【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体涉及一种富硒鼠李糖乳杆菌菌剂及其制备方法。
技术介绍
1、在现代生物
，益生菌和微量元素的研究日益受到重视。益生菌是指那些能够为宿主提供健康益处的活菌，而微量元素如硒(se)是人体必需的营养素，对维持正常生理功能至关重要。随着科学研究的深入，人们发现将益生菌与微量元素结合，可以开发出具有特定健康益处的新型生物制品。
2、益生菌通过改善肠道微生物平衡，增强机体免疫力，促进营养物质的吸收等途径，对人体健康产生积极影响。鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)作为益生菌的一种，已被广泛研究并应用于食品和药品中。
3、硒是一种具有抗氧化性质的微量元素，它在人体内扮演着多种生物学角色。硒是谷胱甘肽过氧化物酶(gpx)和碘甲状腺原氨酸脱碘酶(dio)等重要酶的辅助因子，参与调节甲状腺激素代谢和抗氧化应激反应。此外，硒还与癌症预防、心血管健康和免疫功能等多个方面有关。
4、纳米技术的应用使得硒的生物利用度得到显著提高。纳米硒具有较小的粒径，可以更容易地穿透生物膜，从而提高其在体内的吸收和分布。此外，纳米硒的溶解度和稳定性也较传统硒形式有所改善。
5、将纳米硒与益生菌结合，不仅可以提高硒的生物利用度，还可以借助益生菌的有益作用，实现对宿主健康的双重促进。这种结合方式为开发新型功能性食品和药品提供了新的思路。
6、目前，缺乏一种富硒鼠李糖乳杆菌菌剂及其制备方法。
技术实现思路
1、为了解
2、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面是提供了一种富硒鼠李糖乳杆菌菌剂。本专利技术的第二方面是提供了一种富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法。本专利技术的第三方面是提供了一种富硒鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备方法。
3、本专利技术的一种富硒鼠李糖乳杆菌菌剂，富硒鼠李糖乳杆菌菌剂通过生物发酵工艺制备，含有可被机体吸收的有机硒，其中，菌剂中纳米硒的含量为10-120微克/克，并且鼠李糖乳杆菌的活性菌落数为1×109至5×1010cfu/克。
4、进一步地，富硒鼠李糖乳杆菌菌剂通过片剂、冻干粉、胶囊、乳制品、搅拌型酸奶或凝固形酸奶的形式提供。
5、本专利技术的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，包括如下步骤：
6、a.配制鼠李糖乳杆菌培养基，用naoh调ph值至7.4；
7、b.在121℃下对培养基进行20分钟的灭菌，然后冷却至室温；
8、c.将1ml解冻后的鼠李糖乳杆菌种子液接种到200ml的培养基中，在40℃下进行24小时的活化静置培养；
9、d.将活化后的鼠李糖乳杆菌种子液按3％的接种量转移到1l培养基中，加入过0.22μm滤膜过滤后的纳米硒溶液至终浓度为10μg/ml，在40℃下进行24小时的静置培养；
10、e.通过离心8000g x 10分钟x 4℃收集发酵菌，制得富硒鼠李糖乳杆菌菌剂。
11、发酵过程是制备富硒鼠李糖乳杆菌的关键步骤。通过控制温度、时间和接种量，可以优化益生菌的生长条件，提高其生物活性。此外，纳米硒的添加也是在这一阶段完成的，其终浓度的精确控制对于保证产品质量至关重要。发酵结束后，通过离心技术收集菌体，为冻干过程做准备。冻干技术是一种去除水分而不破坏生物活性的干燥方法。通过精确控制冻干程序中的温度、时间和真空度，可以制备出高质量的冻干粉。
12、进一步地，鼠李糖乳杆菌培养基配方包含以下组分组成：
13、
14、
15、培养基是微生物生长的基础。本技术中，通过精确配制各种营养成分，创建了一个适宜鼠李糖乳杆菌生长的环境。培养基中的各种成分，如抗坏血酸钠、nacl、na2hpo4、kh2po4、葡萄糖、酵母抽提物、牛肉浸粉、大豆蛋白胨和牛肉蛋白胨等，都是精心挑选的，以支持益生菌的生长和代谢。
16、进一步地，在步骤(d)中，纳米硒溶液的制备方法，包括如下步骤：
17、(1)向烧杯中加入稳定剂；
18、(2)向烧杯中缓慢加入含有还原剂的水溶液，并在加入过程中保持磁力搅拌，直到稳定剂完全溶解；
19、(3)将亚硒酸钠水溶液缓慢加入到步骤(2)所得的溶液中，在加入过程中，步骤(2)的溶液处于磁力搅拌中；
20、(4)在亚硒酸钠水溶液加入完毕后，立即使用氢氧化钠溶液调节ph到预定范围，然后继续磁力搅拌30分钟，制得红色的纳米硒溶液。
21、进一步地，在步骤(1)中，稳定剂选自表没食子儿茶素没食子酸酯egcg、壳聚糖、阿拉伯胶、牛血清白蛋白bsa或透明质酸钠中的至少一种；表没食子儿茶素没食子酸酯egcg的浓度范围为0.1mm-40mm；壳聚糖的浓度范围为0.01％-0.7％，壳聚糖的分子量范围为100kd-1000kd；阿拉伯胶的浓度范围为0.04％-0.4％，阿拉伯胶的分子量范围为200kd-2000kd；牛血清白蛋白bsa的浓度范围为0.4mg/ml-60mg/ml；透明质酸钠的浓度范围为0.02％-0.25％，透明质酸钠的分子量范围为200kd-2000kd。
22、更进一步地，在步骤(2)中，还原剂选自还原型谷胱甘肽gsh或维生素c中的至少一种。
23、更进一步地，在步骤(2)中，还原剂在反应体系中的终浓度为5mm-50mm的谷胱甘肽gsh和5mm-100mm的维生素c vc。
24、更进一步地，在步骤(3)中，亚硒酸钠在反应体系中的终浓度为5mm.
25、更进一步地，在步骤(4)中，调节ph的步骤中，ph值的范围为5.0-9.0。
26、本专利技术的富硒鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备方法，包括如下步骤：
27、a.按照方法制备富硒鼠李糖乳杆菌；使用20mm pb、0.9％ nacl、5％脱脂奶粉、ph7.0的除菌溶液重悬菌泥，比例为50ml溶液重悬1克菌泥；
28、b.将重悬后的菌泥进行冻干处理：设置冻干程序，包括预冻至-45℃持续1.5小时，主干燥至-45℃持续4小时，然后进行温度和时间的逐步调整，直至终末干燥至20℃持续4小时，真空度维持在0.2mba；
29、c.冻干结束后，收集冻干粉；
30、d.对冻干粉进行活菌计数和icp-ms法分析，确保活菌计数达到≧5.0x 1010cfu/g，硒含量达到≧50μg/1x1010 cfu；
31、e.用麦芽糊精或脱脂奶粉或其他填充剂对上述冻干粉进行稀释，使得纳米硒的含量为10-120微克/克，并且鼠李糖乳杆菌的活性菌落数为1×109至5×1010cfu/克，制得富硒鼠李糖乳杆菌冻干粉。
32、进一步地，在步骤(d)中，以10克的5.0x1010cfu/g的富硒鼠李糖乳杆菌母粉稀释成50克的浓度为1.0x1010cfu/g的菌粉为例，采用梯度稀释法，首本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种富硒鼠李糖乳杆菌菌剂，其特征在于：所述富硒鼠李糖乳杆菌菌剂通过生物发酵工艺制备，含有可被机体吸收的有机硒，其中，所述菌剂中纳米硒的含量为10-120微克/克，并且鼠李糖乳杆菌的活性菌落数为1×109至5×1010CFU/克。
2.权利要求1所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂，其特征在于：所述富硒鼠李糖乳杆菌菌剂通过片剂、冻干粉、胶囊、乳制品、搅拌型酸奶或凝固形酸奶的形式提供。
3.权利要求1所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于：鼠李糖乳杆菌培养基配方包含以下组分组成：
5.根据权利要求3所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于：
6.根据权利要求5所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述稳定剂选自表没食子儿茶素没食子酸酯EGCG、壳聚糖、阿拉伯胶、牛血清白蛋白BSA或透明质酸钠中的至少一种；所述表没食子儿茶素没食子酸酯EGCG的浓度范围为0.1mM-40mM；所述壳聚糖的浓度范围为0.01％
7.根据权利要求5所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述还原剂在反应体系中的终浓度为5mM-50mM的谷胱甘肽GSH和5mM-100mM的维生素CVc；在步骤(3)中，所述亚硒酸钠在反应体系中的终浓度为5mM；在步骤(4)中，调节pH的步骤中，pH值的范围为5.0-9.0。
8.权利要求2所述的富硒鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
9.根据权利要求8所述的富硒鼠李糖乳杆菌冻干粉的制备方法，其特征在于：在步骤(d)中，以10克的5.0x1010 cfu/g的富硒鼠李糖乳杆菌母粉稀释成50克的浓度为1.0x1010cfu/g的菌粉为例，采用梯度稀释法，首先称取10.0克5.0x1010 cfu/g的母粉，加入2.5克的脱脂奶粉，混匀，得12.5克的4.0x1010 cfu/g的菌粉；接着在12.5克的4.0x1010 cfu/g的菌粉中加入12.5克的脱脂奶粉，混匀，得25.0克的2.0x10^10cfu/g的菌粉；最后将25.0克的2.0x1010 cfu/g的菌粉和25.0克的脱脂奶粉混匀，制得50.0克的浓度为1.0x1010 cfu/g富硒鼠李糖乳杆菌冻干粉。
10.一种富硒鼠李糖乳杆菌冻干粉，其特征在于，由权利要求8所述的制备方法得到。
...【技术特征摘要】
1.一种富硒鼠李糖乳杆菌菌剂，其特征在于：所述富硒鼠李糖乳杆菌菌剂通过生物发酵工艺制备，含有可被机体吸收的有机硒，其中，所述菌剂中纳米硒的含量为10-120微克/克，并且鼠李糖乳杆菌的活性菌落数为1×109至5×1010cfu/克。
2.权利要求1所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂，其特征在于：所述富硒鼠李糖乳杆菌菌剂通过片剂、冻干粉、胶囊、乳制品、搅拌型酸奶或凝固形酸奶的形式提供。
3.权利要求1所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于：鼠李糖乳杆菌培养基配方包含以下组分组成：
5.根据权利要求3所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于：
6.根据权利要求5所述的富硒鼠李糖乳杆菌菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述稳定剂选自表没食子儿茶素没食子酸酯egcg、壳聚糖、阿拉伯胶、牛血清白蛋白bsa或透明质酸钠中的至少一种；所述表没食子儿茶素没食子酸酯egcg的浓度范围为0.1mm-40mm；所述壳聚糖的浓度范围为0.01％-0.7％，壳聚糖的分子量范围为100kd-1000kd；所述阿拉伯胶的浓度范围为0.04％-0.4％，阿拉伯胶的分子量范围为200kd-2000kd；所述牛血清白蛋白bsa的浓度范围为0.4mg/ml-60mg/ml；所述透明质酸钠的浓度范围为0.02％-0.25％，透明质酸钠的...
【专利技术属性】
技术研发人员：华子春，胡敏进，王强，杨海梅，
申请(专利权)人：江苏靶标生物医药研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。