【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物发酵，具体涉及一种高产糖肽的云芝栓孔菌及其培养方法和应用。
技术介绍
1、云芝又称云芝栓孔菌，杂色云芝、彩绒革盖菌等，在分类学上属于菌物界、真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、多孔菌科、栓菌属，也有文献将其归于革盖菌属。云芝是一种木腐性药用真菌，云芝子实体提取物中的主要活性成份之一云芝糖肽，具有增强免疫力、调节和保护人体的各器官机能以及辅助癌症治疗等药理活性，成为一种重要的原料药。但是目前国内外研究中，提取得到的糖肽中肽的含量普遍较低，大都低于20％，满足不了相关用药标准。
2、制约云芝糖肽中肽含量低的原因主要是以下两个方面，一是野生资源日益匮乏，受各种环境因素导致很多糖肽中肽含量达不到国家药典规定的要求；二是没有高产云芝糖肽的优势菌株。另外，传统的生产大多数采用固体发酵培养收集云芝菌丝体提取多肽，这种方法不仅成本高、效率低下，而且产量低、周期长。
技术实现思路
1、针对以上所述问题，本专利技术主要目的在于提供一种高产糖肽的云芝栓孔菌及其培养方法和应用。本专利技术筛选得到一株云芝栓孔菌yh-db-1，通过培养该菌株，可从其菌丝体中提取得到大量的糖肽，所述糖肽中肽含量可达45％以上，本专利技术解决了现有云芝糖肽中肽产量较低的难题。
2、为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、本专利技术提供一株高产糖肽的云芝栓孔菌，其分类命名为云芝栓孔菌(trametesversicolor)yh-db-1，已保藏于中国微生物菌种保藏
4、进一步地，所述云芝栓孔菌yh-db-1的rrna基因its区域核苷酸序列如seq idno.1所示。
5、进一步地，所述云芝栓孔菌yh-db-1菌丝提取物中肽含量≥45％。
6、本专利技术还提供以上所述云芝栓孔菌的培养方法，所述方法包括以下步骤：
7、(1)将云芝栓孔菌yh-db-1接种至斜面培养基25～30℃培养2～6天，得活化菌株；
8、(2)将活化好的菌株接种于种子培养基中，25～30℃、150～200rpm振荡培养24～120h，得种子液；
9、(3)将种子液接种至液体发酵培养基中，25～30℃培养60～120h。
10、进一步地，所述斜面培养基为固体pda培养基。
11、进一步地，所述种子培养基由以下成分组成，以质量百分比计，黄豆粉1.0％～5.0％、马铃薯淀粉0.1％～1.0％、葡萄糖1.0％～5.0％、磷酸二氢钾0.5％～1.0％、硫酸镁0.01％～0.1％、vb1 0.001％～0.005％，余量为水。
12、进一步地，所述液体发酵培养基由以下成分组成，以质量百分比计，葡萄糖1.0％～5.0％、黄豆粉1.0％～5.0％、酵母粉0.1％～0.5％，玉米浆0.1％～0.5％、玉米淀粉1.0％～5.0％，蛋白胨0.5％～1.0％，磷酸二氢钾0.1％～1.0％、硫酸镁0.01％～0.1％、高温淀粉酶0.04ml/l、硫酸铵0.1％～0.5％、vb1 5～10mg/l，余量为水。
13、本专利技术还提供以上所述云芝栓孔菌在制备云芝糖肽中的应用。
14、本专利技术提供一种生产云芝糖肽的方法，所述方法包括以下步骤：
15、(1)将云芝栓孔菌yh-db-1接种至固体pda斜面培养基25～30℃培养2～6天，得活化菌株；
16、(2)将活化好的菌株接种于种子培养基中，25～30℃、150～200rpm振荡培养24～120h，得种子液；所述种子培养基由以下成分组成，以质量百分比计，黄豆粉1.0％～5.0％、马铃薯淀粉0.1％～1.0％、葡萄糖1.0％～5.0％、磷酸二氢钾0.5％～1.0％、硫酸镁0.01％～0.1％、vb1 0.001％～0.005％，余量为水；
17、(3)将种子液接种至液体发酵培养基中，25～30℃培养60～120h；所述液体发酵培养基由以下成分组成，以质量百分比计，葡萄糖1.0％～5.0％、黄豆粉1.0％～5.0％、酵母粉0.1％～0.5％，玉米浆0.1％～0.5％、玉米淀粉1.0％～5.0％，蛋白胨0.5％～1.0％，磷酸二氢钾0.1％～1.0％、硫酸镁0.01％～0.1％、高温淀粉酶0.04ml/l、硫酸铵0.1％～0.5％、vb1 5～10mg/l，余量为水。
18、与现有技术相比，本专利技术具有以下技术优势：
19、(1)本专利技术筛选得到一株高产糖肽的云芝栓孔菌yh-db-1，该菌株菌丝提取物中肽含量可达45％以上，同时其总糖含量大于35％，所得提取物符合国家药品标准ws-xg-021-2002。
20、(2)本专利技术所述云芝栓孔菌yh-db-1可通过液体发酵培养产生大量菌丝体，并能够提取得到大量糖肽，相比传统固态发酵方法相比，本专利技术所述培养方法效率更高。
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1.一株高产糖肽的云芝栓孔菌，其分类命名为云芝栓孔菌(Trametes versicolor)YH-DB-1，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.41418。
2.根据权利要求1所述高产糖肽的云芝栓孔菌，其特征在于，所述云芝栓孔菌YH-DB-1的rRNA基因ITS区域核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述高产糖肽的云芝栓孔菌，其特征在于，所述云芝栓孔菌YH-DB-1菌丝提取物中肽含量≥45％。
4.权利要求1所述云芝栓孔菌的培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述斜面培养基为固体PDA培养基。
6.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述种子培养基由以下成分组成，以质量百分比计，黄豆粉1.0％～5.0％、马铃薯淀粉0.1％～1.0％、葡萄糖1.0％～5.0％、磷酸二氢钾0.5％～1.0％、硫酸镁0.01％～0.1％、VB1 0.001％～0.005％，余量为水。
7.根据权利要求4
8.权利要求1所述云芝栓孔菌在制备云芝糖肽中的应用。
9.一种生产云芝糖肽的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一株高产糖肽的云芝栓孔菌，其分类命名为云芝栓孔菌(trametes versicolor)yh-db-1，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.41418。
2.根据权利要求1所述高产糖肽的云芝栓孔菌，其特征在于，所述云芝栓孔菌yh-db-1的rrna基因its区域核苷酸序列如seq id no.1所示。
3.根据权利要求1所述高产糖肽的云芝栓孔菌，其特征在于，所述云芝栓孔菌yh-db-1菌丝提取物中肽含量≥45％。
4.权利要求1所述云芝栓孔菌的培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述斜面培养基为固体pda培养基。
6.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述种子培养基由以下成分组成，...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁建国，王丹华，田特，
申请(专利权)人：山东元核生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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