【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学，具体涉及eif4e-1因子氨基酸突变在缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感方面的用途。
技术介绍
1、烟草是云南省最为重要的经济作物，但烟草在生产过程中饱受病虫害的危害，这极大的影响烟叶的品质及经济价值。具有代表性的是马铃薯y病毒属，该病毒属病毒通常能够给烟草生产造成巨大损失。其中马铃薯y病毒(potato virus y，pvy)属于马铃薯y病毒科(potyviridae)及马铃薯y病毒属(potyvirus)，pvy病毒因严重影响马铃薯生产在1931年被发现，该病毒主要侵染茄科植物，如马铃薯、烟草、番茄和辣椒等。pvy是一种正义单链rna病毒，病毒粒子呈弯曲线状，直径约为11-12纳米，长度约为730-740纳米。烟草叶片被pvy病毒感染后，烟草生长速度明显减缓，植株矮化，叶片数量减少，叶面积缩小，导致整株植物的生长受到严重影响。当感染严重时,烤后烟的色泽及风味会变差,质量降低明显,同时烟碱含量降低、总氮含量升高,导致烟叶失去其经济价值,给烟农及烟草公司带来极大的损失。对于pvy的防治，化学农药的效果有限，且可能对植株造成二次伤害，因此培育抗pvy的品种是解决烟草感染pvy病毒的关键。目前在烟草上应用较广的抗原是g.koellent在1961-1964年期间发现的pvy抗原，该抗原为栽培品种virgina的变种virginamutant(ti1406)。后续研究表明该突变体品种缺少eif4e-1基因，该基因编码真核生物翻译起始因子(eucaryoticinitiationfactor,简写为ei
技术实现思路
1、为了解决本领域现有技术存在的上述现有eif4e-1烟草突变体对冷害胁迫敏感缺陷的问题并满足开发新的对冷害胁迫不敏感的eif4e-1烟草突变体的需要，本专利技术提供一种烟草曲茎病毒rt-lamp检测引物、试剂盒及其应用和方法
2、本专利技术的
技术实现思路
如下：
3、eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变在缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感方面的用途。
4、所述eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变选自：eif4e-1因子第97-100位氨基酸删除、和/或，eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换；
5、优选地，所述第97和99位氨基酸替换指：第97位氨基酸val替换成gln，第99位氨基酸ala替换成glu；
6、优选地，所述抗pvy病毒烟草突变体指eif4e-1基因突变的烟草材料；
7、优选地，eif4e-1基因突变包括：eif4e-1基因第289位g突变为c，eif4e-1基因第290位t突变为a，eif4e-1基因第297位c突变为a；
8、优选地，所述冷害胁迫指8℃以下的冷害胁迫。
9、一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的蛋白，其特征在于，为eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变获得的蛋白。
10、所述eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变的蛋白选自：eif4e-1因子第97-100位氨基酸删除的蛋白、和/或，eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换的蛋白；
11、优选地，eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换的蛋白指：第97位氨基酸val替换成gln，第99位氨基酸ala替换成glu的蛋白；
12、优选地，eif4e-1因子第97-100位氨基酸删除的蛋白具有如seq id no.1所示的氨基酸序列；
13、优选地，eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换的蛋白具有如seq id no.2所示的氨基酸序列。
14、一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的基因，其特征在于，为eif4e-1基因第289-300位碱基突变获得的基因。
15、eif4e-1基因第289-300位碱基突变获得的基因选自：eif4e-1基因第289-300位碱基删除获得的基因、和/或，eif4e-1基因第289-291位和第295-297位碱基替换突变获得的基因；
16、优选地，eif4e-1基因第289-291位和第295-297位碱基替换突变获得的基因指：289位g突变为c，eif4e-1基因第290位t突变为a，eif4e-1基因第297位c突变为a获得的基因；
17、优选地，eif4e-1基因第289-300位碱基突变获得的基因具有如seq id no.3所示的核苷酸序列；
18、优选地，eif4e-1基因第289-291位和第295-297位碱基替换突变获得的基因具有如seq id no.4所示的核苷酸序列。
19、一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的方法，其特征在于，对野生型烟草材料的eif4e-1因子第97-100位氨基酸进行突变或对野生型烟草材料的eif4e-1基因第289-300位碱基进行突变。
20、对野生型烟草材料的eif4e-1因子第97-100位氨基酸进行突变选自：将野生型烟草材料的eif4e-1因子第97-100位氨基酸删除、和/或，将野生型烟草材料的eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换；
21、对野生型烟草材料的eif4e-1基因第289-300位碱基进行突变选自：将野生型烟草材料的eif4e-1基因第289-300位碱基删除、和/或，将野生型烟草材料的eif4e-1基因第289-291位和第295-297位碱基替换；
22、优选地，将野生型烟草材料的eif4e-1因子第97-100位氨基酸删除或将野生型烟草材料的eif4e-1基因第289-300位碱基删除的epegrna序列如seq id no.5所示；
23、优选地，将野生型烟草材料的eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换或将野生型烟草材料的eif4e-1基因第289-291位和第295-297位碱基替换的epegrna序列如seq id no.6所示。
24、一种获得、筛选抗pvy且对冷害胁迫不敏感的烟草突变体的方法，其特征在于，采用所述的一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的方法获得抗pvy且对冷害胁迫不敏感的烟草突变体。
25、所述筛选指：采用vgad-f3、vgad-r3引物对候选烟草材料进行dna扩增、测序。
26、本专利技术获得了在不导致eif4e-1基因移码本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.eIF4E-1因子第97-100位氨基酸突变在缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感方面的用途。
2.根据权利要求1所述的eIF4E-1因子第97-100位氨基酸突变在缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感方面的用途，其特征在于，所述eIF4E-1因子第97-100位氨基酸突变选自：eIF4E-1因子第97-100位氨基酸删除、和/或，eIF4E-1因子第97和99位氨基酸替换；
3.一种缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的蛋白，其特征在于，为eIF4E-1因子第97-100位氨基酸突变获得的蛋白。
4.根据权利要求3所述的一种缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的蛋白，其特征在于，所述eIF4E-1因子第97-100位氨基酸突变的蛋白选自：eIF4E-1因子第97-100位氨基酸删除的蛋白、和/或，eIF4E-1因子第97和99位氨基酸替换的蛋白；
5.一种缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的基因，其特征在于，为eIF4E-1基因第289-300位碱基突变获得的基因。
6.根据权利要求5所述的一
7.一种缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的方法，其特征在于，对野生型烟草材料的eIF4E-1因子第97-100位氨基酸进行突变或对野生型烟草材料的eIF4E-1基因第289-300位碱基进行突变。
8.根据权利要求7所述的一种缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的方法，其特征在于，对野生型烟草材料的eIF4E-1因子第97-100位氨基酸进行突变选自：将野生型烟草材料的eIF4E-1因子第97-100位氨基酸删除、和/或，将野生型烟草材料的eIF4E-1因子第97和99位氨基酸替换；
9.一种获得、筛选抗PVY且对冷害胁迫不敏感的烟草突变体的方法，其特征在于，采用权利要求7或8所述的一种缓解抗PVY病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的方法获得抗PVY且对冷害胁迫不敏感的烟草突变体。
10.根据权利要求9所述的一种获得、筛选抗PVY且对冷害胁迫不敏感的烟草突变体的方法，其特征在于，所述筛选指：采用VGAD-F3、VGAD-R3引物对候选烟草材料进行DNA扩增、测序。
...【技术特征摘要】
1.eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变在缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感方面的用途。
2.根据权利要求1所述的eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变在缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感方面的用途，其特征在于，所述eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变选自：eif4e-1因子第97-100位氨基酸删除、和/或，eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换；
3.一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的蛋白，其特征在于，为eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变获得的蛋白。
4.根据权利要求3所述的一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的蛋白，其特征在于，所述eif4e-1因子第97-100位氨基酸突变的蛋白选自：eif4e-1因子第97-100位氨基酸删除的蛋白、和/或，eif4e-1因子第97和99位氨基酸替换的蛋白；
5.一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的基因，其特征在于，为eif4e-1基因第289-300位碱基突变获得的基因。
6.根据权利要求5所述的一种缓解抗pvy病毒烟草突变体对冷害胁迫敏感的基因，其特征在于，eif4e-1基因第289-300位碱基...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢贺，白戈，姜宁，杨大海，肖炳光，费明亮，陈学军，童治军，单璟，梅坚，张敏，
申请(专利权)人：云南省烟草农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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