【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种多肽，特别是指一种大米抗缺氧多肽及其应用。
技术介绍
1、缺氧是许多生理和病理过程中的常见问题，严重影响着人类的健康和生命活动。为了降低人体因缺氧的状态下受到的伤害，有效的措施是给予人体注射或者食用抗缺氧或低氧、抗疲劳的药物。目前市面上抗缺氧或低氧、抗疲劳的药物主要两大类，一类是西药，包括乙酰唑胺，醋甲唑胺，地塞米松，甲羟孕酮，茶碱，舒马普坦；另一类是抗氧化活性成分的植物及其提取物，包括银杏及其提取物，马齿提取物，红景天及其提取物，芜菁多糖，丹参及其制剂，大叶藓属云南百合提取物，雪莲及其提取物，人参皂苷，槲皮素等。前者化学药物对缺氧引起的症状具有一定的缓解作用，但副作用大，且药物在器官中蓄积性高、易引发严重的免疫反应，因而实际使用受到很大限制；后者植物天然产物因大部分来源于名贵中药材，提取、分离纯化工艺复杂，造成药物价格偏高。因此，开发副作用小、疗效确切、性价比高，最佳选择是开发具有药食同源的抗缺氧或低氧、抗疲劳药物。公开号为cn115300604a的申请，公开了公主海葵多肽及其应用，用于抗应激、抗缺氧、抗氧化；公开号为cn114989247a的申请，公开了一种牦牛奶渣抗缺氧或低氧、抗疲劳肽及其制备方法和应用，该多肽的原料为西藏高原海拔4000m的牦牛奶渣，原料珍稀；公主海葵和牦牛奶渣均来源于动物及其附属产物，来源单一不易于大量制备；为了降低抗缺氧多肽的成本、提高抗缺氧的效果，本申请进行了深入的探索。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利
2、本专利技术的技术方案是这样实现的：
3、一种大米抗缺氧多肽，名称为：raep-q0d998，其氨基酸序列如seq id no.1所示。其二级结构中多肽主链骨架围绕一个轴螺旋状上升，被平行于螺旋轴的分子内氢键所稳定。第1-10位氨基酸和第35-36位氨基酸是无规卷曲，占33.33%；第11-34位氨基酸为α-螺旋，占66.67%。
4、二级结构包括a-螺旋17%，β-折叠27%，无规则卷曲17%，β转角21%。
5、上述大米抗缺氧多肽的制备方法，步骤为：
6、原料准备：选择优质大米作为原料，去除杂质，粉碎，以便于后续的多肽提取过程。
7、多肽提取：选择料液比1:10（大米粉：25℃水），持续搅拌，用4%的氢氧化钠溶液调整ph值为9，然后用碱性蛋白酶（添加量相对固形物的0.3‰，酶活200000 u/g）酶解2-4小时（终点判断是ph值30分钟内不在变化），使多肽从大米粉中释放出来并溶解在水中。随后，离心（3000 rpm）分离，得到大米渣和上清液。
8、醇沉：将上清液添加75 wt%乙醇，使多肽沉淀下来，再进行离心（3000 rpm）分离，得到沉淀多肽，水相弃去。
9、纯化：通过逆流过滤（逆流色谱技术）的手段，对上述多肽进行进一步纯化，去除其他杂质，如有机物、糖类和脂质等。
10、干燥：纯化后的大米多肽通过冷冻喷雾方法，得到多肽粉末。
11、圆二色性（cd）鉴定二级结构：利用jasco j-1500圆二色谱仪分析抗氧化肽的二级结构，并通过手性扫描进行测定。在该方法中，样品是用超纯水制备的0.2 mg/ml的蛋白溶液。采用spectra manager软件对cd光谱数据进行平滑预处理，保存上传http://dichroweb.cryst.bbk.ac.uk网站，波数范围选择190到240 nm，采用contin算法评估二级结构相对含量进行验证。
12、hplc-ms多肽鉴定：首先将样本用50 mm nh4hco3重新溶解，然后对样本还原、烷基化、脱盐，之后将处理好的样品通过液质联用（lc-ms/ms）分析，得到质谱原始结果的raw文件，经过软件peaks studio10.6分析，匹配数据库，再进行alphafoid-predicted得到相关的鉴定结果和结构信息。
13、上述大米抗缺氧多肽在在制备抗缺氧药物中的应用。
14、一种大米抗缺氧多肽的药物，其中大米抗缺氧多肽的氨基酸序列如seq id no.1所示。
15、本专利技术具有以下有益效果：
16、本申请提供了一种大米抗缺氧多肽，该多肽能够显著提高细胞和生物体在缺氧环境下的生存能力和生理功能。本专利技术的多肽具有来源天然、安全性高、效果显著等优点，具体来说：在细胞缺氧条件下，经过高、中、低剂量多肽处理的细胞的存活率分别提高98%、85%、57%，对缺氧细胞内能量（线粒体功能指标如 atp 生成量）的提高分别为113%、103%、69%，效果显著可广泛应用于医疗、运动、航空航天等领域。医疗领域，在动物实验中高、中、低剂量多肽处理的实验组，小鼠的存活时间相较于未灌胃的实验组小鼠分别延长了97.04%、83.38%、31.12%；小鼠的脑组织和肝脏组织相较于对照组的细胞形态恢复好，损伤细胞少，有效保护机体免受缺氧损伤，可用于制备治疗缺氧相关疾病（如心血管疾病、脑血管疾病等）的药物。在运动领域，缺氧小鼠分别经高、中、低剂量多肽处理后，与对照组相比不同剂量的大米多肽于缺氧环境下可降低脑组织无氧酵解水平，有效保护机体免受缺氧损伤，可见大米多肽能够帮助运动员在高海拔训练或比赛中提高抗缺氧能力，提升运动表现，在航空航天领域，可为宇航员在太空环境中的生存提供保障。
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1. 一种大米抗缺氧多肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.根据权利要求1所述的大米抗缺氧多肽，其二级结构中多肽主链骨架围绕一个轴螺旋状上升，被平行于螺旋轴的分子内氢键所稳定。
3.根据权利要求2所述的大米抗缺氧多肽，其特征在于：所述大米抗缺氧多肽的第1-10位氨基酸和第35-36位氨基酸是无规卷曲，占33.33%；第11-34位氨基酸为α-螺旋，占66.67%。
4.权利要求1-3任一项所述的大米抗缺氧多肽在制备抗缺氧药物中的应用。
5.权利要求1-3任一项所述的大米抗缺氧多肽在制备治疗缺氧相关疾病的药物中的应用。
6.包含权利要求1-3任一项所述的大米抗缺氧多肽的药物。
【技术特征摘要】
1. 一种大米抗缺氧多肽，其氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的大米抗缺氧多肽，其二级结构中多肽主链骨架围绕一个轴螺旋状上升，被平行于螺旋轴的分子内氢键所稳定。
3.根据权利要求2所述的大米抗缺氧多肽，其特征在于：所述大米抗缺氧多肽的第1-10位氨基酸和第35-36位氨基酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：周靖波，黄继红，王重荣，王娟，黄儒强，吕欣，田海龙，侯银臣，廖爱美，
申请(专利权)人：广东省农业科学院水稻研究所，
类型：发明
国别省市：
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