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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于害虫防治,具体涉及神经酰胺合酶6基因作为靶点在防治害虫中的应用。
技术介绍
1、神经酰胺是生物体中一种重要的脂质,与肥胖、炎症以及神经退化等生理过程密切相关。神经酰胺合成酶(ceramide synthase,cers)在神经酰胺生成过程中扮演关键角色。在哺乳动物中,有6个同源基因编码神经酰胺合成酶,而果蝇中仅有一个。尽管果蝇中敲除神经酰胺合成酶可导致体型减小,但鳞翅目昆虫中该酶对生长发育的功能尚不明确。因此,深入研究cers的生物学功能具有重要意义。
2、斜纹夜蛾,夜蛾科,夜蛾属,学名为spodoptera litura。斜纹夜蛾是一类杂食性农业害虫,幼虫取食甘薯、大豆、甜菜和十字花科和茄科蔬菜等近300种植物的叶片,是研究鳞翅目害虫功能极佳的实验材料。
技术实现思路
1、本专利技术第一方面的目的,在于提供cers6基因作为靶点在防治鳞翅目昆虫中的应用。
2、本专利技术第二方面的目的,在于提供一种sgrna。
3、本专利技术第三方面的目的,在于提供本专利技术第二方面的sgrna相关的生物材料。
4、本专利技术第四方面的目的,在于提供本专利技术第二方面的sgrna或本专利技术第三方面生物材料在防治鳞翅目昆虫中的应用。
5、本专利技术第五方面的目的,在于提供一种产品。
6、本专利技术第六方面的目的,在于提供一种防治害虫的方法。
7、本专利技术第七方面的目的,在于提供一种crispr/ca
8、为了实现上述目的,本专利技术所采取的技术方案是:
9、本专利技术的第一个方面,提供cers6基因作为靶点在a1)和/或a2)中的应用;
10、a1)防治鳞翅目昆虫;
11、a2)筛选和/或制备防治鳞翅目昆虫的产品。
12、在本专利技术一些实施方式中,所述cers6基因的核苷酸序列如seq id no:1所示。
13、在本专利技术一些实施方式中,通过靶向敲除/敲低cers6基因,达到防治鳞翅目昆虫的目的。
14、在本专利技术一些实施方式中,使用crispr/cas技术靶向敲除/敲低cers6基因。所涉及的sgrna的核苷酸序列为gaacgctggtggcttcctaacgg,其中,a、c、g和t是包括经修饰的核苷酸构件在内的核苷酸构件。
15、在本专利技术一些实施方式中,所述鳞翅目昆虫包括斜纹夜蛾、灰翅夜蛾、烟草天蛾、黑脉金斑蝶、棉铃虫、家蚕、小菜蛾、甜菜夜蛾和草地贪夜蛾中的一种或多种。
16、本专利技术的第二个方面,提供一种sgrna,所述sgrna靶向cers6基因,并能够与cas蛋白共同敲除/敲低cers6基因。
17、在本专利技术一些实施方式中,所述sgrna的核苷酸序列为gaacgctggtggcttcctaacgg,其中,a、c、g和t是包括经修饰的核苷酸构件在内的核苷酸构件。
18、在本专利技术一些实施方式中,所述修饰如糖被修饰、甲基化修饰等。
19、本专利技术的第三个方面,提供与本专利技术第二方面的sgrna相关的生物材料,所述生物材料包含b1)~b12)中的至少一种:
20、b1)编码本专利技术第二方面的sgrna的核酸分子;
21、b2)含有b1)所述核酸分子的表达盒;
22、b3)含有b1)所述核酸分子的重组载体;
23、b4)含有b2)所述表达盒的重组载体;
24、b5)含有b1)所述核酸分子的重组细胞;
25、b6)含有b2)所述表达盒的重组细胞;
26、b7)含有b3)所述重组载体的重组细胞;
27、b8)含有b4)所述重组载体的重组细胞;
28、b9)含有b1)所述核酸分子的重组微生物;
29、b10)含有b2)所述表达盒的重组微生物;
30、b11)含有b3)所述重组载体的重组微生物;
31、b12)含有b4)所述重组载体的重组微生物。
32、在本专利技术一些实施方式中,所述重组载体为质粒载体、噬菌粒、病毒载体、细胞载体、噬菌体、黏粒、f黏粒、人工染色体。
33、在本专利技术一些实施方式中,所述质粒载体可以是任选的质粒,所述病毒载体可以任选的病毒,所述细胞载体不包括繁殖材料。
34、本专利技术的第四个方面,提供本专利技术第二方面的sgrna或本专利技术第三方面的生物材料在c1)~c8)中任一项中的应用:
35、c1)防治鳞翅目昆虫;
36、c2)制备防治鳞翅目昆虫的产品;
37、c3)遏制鳞翅目昆虫的虫卵孵化;
38、c4)制备遏制鳞翅目昆虫的虫卵孵化的产品;
39、c5)诱发鳞翅目昆虫胚胎致死;
40、c6)制备诱发鳞翅目昆虫胚胎致死的产品;
41、c7)降低鳞翅目昆虫体重;
42、c8)制备降低鳞翅目昆虫体重的产品。
43、在本专利技术一些实施方式中,所述鳞翅目昆虫包括斜纹夜蛾、灰翅夜蛾、烟草天蛾、黑脉金斑蝶、棉铃虫、家蚕、小菜蛾、甜菜夜蛾和草地贪夜蛾中的一种或多种。
44、在本专利技术一些实施方式中,所述产品包括但不限于试剂、试剂盒和药物。
45、本专利技术的第五个方面,提供一种产品,包括本专利技术第二方面的sgrna或本专利技术第三方面的生物材料。
46、在本专利技术一些实施方式中,所述产品还包括cas蛋白和/或与cas蛋白相关的生物材料。
47、在本专利技术一些实施方式中,所述cas蛋白选自cas9、cas12a、cas12e、cas12b、cas12i、cas12h、cas12c、cas12d、cas12f、cas12g、cas12k、cas12j、cas13a、cas13b、cas13c、cas13d和cas14,包括其任何重组变体,特别地选自cas9,包括其任何重组变体。
48、在本专利技术一些实施方式中,所述产品包括但不限于试剂、试剂盒、药物和杀虫剂。
49、在本专利技术一些实施方式中,所述产品具有以下至少一种功能:
50、(1)防治鳞翅目昆虫;
51、(2)遏制鳞翅目昆虫的虫卵孵化;
52、(3)诱发鳞翅目昆虫胚胎致死;
53、(4)降低鳞翅目昆虫体重;
54、(5)改变鳞翅目昆虫的体型。
55、在本专利技术一些实施方式中,所述产品还包括药物学上可以接受的载体,所述载体包括但不限于:稀释剂、缓冲剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、包囊剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、喷雾剂、透皮吸收剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、着色剂、矫味剂或吸附载体。
56、本专利技术的第六个方面,提供一种防治害虫的方法,包括将本专利技术第五方面的产品施用于害虫或害虫栖息地。
57、在本专利技术一些实施方式中,所述方法包括将害虫、害虫的食物、害虫的生境(害虫正在生长或可以生本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.CerS6基因作为靶点在a1)和/或a2)中的应用;
2.一种sgRNA,所述sgRNA靶向CerS6基因,并能够与Cas蛋白共同敲除/敲低CerS6基因。
3.根据权利要求2所述的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA的核苷酸序列为GAACGCTGGTGGCTTCCTAACGG,其中,A、C、G和T是包括经修饰的核苷酸构件在内的核苷酸构件。
4.与权利要求2或3所述sgRNA相关的生物材料,其特征在于,所述生物材料包含b1)~b12)中的至少一种:
5.权利要求2或3所述的sgRNA或权利要求4所述的生物材料在c1)~c8)中任一项中的应用:
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述鳞翅目昆虫包括斜纹夜蛾、灰翅夜蛾、烟草天蛾、黑脉金斑蝶、棉铃虫、家蚕、小菜蛾、甜菜夜蛾和草地贪夜蛾中的一种或多种。
7.一种产品,包括权利要求2或3所述的sgRNA或权利要求4所述的生物材料;
8.一种防治害虫的方法,包括将权利要求7所述的产品施用于害虫或害虫栖息地。
9.根据权利要求8所述的方
10.一种CRISPR/Cas系统,包括权利要求2或3所述的sgRNA或权利要求4所述的生物材料和Cas蛋白。
...【技术特征摘要】
1.cers6基因作为靶点在a1)和/或a2)中的应用;
2.一种sgrna,所述sgrna靶向cers6基因,并能够与cas蛋白共同敲除/敲低cers6基因。
3.根据权利要求2所述的sgrna,其特征在于,所述sgrna的核苷酸序列为gaacgctggtggcttcctaacgg,其中,a、c、g和t是包括经修饰的核苷酸构件在内的核苷酸构件。
4.与权利要求2或3所述sgrna相关的生物材料,其特征在于,所述生物材料包含b1)~b12)中的至少一种:
5.权利要求2或3所述的sgrna或权利要求4所述的生物材料在c1)~c...
【专利技术属性】
技术研发人员:王漫,翁玉珊,陈杰辉,高宇霖,管作坡,庞静希,相辉,
申请(专利权)人:华南师范大学,
类型:发明
国别省市:
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