【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物领域的一株高产蛋白质和β-苯乙醇的马克斯克鲁维酵母及其应用。
技术介绍
1、全球鱼粉资源紧缺，限制了水产行业的快速发展。单细胞蛋白(single cellprotein，scp)营养丰富，不受时间和地域的限制、生产效率高、周期短，逐渐应用在饲料行业。scp不仅蛋白质、氨基酸含量高，维生素和矿物质相对丰富，还含有核苷酸和免疫多糖等。酵母蛋白质含量在30％～50％，核苷酸和b族维生素含量丰富，优于鱼粉；其中马克斯克鲁维酵母是一种安全的食品级酵母，得到欧盟食品安全监督局、美国fda的安全认证，也被中国卫生计生委批准为新食品原料，农业农村部批准马克斯克鲁维酵母(cgmcc 10621)为新饲料添加剂，并准许在中华人民共和国境内生产、经营和使用，核发饲料和饲料添加剂新产品证书。马克斯克鲁维酵母具有生长周期短、生物量大、耐高温、蛋白分泌量高、底物利用广泛等特点，可利用廉价底物进行蛋白质合成。
2、β-苯乙醇(2-pe)是一种具有玫瑰香味的重要香料化合物，广泛应用于食品、医药等行业。苯乙醇不仅是人们所需要的香料物质，还是一种重要的医药中间体，由β-苯乙醇合成其它重要的医药产品，例如苯乙醇苷、羟基苯乙醇等是许多药物的有效成分。β-苯乙醇还有因此可以有选择的作用于致病菌，例如维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌等，应用于水产行业来替代部分抗生素，解决细菌的耐药性问题。在自然界，苯乙醇存在于多种植物中，在苹果、杏仁、香蕉、玫瑰、风信子、茉莉花、百合等植物体内均有发现。在众多植物中，除玫瑰外，苯乙醇在其他植物体内含量
3、与优化培养基、优化培养条件相比，基因改组可以从本质上菌株进行改变，具有有更广泛的应用前景。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是如何提高马克斯克鲁维酵母的蛋白质含量和2-苯乙醇产量的问题。
2、为了解决上述问题，本专利技术提供了一种马克斯克鲁维酵母。
3、本专利技术提供的马克斯克鲁维酵母为马克斯克鲁维酵母(kluyveromycesmarxianus)km-gs11，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为cgmcc no.29927。
4、本专利技术提供的马克斯克鲁维酵母(kluyveromyces marxianus)km-gs11是通过如下方法获得的：将马克斯克鲁维酵母(kluyveromyces marxianus)出发菌株进行常压室温等离子体诱变，随后进行β-苯乙醇的筛选，将获得的高产蛋白质和2-苯乙醇的中间菌株制备原生质体，并通过对原生质体进行亲本灭活，以聚乙二醇(peg)为促融剂，进行细胞融合与再生，并通过定向筛选得到能够高产蛋白质和/或2-苯乙醇的所述马克斯克鲁维酵母km-gs11。
5、所述常压室温等离子体(artp)诱变筛选条件为致死率95％以上。
6、所述2-苯乙醇的筛选浓度为2.0mg/ml。
7、所述马克斯克鲁维酵母出发菌株为马克斯克鲁维酵母gdmcc no.2.119。
8、所述制备原生质体的步骤，是分别制备所述马克斯克鲁维酵母的菌悬液，在一定条件下进行酶解破壁，从而制备成原生质体。
9、所述制备原生质体的步骤还包括亲本灭活步骤。
10、所述亲本灭活可为紫外灭活及加热灭活的方式。所述亲本灭活主要是为了便于后续融合子的筛选，在无选择性培养基的条件下，排除双亲本本类型的再生产物。原生质体融合目的是将双亲的遗传物质进行转化和互补，从而获得兼具双亲优良性状的新菌株，而灭活的亲本可大大减少后续融合子筛选的干扰，同时又能定向筛选双亲互补的融合子。
11、本专利技术还提供了一种菌剂，所述菌剂含有前文所述的马克斯克鲁维酵母和/或所述马克斯克鲁维酵母的代谢物。
12、前文所述的所述的马克斯克鲁维酵母的培养物，是将前文所述的的马克斯克鲁维酵母在细菌培养基中培养得到的物质。
13、上述菌剂的活性成分可为上述马克斯克鲁维酵母和/或上述马克斯克鲁维酵母的代谢物，上述菌剂的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分。
14、上述菌剂中，除所述活性成分外，还含有载体。所述载体可为生物肥料领域常用的且在生物学上是惰性的载体。所述载体可为固体载体或液体载体；所述固体载体可为矿物材料、植物材料或高分子化合物；所述矿物材料可为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述植物材料可为玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一种；所述高分子化合物可为聚乙烯醇和/或聚二醇；所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水；所述有机溶剂可为癸烷和/或十二烷。
15、上述菌剂可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
16、根据需要，上述菌剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、ph调节剂等。
17、上文中，所述代谢物可从所述马克斯克鲁维酵母的发酵液中获得。所述代谢物可为所述马克斯克鲁维酵母的无菌代谢物或所述马克斯克鲁维酵母的含菌代谢物。所述马克斯克鲁维酵母的无菌代谢物(无菌发酵滤液)具体可按照如下方法制备，在液体培养基中培养所述马克斯克鲁维酵母，过滤除去液体培养物(发酵液)中的所述马克斯克鲁维酵母即得到所述马克斯克鲁维酵母的无菌代谢物。所述马克斯克鲁维酵母的含菌代谢物具体可按照如下方法制备，在液体发酵培养基中培养所述马克斯克鲁维酵母，收集发酵液，该发酵液即为所述马克斯克鲁维酵母的含菌代谢物。
18、本专利技术还提供了前文所述的马克斯克鲁维酵母在下述任一种中的应用：
19、1)制备β-苯乙醇；
20、2)提高菌体蛋白质含量；
21、3)制备产蛋白质和/或β-苯乙醇的产品。
22、本专利技术还提供了前文所述的菌剂在下述任一种中的应用：
23、1)制备β-苯乙醇；
24、2)提高菌体蛋白质含量；
25、3)制备产蛋白质和/或β-苯乙醇的产品。
26、本专利技术还提供了前文所述的培养物在在下述任一种中的应用：
27、1)制备β-苯乙醇；
28、2)提高菌体蛋白质含量。
29、本专利技术还提供了前文所述菌剂的制备方法，包括如下步骤：将权利要求1所述马克斯克鲁维酵母作为活性成分，得到所述菌剂。
30、本专利技术还提供了一种制备β-苯乙醇的方法，包括如下步骤：在培养基中培养权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母，从所述发酵产物中得到β-苯乙醇。
31、本专利技术还提供了一种提高蛋白质产量的方法，包括如下步本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.马克斯克鲁维酵母，其特征在于：所述马克斯克鲁维酵母为马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)KM-GS11，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.29927。
2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母和/或所述马克斯克鲁维酵母的代谢物。
3.权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母的培养物，是将权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母在细菌培养基中培养得到的物质。
4.权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母在下述任一种中的应用：
5.权利要求2所述的菌剂在下述任一种中的应用：
6.权利要求3所述的培养物在在下述任一种中的应用：
7.权利要求2所述菌剂的制备方法，包括如下步骤：将权利要求1所述马克斯克鲁维酵母作为活性成分，得到所述菌剂。
8.一种制备β-苯乙醇的方法，包括如下步骤：在培养基中培养权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母，从所述发酵产物中得到β-苯乙醇。
9.一种提高蛋白质产量的方法，包括如下步骤：在培
...【技术特征摘要】
1.马克斯克鲁维酵母，其特征在于：所述马克斯克鲁维酵母为马克斯克鲁维酵母(kluyveromyces marxianus)km-gs11，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为cgmcc no.29927。
2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母和/或所述马克斯克鲁维酵母的代谢物。
3.权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母的培养物，是将权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母在细菌培养基中培养得到的物质。
4.权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母在下述任...
【专利技术属性】
技术研发人员：周志刚，杨雅麟，王梦昕，陈星宇，赵雅洁，药园园，冉超，张震，丁倩雯，刘树彬，夏锐，金雅，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：
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