【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物制药，具体涉及中药源的srna及其载体在制备广谱抗病毒药物中的应用。
技术介绍
1、
2、目前，常用于抗病毒的药物作用机理包括阻止病毒吸附、进入宿主细胞、抑制病毒核酸的复制转录和翻译，干扰病毒从宿主细胞中释放等。
3、我国有很多的中药和中成药具有抗病毒的作用或者缓解病毒对人体造成的症状，主要为一些具有清热解毒作用药物，如金银花，板蓝根、莲花清瘟胶囊等。与多数传统中药相似，目前对于其药效的机制研究较为缺乏，对于其治疗靶点及作用机制有待进一步阐明。近年来在金银花中mir2911的研究表明中药中的小rna可能为抗病毒的有效活性物质。
4、2015年在金银花中首次发现了mir2911，它是天然功能性小分子，能在非植物体内调控靶基因，抑制多种病毒，是一种具有广谱抗病毒潜力的新型核酸类有效成分。
5、其抗病毒机制如下：外源mir2911是通过胃粘膜的胃顶细胞的sidt1蛋白转运到细胞，进而进入循环系统发挥作用；它的序列为ggccgggggacgggcuggga，在碱基组成上是高gc序列，几乎所有病毒基因组含有60％的高gc序列，mir2911是通过碱基配对的方式结合病毒靶mrna，抑制病毒基因表达。目前研究发现mir2911能够靶向94％的已知病毒。而在人的基因组中仅有10％的高gc序列，因此安全性有保证。
6、牛黄，蛇胆，三七，麝香是常见的中药材。牛黄是牛科动物黄牛或水牛的胆囊、胆管或肝管中的结石，可用于解热、解毒、定惊；蛇胆是游蛇科动物乌风蛇或其他种蛇的胆囊，性凉
7、与多数传统中药相似，牛黄、蛇胆、三七、麝香同样存在缺乏充分的现代化药物研究的缺陷，也即是对于其药效的机制研究较为缺乏，对于其治疗靶点及作用机制也有待进一步阐明。
技术实现思路
1、针对上述存在的技术局限性，本专利技术选择牛黄、蛇胆、三七、麝香四种中药进行高通量测序，通过生物信息技术筛选出潜在广谱抗病毒小rna，并构建具有广谱抗病毒过表达质粒，对其抗病毒的机制及效果进行进一步的研究，进而提出了中药源的srna及其载体在制备广谱抗病毒药物中的应用；其克服了
技术介绍
中提到的不足和缺陷。
2、为实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：
3、本申请的专利技术点是提供了一种srna，为包含有如seq id no.1和/或seq id no.2所示核苷酸序列的srna。
4、如seq id no.1所示的srna序列来源于牛黄，如seq id no.2所示的srna序列来源于蛇胆。
5、seq id no.1：
6、gggucguuagcucaguugguagagcagu。
7、seq id no.2：
8、guuucuguaguguagugguuaucacguucg。
9、可选地，上述的srna，所述srna含有2'-氟修饰、2'-甲氧基乙基修饰、2'-脱氧-修饰、2'-氨基-修饰、2'-o-烯丙基-修饰、2'-c-烷基-修饰、2'-羟基-修饰或2'-o-烷基-修饰的核苷酸。
10、本申请的第二个专利技术点是提供了一种重组表达载体，所述重组表达载体能够转录出上述的srna。
11、可选地，上述的重组表达载体为质粒载体。
12、表达seq id no.1所示序列srna的质粒命名为nh-1。
13、表达seq id no.2所示序列srna的质粒命名为sd-1；
14、本申请的第三个专利技术点是提供了一种宿主细胞，所述宿主细胞包含有上述的重组表达载体。
15、可选地，上述宿主细胞为bhk-21细胞或neuro-2a细胞。
16、本申请的第四个专利技术点是提供了一种药物组合物，包含有上述的srna、上述的重组表达载体，还包括有药学上可接受的辅料。
17、可选地，上述的药物组合物，所述药物组合物选择为适用于口服、静脉内、皮下、经皮、肌肉内、动脉内、腹膜内、肺内、脑脊髓内、关节内、滑膜内、鞘内、心室内或吸入途径施用的药物剂型。
18、本申请的第五个专利技术点是提供了上述的srna、上述的重组表达载体以及上述的药物组合物在制备广谱抗病毒药物中的应用。
19、可选地，上述的应用，所述病毒为具有ns3基因的病毒；优选为日本脑炎病毒和/或登革病毒。
20、本申请所提供srna、质粒等的广谱抗病毒机制为通过表达srna与病毒基因互补配对，进而抑制病毒基因的表达。
21、与现有技术相对比，本申请具有以下优点：
22、本申请从牛黄、蛇胆中通过高通量测序技术检测到两个srna，并构建了两个表达srna的质粒，其能够在细胞水平上抑制多种病毒基因的表达，具有对抗多种病毒的感染的药用价值；且该技术为中药药理机制研究提供了一种新的思路。
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1.一种sRNA，其特征在于，为包含有如SEQ ID No.1和/或SEQ ID No.2所示核苷酸序列的sRNA。
2.权利要求1所述的sRNA，其特征在于，所述sRNA含有2'-氟修饰、2'-甲氧基乙基修饰、2'-脱氧-修饰、2'-氨基-修饰、2'-O-烯丙基-修饰、2'-C-烷基-修饰、2'-羟基-修饰或2'-O-烷基-修饰的核苷酸。
3.一种重组表达载体，所述重组表达载体能够转录出权利要求1或2所述的sRNA。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为质粒载体。
5.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含有权利要求3或4所述的重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为BHK-21细胞或Neuro-2a细胞。
7.一种药物组合物，包含有权利要求1或2任一所述的sRNA以及权利要求3或4任一所述的重组表达载体，还包括有药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物选择为适用于口服、静脉内、皮下、经皮、肌
9.权利要求1或2所述的sRNA、权利要求3或4所述的重组表达载体以及权利要求7或8所述的药物组合物在制备广谱抗病毒药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述病毒为具有NS3基因的病毒；优选为日本脑炎病毒和/或登革病毒。
...【技术特征摘要】
1.一种srna，其特征在于，为包含有如seq id no.1和/或seq id no.2所示核苷酸序列的srna。
2.权利要求1所述的srna，其特征在于，所述srna含有2'-氟修饰、2'-甲氧基乙基修饰、2'-脱氧-修饰、2'-氨基-修饰、2'-o-烯丙基-修饰、2'-c-烷基-修饰、2'-羟基-修饰或2'-o-烷基-修饰的核苷酸。
3.一种重组表达载体，所述重组表达载体能够转录出权利要求1或2所述的srna。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为质粒载体。
5.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含有权利要求3或4所述的重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：张辰宇，雷洁琼，夏立静，周祯，吴义婷，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：
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