【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品中营养物质分析，具体而言，涉及定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法。
技术介绍
1、近年来，营养物质定量分析方法是食品营养评价领域中研究热点。奶产品有利于大脑发育，是得益于牛奶脂肪中所含有的一种独特成分--磷脂。磷脂是细胞膜的重要组成部分，在人体许多的重要生理功能中发挥着不可替代的作用。对婴幼儿来说，磷脂是促进脑部及智力发育至关重要的元素。而对青少年及成年人来说，磷脂有改善记忆力、减轻压力等作用。而对老年人来说，它可以预防老年痴呆，还能调解脂肪代谢，起到保护肝脏及心脑血管的作用。
2、而动植物油脂中磷脂含量的测量存在基质复杂，检测难度大等问题。
3、鉴于此，特提出本申请。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法。
2、本专利技术是这样实现的：
3、第一方面，本专利技术提供一种定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其包括：
4、(1)动植物样品的富集：
5、将动植物样品与富集试剂混合，随后经第一离心取固体沉淀物作为待提样品，所述富集试剂包括丙酮；
6、(2)提取：将第一提取液和第二提取液加入到富集后的所述待提样品中，使所述待提样品分散，然后经第二离心并吸取底部有机相溶液，作为样品溶液，其中，所述第一提取液为edta与csoh混合形成的edta-cs+水溶液，所述第二提取液为三苯基磷酸酯、氘代氯仿和氘代甲醇的复
7、(3)核磁检测和分析：将所述样品溶液置于核磁共振谱仪内进行核磁检测，得到核磁共振磷谱数据并进行处理分析，获得峰面积并按照如下计算公式计算磷脂在油脂中的含量：
8、
9、式中：c—采用核磁共振法测得的被测物的纯度mg/mg；
10、ix—不同磷脂指定峰的积分面积；
11、iref—内标物tpp指定峰的积分面积；
12、mx—不同磷脂的分子量；
13、mref—内标物tpp的分子量；
14、mref—添加1ml的tpp-cdcl3-cd3od溶液中内标物的质量；
15、mx—动植物样品的称样量。
16、在可选的实施方式中，所述动植物样品与所述富集试剂的质量体积比为1g：6-10ml。
17、在可选的实施方式中，所述动植物样品包括动物性样品和植物性样品中的至少一种；当所述动植物样品包括植物性样品时，所述富集试剂还包括水，所述富集试剂中丙酮和水的体积比为2-4：1；
18、优选地，所述动植物样品为奶油或黄油。
19、在可选的实施方式中，对所述动植物样品与所述富集试剂混合后离心收集取固体沉淀物作为一次富集，重复与所述富集试剂混合后离心收集取固体沉淀物的操作，重复1-3次。
20、在可选的实施方式中，收集所述固体沉淀物后，还包括对所述固体沉淀物进行干燥以挥发残留的丙酮。
21、在可选的实施方式中，所述第一离心和所述第二离心的转速均为8000-12000r/min，所述第一离心和所述第二离心的时间均为10-20min。
22、在可选的实施方式中，所述第一提取液是采用浓度为0.1-0.3mol/l的edta水溶液和浓度为0.8-1.2mol/l的csoh水溶液混合形成的ph值为7.0-8.0的edta-cs+水溶液。
23、在可选的实施方式中，所述第二提取液中三苯基磷酸酯、氘代氯仿和氘代甲醇的质量体积比为1g：(0.8-1.2)ml：(0.4-0.6)ml。
24、在可选的实施方式中，所述核磁检测时的参数为：核磁共振谱仪400mhz，脉冲序列：zgpg30，采样次数1500-2500，谱宽300-500ppm，采样点数60-70k，弛豫时间3-4s，测试时间100-150min。
25、在可选的实施方式中，对所述核磁共振磷谱数据进行分析的软件包括topspin或者mestrenova。
26、本专利技术具有以下有益效果：
27、本申请提供的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其利用丙酮作为富集试剂实现对动植物油脂等复杂基体中磷脂的富集，可以实现磷脂与其他成分的有效分离，随后利用第一提取液和第二提取液进行混合提取时，第一提取液中的edta-cs+络合物可以使检测峰更尖锐易于检出，同时可以缩短检测时间，而第二提取液中的三苯基磷酸酯作为内标物，其可以在后续检测含量时作为参比依据，氘代氯仿和氘代甲醇可以其利用极性不同使脂类分离出来，从而使提取获得的有机相溶液可以直接作为样品溶液进行测试。本申请的前处理简单，灵敏度高，信号分辨率高，干扰信号少，实验过程中消耗的溶剂和耗材少且定量准确。因此，能够满足常规的食品营养评价中磷脂高通量快速分析的要求。
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1.一种定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，其包括：
2.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述动植物样品与所述富集试剂的质量体积比为1g：6-10mL。
3.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述动植物样品包括动物性样品和植物性样品中的至少一种；当所述动植物样品包括植物性样品时，所述富集试剂还包括水，所述富集试剂中丙酮和水的体积比为2-4：1；
4.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，对所述动植物样品与所述富集试剂混合后离心收集取固体沉淀物作为一次富集，重复与所述富集试剂混合后离心收集取固体沉淀物的操作，重复1-3次。
5.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，收集所述固体沉淀物后，还包括对所述固体沉淀物进行干燥以挥发残留的丙酮。
6.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征
7.根据权利要求1-6任一项所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述第一提取液是采用浓度为0.1-0.3mol/L的EDTA水溶液和浓度为0.8-1.2mol/L的CsOH水溶液混合形成的pH值为7.0-8.0的EDTA-Cs+水溶液。
8.根据权利要求1-6任一项所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述第二提取液中三苯基磷酸酯、氘代氯仿和氘代甲醇的质量体积比为1g：(0.8-1.2)mL：(0.4-0.6)mL。
9.根据权利要求1-6任一项所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述核磁检测时的参数为：核磁共振谱仪400MHz，脉冲序列：zgpg30，采样次数1500-2500，谱宽300-500ppm，采样点数60-70k，弛豫时间3-4s，测试时间100-150min。
10.根据权利要求1-6任一项所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，对所述核磁共振磷谱数据进行分析的软件包括Topspin或者MestRenova。
...【技术特征摘要】
1.一种定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，其包括：
2.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述动植物样品与所述富集试剂的质量体积比为1g：6-10ml。
3.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述动植物样品包括动物性样品和植物性样品中的至少一种；当所述动植物样品包括植物性样品时，所述富集试剂还包括水，所述富集试剂中丙酮和水的体积比为2-4：1；
4.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，对所述动植物样品与所述富集试剂混合后离心收集取固体沉淀物作为一次富集，重复与所述富集试剂混合后离心收集取固体沉淀物的操作，重复1-3次。
5.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，收集所述固体沉淀物后，还包括对所述固体沉淀物进行干燥以挥发残留的丙酮。
6.根据权利要求1所述的定量核磁共振磷谱法检测动植物油脂中磷脂含量的方法，其特征在于，所述第一离心和所述第二离心的转速均为8000-12000r/min...
【专利技术属性】
技术研发人员：王彤彤，陈刚，谭思佳，李亮，
申请(专利权)人：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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