【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物提取，具体涉及一种韭菜子总皂苷、制备纯化方法及其在制备治疗肾病综合征药物、保健品方面的新应用。
技术介绍
1、步入21世纪，人们由于生活习惯和饮食偏嗜等，肾脏类疾病在临床上后天发病率逐年提高，尤其是肾病综合征严重危害人类的生命健康和生存质量。肾病综合征表现为严重漏出蛋白尿、高血脂、低蛋白血症及外在皮肤水肿，即所谓的“三高一低”，及其他代谢紊乱为特征的一组临床症候群。肾病综合征通常是由肾小球损伤引起的。当血液通过肾脏时，肾小球会过滤血液，将身体需要的东西与不需要的东西分开。健康的肾小球能维持体内所需蛋白质含量，当肾小球受损时，将允许过多的血液蛋白质渗入尿液，导致肾病综合征。大量蛋白尿是最主要的临床表现，也是肾病综合征最基本的病理生理机制。肾病综合征临床多发且该类疾病较为难治，患者会出现血小板异常、血液浓缩、抗凝物质大量丢失等情况，进而会引发血栓等并发症，严重威胁人类健康。目前临床上治疗该疾病以糖皮质激素和利尿剂为主。然而，这些药物的治疗效果在不同的患者群体中普遍存在差异和副作用。因此，探索新的潜在有效药物治疗肾病综合征具有重要意义。目前，尚未有韭菜子在治疗肾病综合征方面应用的文献相关报道。
2、韭菜子(semen allii tuberose)是百合科葱属多年生植物韭菜(alliiumtuberosum rottl.ex spreng.)的干燥成熟种子，韭菜子入药的历史可以追溯到春秋战国时期，本草记载始见于《名医别录》，列为中品，有温肾助阳、固精的作用，常用于遗精、小便频数、遗尿、等虚脱症。研究表明韭
技术实现思路
1、本专利技术目的在于克服现有技术缺陷，提供一种韭菜子总皂苷，该韭菜子总皂苷可用于治疗肾病综合征且疗效显著。
2、为优化韭菜子中总皂苷的提取纯化方法，提高其含量，本专利技术提供了一种使用单因素实验和响应面法优化的韭菜子总皂苷提取纯化工艺方法。
3、本专利技术还提供了上述韭菜子总皂苷在制备治疗肾病综合征药物、保健品方面的新应用。
4、为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
5、一种韭菜子总皂苷的制备方法，其将韭菜子加入乙醇中进行提取，提取结束后减压浓缩，得到粗提物；粗提物用水溶解后，上大孔吸附树脂吸附，然后用水、乙醇进行洗脱，收集乙醇洗脱液，经减压浓缩获得组分1；组分1用水溶解，有机溶剂萃取，萃取所得水相经减压浓缩、干燥即得韭菜子总皂苷。
6、具体的，可以将韭菜子加入体积浓度5-90％的乙醇中进行提取，提取1-5次，提取时间60-120s。进一步的，乙醇体积浓度优选10-40％。
7、具体的，粗提物用水溶解后，上hpd100大孔吸附树脂吸附8-15h。
8、具体的，可以选用体积浓度60-80％的乙醇进行洗脱。进一步优选，使用2-4bv倍柱体积的65-75％乙醇以0.4-1bv/h速度进行洗脱。
9、具体的，萃取时所用有机溶剂可以为乙酸乙酯等。
10、本专利技术提供了采用上述制备方法制备所得的韭菜子总皂苷。
11、本专利技术还提供了上述韭菜子总皂苷在制备治疗肾病综合征药物或保健品等中的应用，尤其是在制备治疗由阿霉素引起的肾病综合征药物或保健品中的应用。
12、进一步的，本专利技术还提供了上述韭菜子总皂苷在制备保护肾组织氧化性损伤药物或保健品中的应用。
13、本专利技术中，以料液比1g：10ml作为闪式提取的固定因素。使用单因素实验确定提取所需的乙醇浓度、提取时间和提取次数对韭菜子总皂苷提取所得质量的影响，步骤如下：单因素实验时按照1：10的料液比在粉碎后的韭菜子中加入0％-95％乙醇进行闪式提取、提取次数1-5次、提取时间为60-120s进行考察。
14、优选的，单因素实验优化韭菜子总皂苷闪式提取工艺条件为：20％乙醇，提取次数3次，提取时间105s。
15、对韭菜子总皂苷的响应面实验中进行三因素三水平响应面实验设计时，是以单因素优化的最佳提取条件为中心值，以韭菜子总皂苷质量为响应值。在响应面中建立的二次多元回归方程模型为：
16、y＝7.79-0.3869a-0.2020b-0.4004c-0.0373ab-0.3449ac+0.2258bc-1.49a2-1.27b2-1.19c2，
17、式中y为皂苷质量(mg)，a为乙醇浓度，b为提取次数，c为闪式提取时间。
18、响应面最佳因素提取所得提取物经过大孔树脂(优选的，所述大孔吸附树脂的型号为hpd100，上样液浓度为12mg/ml)，用2-3bv倍柱体积70％乙醇以0.5bv/h速度进行洗脱，合并流分，减压浓缩回收溶剂，干燥，用水复溶后与乙酸乙酯进行1：1(体积:体积)的萃取，萃取所得水相，再次浓缩、干燥得到最终韭菜子总皂苷。
19、提取工艺响应面最优工艺为：乙醇浓度19.052％、提取次数2.97次、提取时间104.569s。为了方便实际操作，将最佳条件调整为：乙醇浓度20％、提取次数3次、提取时间105s，所得粗提物中总皂苷含量为1.95％。粗提物经过大孔树脂hpd100纯化、70％乙醇洗脱以及乙酸乙酯萃取后得到最终韭菜子总皂苷，总皂苷含量在54-58％。
20、本申请公开了一种韭菜子总皂苷的优化提取纯化工艺，其采用单因素和响应面的方法优化韭菜子总皂苷的提取方法，而后对其进行纯化，并对最终产物进行治疗肾病综合征的药理活性研究。试验结果发现：韭菜子总皂苷能够缓解肾病综合征小鼠模型蛋白尿，提升血清中白蛋白水平，具有降低血清中低密度脂蛋白(ldl-c)、血肌酐(cr)、总胆固醇(t-cho)、甘油三酯(tg)、血尿素氮(bun)水平以及肾脏podocin蛋白表达，改善肾组织病理变化。韭菜子总皂苷中、高剂量组均能显著降低阿霉素给药后小鼠肾脏中的mda含量，显著提高t-sod酶活性。
21、和现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
22、1)本专利技术提供了采用上述方法制备得到的韭菜子总皂苷，可以大大缩短韭菜子总皂苷的提取时间，是一种经济高效的韭菜子总皂苷制备方法，其中总甾体皂苷类化合物含量>54％。
23、2)本专利技术还提供了上述韭菜子总皂苷在治疗肾病综合征，尤其是治疗由阿霉素引起的肾病综合征方面的应用。
24、3)本专利技术经试验发现：韭菜子总皂苷对阿霉素诱导的小鼠肾病具有显著的治疗作用，其保护机制可能与增强小鼠肾脏的抗氧化功能有关。因此，本专利技术还提供了上述韭菜子总皂苷在制备治疗肾病综合症药物或保健品的应用。
25、4)本专利技术从韭菜子中提取得到含总甾本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，将韭菜子加入乙醇中进行提取，提取结束后减压浓缩，得到粗提物；粗提物用水溶解后，上大孔吸附树脂吸附，然后用水、乙醇进行洗脱，收集乙醇洗脱液，经减压浓缩获得组分1；组分1用水溶解，有机溶剂萃取，萃取所得水相经减压浓缩、干燥即得。
2.如权利要求1所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，将韭菜子加入体积浓度5-90%的乙醇中进行提取，提取1-5次，提取时间60-120s。
3.如权利要求1所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，粗提物用水溶解后，上HPD100大孔吸附树脂吸附8-15h。
4.如权利要求3所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，选用体积浓度60-80%的乙醇进行洗脱。
5. 如权利要求4所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，用2-4 BV倍柱体积的65-75%乙醇以0.4-1 BV/h速度进行洗脱。
6.如权利要求1所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，萃取时所用有机溶剂为乙酸乙酯。
7.采用权利要求1至6任一所述制备方法制备所得的韭菜子总皂苷。>
8.权利要求7所述韭菜子总皂苷在制备治疗肾病综合征药物或保健品中的应用。
9.权利要求7所述韭菜子总皂苷在制备治疗由阿霉素引起的肾病综合征药物或保健品中的应用。
10.权利要求7所述韭菜子总皂苷在制备保护肾组织氧化性损伤药物或保健品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，将韭菜子加入乙醇中进行提取，提取结束后减压浓缩，得到粗提物；粗提物用水溶解后，上大孔吸附树脂吸附，然后用水、乙醇进行洗脱，收集乙醇洗脱液，经减压浓缩获得组分1；组分1用水溶解，有机溶剂萃取，萃取所得水相经减压浓缩、干燥即得。
2.如权利要求1所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，将韭菜子加入体积浓度5-90%的乙醇中进行提取，提取1-5次，提取时间60-120s。
3.如权利要求1所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，粗提物用水溶解后，上hpd100大孔吸附树脂吸附8-15h。
4.如权利要求3所述韭菜子总皂苷的制备方法，其特征在于，选用体积浓...
【专利技术属性】
技术研发人员：丛悦，杜玉利，王昊，余瑞，靳甜甜，秦新雨，王美珺，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：
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