～7.0，发酵后期，当葡萄糖浓度下降至0.5％以下，ph值下降很慢或不再下降时，发酵完成。
10、优选的，所述s7中制备方法为：将三氯乙酸加入s6中的发酵液调节ph至4.0～4.5，利用板框过滤发酵液去除其中的菌体，滤液用稀氢氧化钠调ph至6.0～6.5,并加入三倍体积的95％乙醇，沉淀出透明质酸；沉淀用发酵体积的0.1mo l/l氯化钠水溶液溶解，加入0.5％的活性炭，搅拌吸附过滤，滤液在搅拌下，加入过量的1％cpc水溶液与滤液中的透明质酸发生络合沉淀，静置使沉淀下沉，虹吸出母液，加入0.1mo l l氯化钠液洗涤沉淀两次，沉淀于发酵体积的0.4mo l/l化钠液中搅拌解离过夜，然后过滤，滤液加三倍体积乙醇沉淀，沉淀物即为医用透明质酸钠凝胶。
11、有益效果：本专利技术的斜面培养基中的蛋白胨、肉汤、葡萄糖提供了微生物所需的碳源、氮源和能量源，同时含有一定量的微量元素和无机盐等，可以满足微生物生长的基本需求；本专利技术灭菌培养液的作用是为培养物提供必要的营养物质，促进链球菌的生长和代谢活动；本专利技术种子罐的种子液成分作用主要是使孢子发芽、生长繁殖成菌(丝)体，接入发酵罐能迅速生长，达到一定的菌体量，以利于产物的合成，并且种子罐可以使有限数量的孢子发芽、生长并繁殖成大量的菌丝体，以满足发酵罐的需要，这种培养过程不仅促进了菌体的生长，还为后续产物的形成打下了基础，种子罐通过其加热、保温及冷却的特性，确保了孢子在适宜的环境下进行发芽和繁殖，从而为发酵过程提供了足够的菌体数量和质量；本专利技术的医用透明质酸钠凝胶是一种糖胺聚糖，能够起到促进创伤修复的作用，还具有一定的补水效果，可以促进表皮细胞迁移速度，在一定程度上预防疤痕形成，同时在皮肤表面形成保护层，用于缓解皮肤炎症引起的红斑、瘙痒、刺痛、发热、干燥脱屑症状，对痤疮愈后、皮肤过敏与激光光子等微创术后闭合性创面的护理，医用效果好。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：S1、斜面培养基的制作；S2、接种斜面菌种；S3、制作灭菌培养液；S4、培养摇瓶种子液；S5、培养种子罐种子液；S6、将种子罐中的种子液进行发酵；S7、将发酵液分离纯化得到医用透明质酸钠凝胶。
2.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述S1中制备方法为：称量马铃薯100g、糖10g、琼脂10～12g、水500ml，将马铃薯洗净、去皮及芽眼，切碎后加占配制量1.3倍的水，煮沸20分钟。然后用纱布过滤，取得500ml的滤液，通过漏斗装置将滤液分装于试管中，装量约占试管高度的1/4，确保不玷污管口及管壁，每7～10支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包严，在加热排冷气后，压力在0.1～0.15MPa下灭菌30分钟，降压至零时取出培养基，趁热摆成斜面。
3.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述S2中制备方法为：待S1中的斜面培养基温度下降至室温后，在其表面接种链球菌菌株，待链球菌迅速繁殖直到长满斜面，取出链球菌群得到斜面菌种
4.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述S3中制备方法为：称取蛋白陈10g、牛肉浸膏5g、酵丹膏5g、葡萄糖5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.3g，加水溶解至1L，115℃灭菌30min得到灭菌培养液。
5.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述S4中制备方法为；将S2中得到的斜面菌种接种于装有S3中的灭菌培养液400ml的1L锥形瓶中，37℃温度下培养12-16h，在光学显微镜下观察菌体是否生长良好，无杂污染，即可得到摇瓶种子液。
6.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述S5中制备方法为：按摇瓶种子液的配方配制培养液100L，加入种子罐中，通入蒸汽加热，在115℃下灭菌30min，然后冷却至37℃，用火焰接种法将摇瓶种子液接种于种子罐中，通气量50L/min，搅拌120rpm/37C培养12-16小时，在光学显微镜下观察菌体生长良好，无杂菌污染，即可得到种子罐种子液。
7.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述S6中制备方法为：按摇瓶种子液配方配制发酵液，并将葡萄糖的含量提高到5％配制发酵培养液1000L，加入1.4立方米的发酵罐中，通入蒸汽加热，在115℃灭菌30min，冷却至37℃后，将种子罐中的种子液通过移种管道移至发酵罐中，维持通气量500～600L/min，搅拌转速120rpm，在37℃发酵40～46h，在发酵过程中，发酵液的pH值不断下降，加5molL氧化钠溶液，调节PH值至6.5～7.0，发酵后期，当葡萄糖浓度下降至0.5％以下，pH值下降很慢或不再下降时，发酵完成。
8.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述S7中制备方法为：将三氯乙酸加入S6中的发酵液调节pH至4.0～4.5，利用板框过滤发酵液去除其中的菌体，滤液用稀氢氧化钠调pH至6.0～6.5,并加入三倍体积的95％乙醇，沉淀出透明质酸；沉淀用发酵体积的0.1mol/L氯化钠水溶液溶解，加入0.5％的活性炭，搅拌吸附过滤，滤液在搅拌下，加入过量的1％CPC水溶液与滤液中的透明质酸发生络合沉淀，静置使沉淀下沉，虹吸出母液，加入0.1molL氯化钠液洗涤沉淀两次，沉淀于发酵体积的0.4mol/L化钠液中搅拌解离过夜，然后过滤，滤液加三倍体积乙醇沉淀，沉淀物即为医用透明质酸钠凝胶。
...【技术特征摘要】
1.一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：s1、斜面培养基的制作；s2、接种斜面菌种；s3、制作灭菌培养液；s4、培养摇瓶种子液；s5、培养种子罐种子液；s6、将种子罐中的种子液进行发酵；s7、将发酵液分离纯化得到医用透明质酸钠凝胶。
2.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述s1中制备方法为：称量马铃薯100g、糖10g、琼脂10～12g、水500ml，将马铃薯洗净、去皮及芽眼，切碎后加占配制量1.3倍的水，煮沸20分钟。然后用纱布过滤，取得500ml的滤液，通过漏斗装置将滤液分装于试管中，装量约占试管高度的1/4，确保不玷污管口及管壁，每7～10支试管扎一捆，棉塞部分用牛皮纸包严，在加热排冷气后，压力在0.1～0.15mpa下灭菌30分钟，降压至零时取出培养基，趁热摆成斜面。
3.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述s2中制备方法为：待s1中的斜面培养基温度下降至室温后，在其表面接种链球菌菌株，待链球菌迅速繁殖直到长满斜面，取出链球菌群得到斜面菌种。
4.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述s3中制备方法为：称取蛋白陈10g、牛肉浸膏5g、酵丹膏5g、葡萄糖5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.3g，加水溶解至1l，115℃灭菌30min得到灭菌培养液。
5.根据权利要求1所述的一种医用透明质酸皮肤修护液制备工艺，其特征在于，所述s4中制备方法为；将s2中得到的斜面菌种接种于装有s3中的灭菌培养液400ml的1l锥形瓶中，37℃温度下培养12-16h，在光学显微镜下观察菌体是否生长良好，无杂污染，即可得到摇瓶种子液。
6.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈东升，
申请(专利权)人：绯梵广州生物医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。