本发明专利技术提供了一种母羊粪便菌群标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用。所述粪便标志物为粪便微生物菌群；所述体外诊断的方法包括：提供母羊粪便测试样品；测量所述样品中微生物菌群的相对丰度；确定相对于非妊娠对照参照样本，所述样品中妊娠标志菌群Actinobacteriota的相对丰度是否显著升高（p<0.05），若是，则母羊处于早期妊娠阶段；或者：确定相对于妊娠对照参照样本，所述样品中空怀标志菌群Firmicutes、Bacteroidota、Bacteroidia和Clostridia的相对丰度是否显著升高（p<0.05），若是，则母羊处于非妊娠阶段。该菌群可用于制备母羊早期妊娠体外诊断试剂。因此，发明专利技术提供了一种新的早期妊娠诊断方法，为推进母羊妊娠早期妊娠诊断技术的发展提供了新的方向。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，尤其涉及筛选一种可用于母羊妊娠标记的粪便标志物，该标志物可制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂。
技术介绍
1、养羊业是我国西北地区传统的优势畜牧产业，也是推动该区域农业转型跨越发展的重要突破口。随着国家生态保护战略的实施，放牧养羊的空间越来越小，只有增加舍饲养羊的数量，提高舍饲养羊的生产效率，才能满足市场对羊肉的需求。因此，集约化、规模化、环境友好、可持续发展是未来畜牧业发展的方向。繁殖力是集约化、规模化养羊生产的重要经济指标之一，而饲料成本的增加和繁殖力下降造成养羊效益低下是我省养羊业面临的重大问题之一。提高羊群繁殖力有助于提高生产效益。在舍饲养羊的成本中，母羊饲养成本占饲养总成本的60%以上，提高母羊的繁殖性能显著提高生产者经济效益。因此，在规模化养羊生产管理中，早期妊娠诊断是缩短产羔间隔、提高母羊繁殖效率的重要手段之一。
2、传统母羊妊娠诊断主要依赖于：（1）外部观察法：母羊妊娠之后体况改善、膘情恢复，毛色变得光泽；阴道及外阴部的黏膜变为苍白色，阴道壁干燥，阴门紧闭等。然而，该方法主要在妊娠中后期应用，在妊娠早期诊断时准确性较差。（3）生殖激素变化，母羊妊娠后卵巢上黄体开始活动，血清激素发生变化。该方法由于许多激素释放呈现脉冲式释放，单次测定很难做出准确判定，且是一种侵入式检测。（3）超声诊断法，利用超声波在母羊体内反射原理进行成像，可观察到子宫、胎儿及卵巢等发育情况，以判断母羊是否妊娠。但该方法对技术人员技术水平要求高，且在妊娠35天后才能获得较高的准确率，否则会出现误诊或漏诊。
>3、肠道微生物在宿主代谢、免疫和内分泌等方面起着至关重要的作用，并且受到环境、饮食、激素等因素的影响而发生变化，母畜妊娠后，由于机体内的激素水平和代谢状态的变动，肠道微生物群落的组成和功能也会产生影响。因此，本专利技术旨在通过研究母羊在妊娠和空怀期粪便微生物组成变化，进一步分析肠道微生物群的多样性、丰度以及关键菌群，揭示与妊娠相关的微生物组菌群的特征，从而提供非侵入性、可行性高的早期妊娠检测方法，提高肉羊的繁殖管理和繁殖效率，以实现更高水平的经济效益。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为解决母羊现有妊娠诊断技术中存在的上述技术问题，提供一种可用于母羊早期妊娠诊断的粪便标志物，该粪便标志物为特定微生物菌群，可制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂。
2、为实现其目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种可用于母羊早期妊娠诊断的粪便微生物菌群，该微生物菌群分为妊娠标志菌群和空怀标志菌群，可用于制备母羊早期妊娠体外诊断试剂，所述体外诊断的方法包括：
4、提供母羊粪便测试样品；
5、测量所述样品中微生物菌群的相对丰度；
6、确定相对于非妊娠对照参照样本，所述样品中妊娠标志菌群的相对丰度是否显著升高（p<0.05），若是，则母羊处于早期妊娠阶段；所述妊娠标志菌群为
actinobacteriota；
7、或者：确定相对于妊娠对照参照样本，所述样品中空怀标志菌群的相对丰度是否显著升高（p<0.05），若是，则母羊处于非妊娠阶段；所述空怀标志菌群包括
firmicutes、
bacteroidota、bacteroidia和
clostridia。
8、作为本专利技术技术方案的进一步优选，所述母羊粪便测试样品来源于妊娠早期母羊。
9、优选地，所述妊娠早期指母羊配种后21天。
10、优选地，所述母羊粪便测试样品为母羊直肠粪便。
11、优选地，所述母羊为绵羊。
12、优选地，所述粪便标志物检测方法为pcr提取及16s rdna测序方法。
13、本专利技术的有益效果在于：
14、本专利技术利用妊娠早期母羊相对于非妊娠母羊粪便中微生物菌群显著变化作为判断母羊早期妊娠的依据。其中，妊娠母羊的标志菌群是
actinobacteriota，空怀母羊的标志菌群包括
firmicutes、bacteroidota、bacteroidia和
clostridia。该菌群可用于制备母羊早期妊娠体外诊断试剂。因此，专利技术提供了一种新的早期妊娠诊断方法，为推进母羊妊娠早期妊娠诊断技术的发展提供了新的方向。
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【技术保护点】
1.母羊粪便菌群标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述粪便标志物为粪便微生物菌群，粪便微生物菌群分为妊娠标志菌群和空怀标志菌群；所述体外诊断的方法包括：
2.如权利要求1所述的母羊粪便菌群标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述母羊粪便测试样品来源于妊娠早期母羊。
3.如权利要求2所述的母羊粪便菌群标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述妊娠早期指母羊配种后21天。
4.如权利要求1所述的母羊粪便标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述母羊粪便测试样品为母羊直肠粪便。
5.如权利要求1-4任一项所述的母羊粪便标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述母羊为绵羊。
6.如权利要求1-4任一项所述的母羊粪便标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述粪便标志物检测方法为PCR及16S rDNA测序方法。
【技术特征摘要】
1.母羊粪便菌群标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述粪便标志物为粪便微生物菌群，粪便微生物菌群分为妊娠标志菌群和空怀标志菌群；所述体外诊断的方法包括：
2.如权利要求1所述的母羊粪便菌群标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述母羊粪便测试样品来源于妊娠早期母羊。
3.如权利要求2所述的母羊粪便菌群标志物在制备用于母羊早期妊娠体外诊断试剂中的应用，其特征在于，所述妊娠早期指母羊配...
【专利技术属性】
技术研发人员：李万宏，赵沛迪，张丽，翁秀秀，乐祥鹏，李发弟，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：
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