【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中蒙药提取，具体涉及一种高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法。
技术介绍
1、沙葱属被子植物门，百合科，葱属植物，学名蒙古韭（allium mongolicum regel）。据《内蒙古植物志》和《本草纲目》记载，沙葱地上部分可入药。据《蒙医典》记载，沙葱还有降血脂、降血糖、降血压的作用，对预防现代人的三高问题十分有益。在中国，它广泛分布于我国西北和内蒙古荒漠地区，是一种可食用的野生蔬菜，该种植物是内蒙古草原的一种优质牧草，也是有待开发的宝贵遗传资源。研究表明，沙葱作为营养物质含量丰富的沙生植物，其所含的氨基酸与必需微量元素均高于草原上常见的蔬菜，沙葱及其提取物作为天然植物活性成分具有较强抗氧化、免疫调节、抗菌和抗炎活性。
2、目前，沙葱多酚的提取方法主要有乙醇回流提取和酶法提取。乙醇回流提取根据“相似相溶”的原理将多酚从植物中分离出来，原理简单，操作便捷，但由于多酚类物质在较高的温度下容易氧化，而在标准大气压下，乙醇沸点是78.2℃，为了达到较好的回流效果，回流温度通常设置在80℃以上，且回流时间较长，这就容易导致多酚中部分化合物的氧化，影响多酚类化合物的生物活性。且此种方法耗时耗能，不适宜在工业中大规模应用。酶法提取具有反应条件温和，选择性高，产物不易失活，但是对实验条件要求较高，为使酶发挥最大作用，需先通过实验确定酶的最适温度、ph值及最适合作用时间等，而且成本也较高，工业应用有一定的困难，存在一定的局限性。
技术实现思路
1、基于此，本专利技术的目的是
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供一种高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，包括如下步骤：
3、s1、沙葱预处理：将沙葱叶清洗干净，切成1-2 cm小段，置于冷冻干燥机中，冻干至绝干状态后放入粉碎机中粉碎，过80目数筛网，得到沙葱粉末；
4、s2、沙葱叶全粉脱脂脱色：将s1所得的沙葱粉末与石油醚混合，固定于水平摇床上脱脂脱色处理24 h，弃掉上清液，晾干石油醚，得到脱脂脱色沙葱粉末，贮存备用；
5、s3、超声辅助低温提取：在超声设备中加入去离子水，加热，将s2所得的脱脂脱色沙葱粉末与浓度为75%的乙醇按照相应的固液比在反应容器中混合均匀后，超声提取10-30min，得到沙葱多酚粗提液；
6、s4、沙葱多酚粗提物ampl制备：将s3所得的沙葱多酚粗提液进行离心，取上清液，用旋转蒸发仪除去溶剂，旋干成粉末，得到沙葱多酚粗提物ampl，并于-20℃冰箱中储存备用；
7、s5、固相萃取纯化：将s4所得的沙葱多酚粗提物与去离子水按照相应的固液比配制溶液，过0.22 um滤膜，将滤液通过固相萃取柱纯化，并采用不同的洗脱剂洗脱，得到不同的纯化产物溶液；
8、s6、沙葱多酚纯化产物制备：将s5得到的不同纯化产物溶液分别用旋转蒸发仪除去溶剂，旋干成粉末后，于-20℃冰箱中储存备用。
9、优选地，所述s2中沙葱粉末与石油醚的质量比为1:10。
10、优选地，所述s3中去离子水加热至20-60℃。
11、优选地，所述s3中脱脂脱色沙葱粉末与75%的乙醇的固液比为1:10-50。
12、优选地，所述s4中离心机转速为12000 rpm，时间为15 min。
13、优选地，所述s5中沙葱多酚粗提物和去离子水的固液比为1:10-50。
14、优选地，所述s5中固相萃取柱的填料为十八烷基键合硅胶。
15、优选地，所述s5中洗脱剂分别为0.01m hcl水溶液、乙酸乙酯、0.1% hcl的甲醇溶液。
16、优选地，所述s4和s6中旋转蒸发仪的旋蒸温度为40℃。
17、本专利技术上述一个或多个技术方案具有如下技术效果：
18、本专利技术所提供的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，以沙葱叶为主要原料，采用超声辅助低温提取法提取沙葱多酚，与乙醇回流提取和酶法提取相比，超声辅助低温提取法是利用超声波的机械破碎作用和空化效应，可加快沙葱多酚向提取溶剂中扩散的速率，有助于沙葱多酚的溶解，从而缩短沙葱多酚的提取时间，提高提取效率。并且超声提取对遇热不稳定、易水解或氧化的沙葱多酚具有保护作用。但是通过超声辅助低温提取只能得到沙葱多酚的一类混合物，不能达到理想的分离效果，而固相萃取技术通过选择不同的固定相与流动相进行多种搭配组合，可以实现对目标组分与杂质之间的高选择性分离，显著提升了沙葱多酚的提取率，且相比于传统的提取方法，提取所需要的溶剂更少，提取时间更短，提取效率更高，并且可以最大限度上减少热敏化合物的失活，降低成本的同时还能减少能耗；通过固相萃取纯化沙葱多酚粗提物，有效去除粗提物中的杂质，提高多酚活性群组分的纯度，起到分离纯化的效果，得到更高活性的多酚组分群。固相萃取可同时完成样品的富集和净化，大大提高检测的灵敏度，其具有高效、可靠、消耗试剂少等优点。
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1.一种高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S2中沙葱粉末与石油醚的质量比为1:10。
3.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S3中去离子水加热至20-60℃。
4.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S3中脱脂脱色沙葱粉末与75%的乙醇的固液比为1:10-50。
5.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S4中离心机转速为12000 rpm，时间为15 min。
6.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S5中沙葱多酚粗提物和去离子水的固液比为1:10-50。
7.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S5中固相萃取柱的填料为十八烷基键合硅胶。
8.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S5中洗脱剂分别
9.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述S4和S6中旋转蒸发仪的旋蒸温度为40℃。
...【技术特征摘要】
1.一种高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述s2中沙葱粉末与石油醚的质量比为1:10。
3.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述s3中去离子水加热至20-60℃。
4.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述s3中脱脂脱色沙葱粉末与75%的乙醇的固液比为1:10-50。
5.根据权利要求1所述的高生物活性沙葱多酚的提取纯化方法，其特征在于：所述s4中离心机转速为12000 rpm，...
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