【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物医学体外检测，尤其是涉及一种电发光胶体金检测试纸条、制备方法及检测方法。
技术介绍
1、体外医学诊断（ivd）是通过对人体样本比如血液、体液、组织等进行检测而获取临床诊断信息，进而筛查疾病或机体功能风险评估的产品和服务技术。当前，临床诊断信息中，80%左右来自体外诊断技术，而其费用占医疗费用不到20%，已成为人类疾病预防、诊断、治疗的重要组成部分。其中，免疫胶体金层析法是一种常用的免疫分析方法，主要以胶体金作为示踪标志物。该技术操作简单、可家庭自检且检测速度快等优势，现已成广泛应用的ivd检测手段。然而，随着生物医学的进步和人们对健康生活的更高要求，传统胶体金检测技术难以满足人体样本中痕量标志物的精准检测，比如因“血脑屏障”所致的帕金森标志物-突触蛋白、半胱氨酸和刺突蛋白等，而且一些针对灵敏度提升的设计存在生产/使用成本高、操作复杂等问题。
2、为此，提出本专利技术。
技术实现思路
1、鉴于
技术介绍
中存在的问题，本申请提供一种电发光胶体金检测试纸条、制备方法及检测方法，该电发光胶体金检测试纸条能够高效、快速、超灵敏的对样本中痕量标志物进行检测。
2、根据本专利技术的一个方面，提供一种电发光胶体金检测试纸条，包括基板、样品垫、纳米金胶条带、亲水性虹吸膜、吸水垫和导电板；所述样品垫、纳米金胶条带、亲水性虹吸膜和吸水垫按样品层析方向依次连接的设置于所述基板上，所述导电板设于所述亲水性虹吸膜与所述基板之间；所述纳米金胶条带中含有多抗与联吡啶钌修饰胶体金
3、通过使用本技术方案中的电发光胶体金检测试纸条，基于电化学发光（ecl）技术，在纳米金胶条带中设置多抗与联吡啶钌修饰胶体金，这些金颗粒因表面等离子体共振（spr）效应而具有优异的光/电活性，从而在样品垫上滴加样本稀释液后，基于虹吸作用发生层析，带动胶体金区域迁移，再配合将导电板外接电化学设备，通过电化学设备施加电压，利用发光物质在电极上通过电化学反应形成激发状态，然后返回基态时形成光辐射，即可根据检测带和质控带的显色结果实现对样本中痕量标志物进行检测，不仅高效、快速，而且灵敏度超高，兼具ecl和胶体金两种技术的优势。
4、在本专利技术的一些实施方式中，所述导电板远离所述样品垫的一端从所述亲水性虹吸膜与所述基板之间延伸出设定长度。
5、在本专利技术的一些实施方式中，所述含有多抗与联吡啶钌修饰胶体金的纳米金胶条带的制备包括以下步骤：
6、取氯金酸溶液，加热煮沸，然后快速加入柠檬酸钠溶液，继续加热，之后自然冷却，获得纳米胶体金；
7、将制得的胶体金离心分离，然后用甲醇洗涤，再用巯基丙酸或巯基丙胺溶液分散，混合搅拌，再离心洗涤，之后与羧基化ru(bpy)32+和多克隆抗体混合反应，低温存放，真空干燥后，获得多抗与联吡啶钌标记的胶体金；
8、将制得的多抗与联吡啶钌修饰胶体金再分散至去离子水中，浓缩富集在亲水性纤维膜表面，获得所述纳米金胶条带。
9、在本专利技术的一些实施方式中，所述导电板的制备包括以下步骤：
10、以醋酸纤维板为基底材料，将导电小分子于醋酸纤维板上进行电沉积反应，然后进行活化，再经超声洗涤后，获得活化导电聚合底板；
11、在靠近所述导电聚合底板的一端处，以不导电塑料模具粘合在导电聚合底板表面，插入石墨烯溶液中，以循环伏安法沉积；然后再进行活化、超声洗涤后，真空干燥处理，获得所述导电板。
12、在本专利技术的一些实施方式中，所述电沉积反应采用计时电流法或循环伏安法；
13、优选地，所述循环伏安法电压范围为0~1.0 v，扫速为10~50 mv˙s-1，所述计时电流法电压为0.5~1.0 v。
14、在本专利技术的一些实施方式中，所述电沉积反应的电沉积溶液为磷酸缓冲液。
15、在本专利技术的一些实施方式中，所述塑料模具为三孔结构，所述三孔结构的中间孔洞为工作电极位置，所述三孔结构的左右两侧孔洞分别为对电极和参比电极位置。
16、在本专利技术的一些实施方式中，所述检测带为单克隆抗体或适配体修饰带；所述质控带为兔抗人多克隆抗体修饰质控带；
17、优选地，所述单克隆抗体或适配体修饰带和兔抗人多克隆抗体修饰质控带均为亲水性虹吸膜，并用包埋或共价键交联法固定抗体或适配体。
18、根据本专利技术的另一方面，提供一种使用上述电发光胶体金检测试纸条进行检测的方法，包括以下步骤：取待测样本在缓冲液中稀释，充分混合后，滴加在样品垫上，基于虹吸作用发生层析，带动胶体金区域迁移，然后将导电板连接至电化学设备，施加电压后进行检测。
19、在本专利技术的一些实施方式中，所述电化学设备施加的电压为0~1.0 v。
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1.一种电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，
2.根据权利要求1所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述导电板远离所述样品垫的一端从所述亲水性虹吸膜与所述基板之间延伸出设定长度。
3.根据权利要求1所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述含有多抗与联吡啶钌修饰胶体金的纳米金胶条带的制备包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述导电板的制备包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述电沉积反应采用计时电流法或循环伏安法；
6.根据权利要求4所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述电沉积反应的电沉积溶液为磷酸缓冲液。
7.根据权利要求4所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述塑料模具为三孔结构，所述三孔结构的中间孔洞为工作电极位置，所述三孔结构的左右两侧孔洞分别为对电极和参比电极位置。
8.根据权利要求1所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述检测带为单克隆抗体或适配体修饰带；所述质控带为兔抗人多克
9.一种使用如权利要求1-8任一项所述电发光胶体金检测试纸条进行检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：
10. 根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述电化学设备施加的电压为0~1.0 V。
...【技术特征摘要】
1.一种电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，
2.根据权利要求1所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述导电板远离所述样品垫的一端从所述亲水性虹吸膜与所述基板之间延伸出设定长度。
3.根据权利要求1所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述含有多抗与联吡啶钌修饰胶体金的纳米金胶条带的制备包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述导电板的制备包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的电发光胶体金检测试纸条，其特征在于，所述电沉积反应采用计时电流法或循环伏安法；
6.根据权利要求4所述的电发光胶体金检测试纸条...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁培新，冯九菊，宋沛，何一平，张国旗，王爱军，
申请(专利权)人：浙江师范大学，
类型：发明
国别省市：
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