【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于有机合成，具体涉及一种新型疫苗佐剂mpla中间体对甲苯基3-o-乙酰基-4,6-o-亚苄基-2-脱氧-2-邻苯二甲酰亚氨基-1-硫代-β-d-葡萄糖苷的合成方法。
技术介绍
1、疫苗包括两种组分：抗原和佐剂。抗原通常由病原体的蛋白质或碳水化合物组成，从而产生针对该病原体的适应性免疫应答。佐剂是一种添加到疫苗中的物质，用来增强免疫应答的强度和持久性。近几年来，核酸疫苗、基因工程疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗的研究取得了快速的发展，但是与传统的灭活疫苗或活体疫苗相比，往往存在免疫原性差等问题。疫苗成分的简单化有利于控制其安全性，因此必须要添加佐剂来增强新型疫苗的免疫原性。
2、革兰氏阴性菌细胞壁中的脂多糖(lps)结构的疏水部分脂质a是一种很强的免疫刺激剂，含有数条脂肪酰基链，能被toll样受体4(tlr4)和髓样分化因子(md-2)蛋白受体识别，从而刺激相应的免疫细胞产生免疫应答，但是其较强的内毒性限制了其在疫苗佐剂方面的应用。ribi等人将脂质a的1-磷酸基团水解后得到的单磷酸脂质a(mpla)在保留其免疫活性的同时，内毒性降为脂质a的0.08％。将mpla的3位脱酰基可以产生毒性更低的临床级mpla分子，它具有6条酰基侧链和1个磷酸基团。
3、
4、
5、现有的mpla制备方法为生物发酵提取，不但成本昂贵，而且不可避免地出现其它带有不同酰基链的二糖产物，且极难分离。这引发了mpla产品的纯度问题，违背了疫苗组成成分简单化的原则，带来使用的安全隐患。通过化学合成法制备mp
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术提供了新型疫苗佐剂mpla中间体——对甲苯基3-o-乙酰基-4,6-o-亚苄基-2-脱氧-2-邻苯二甲酰亚氨基-1-硫代-β-d-葡萄糖苷的合成方法，以2-脱氧-2-氨基葡萄糖盐酸盐为起始原料，经过6步反应合成了所需的mpla糖基供体中间体。
2、为实现上述目的，本专利技术采取如下的技术方案：
3、一种新型疫苗佐剂mpla中间体的合成方法，有以下步骤：
4、步骤(1)、以水为反应溶剂，将2-脱氧-2-氨基葡萄糖盐酸盐、邻苯二甲酸酐和碱反应3～18h得到中间体2；邻苯二甲酸酐和2-脱氧-2-氨基葡萄糖盐酸盐的摩尔比为1.05～1.5:1；碱和2-脱氧-2-氨基葡萄糖盐酸盐的摩尔比为1.05～2.5:1；
5、步骤(2)、在有机溶剂中，将中间体2与乙酸酐、4-二甲氨基吡啶和碱在0～50℃下反应1.5h～4h得到中间体3；乙酸酐和中间体2的摩尔比为6～10:1；4-二甲氨基吡啶和中间体2的摩尔比为0.1～0.5:1；碱和中间体2的摩尔比为6.6～12:1；
6、步骤(3)、在氩气气氛和酸存在的条件下，在有机溶剂中，将中间体3和对甲苯硫酚在25～102℃反应0.25～48h得到中间体4；对甲苯硫酚和中间体3的摩尔比为1.1～1.5:1；酸和中间体3的摩尔比为1～1.8:1；
7、步骤(4)、在氩气气氛和碱存在的条件下，中间体4在溶剂中反应10～60min得到中间体5；碱和中间体4的摩尔比为0.1～5:1；
8、步骤(5)、在氩气气氛和酸存在的条件下，在有机溶剂中，将中间体5和苯甲醛二甲缩醛在25～102℃下反应10min～12h得到中间体6；苯甲醛二甲缩醛和中间体5的摩尔比为2～10:1；
9、步骤(6)、在有机溶剂中，将中间体6与乙酸酐、4-二甲氨基吡啶和碱在0～25℃下反应0.5～3h得到目标化合物7对甲苯基3-o-乙酰基-4,6-o-亚苄基-2-脱氧-2-邻苯二甲酰亚氨基-1-硫代-β-d-葡萄糖苷，即所述新型疫苗佐剂mpla中间体；乙酸酐与中间体6的摩尔比为1.2～1.8:1；4-二甲氨基吡啶与中间体6的摩尔比为0.1:1；碱和中间体6的摩尔比为1.5～2.5:1。
10、步骤(1)中，所述碱为氢氧化锂、碳酸锂、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸氢钾、碳酸钾、氢氧化铯、碳酸铯、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四丁基氢氧化铵中的一种。
11、步骤(2)中，所述碱为吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、n-甲基吗啉、n-甲基哌啶、n-乙基哌啶、三乙胺、二异丙基乙胺、四甲基乙二胺、三乙烯二胺中的一种；
12、所述有机溶剂为二氯甲烷、乙醚、甲基叔丁基醚、甲基环戊基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、碳酸二乙酯、吡啶、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二乙基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜中的一种；
13、反应结束后，反应液中加入碱溶液淬灭，分液，用乙酸乙酯萃取3次，有机相依次用稀盐酸和饱和氯化钠溶液洗，再经无水硫酸镁干燥，抽滤，减压除去溶剂，粗品重结晶，得到中间体3；所加入的碱为氢氧化锂、碳酸锂、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸氢钾、碳酸钾氢、氧化钙、氢氧化钡中的一种；重结晶所用的溶剂为体积比1～6:1的正己烷/乙酸乙酯、体积比1～6:1的甲基环戊烷/乙酸乙酯、体积比1～6:1的环己烷/乙酸乙酯、体积比1～6:1的正庚烷/乙酸乙酯、体积比1～6:1的正庚烷/碳酸二甲酯、体积比1～6:1的正辛烷/碳酸二乙酯、甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、2-丁醇、异丁醇、乙醚、甲基叔丁基醚、体积比1～8:1的甲基叔丁基醚/四氢呋喃、体积比1～10:1的正己烷/四氢呋喃、体积比1～10:1的环己烷/四氢呋喃、体积比1～10:1的正己烷/2-甲基四氢呋喃、体积比1～10:1的环己烷/2-甲基四氢呋喃、体积比1～10:1的正庚烷/2-甲基四氢呋喃、体积比1～10:1的正庚烷/环戊基甲醚、体积比1～10:1的正辛烷/环戊基甲醚中的一种。
14、步骤(3)中，所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯、乙醚、甲基叔丁基醚、丁醚、环戊基甲醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、乙酸甲酯、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、碳酸二乙酯和乙腈中的一种；
15、所述的酸为对甲苯磺酸、三氟乙酸、三氟甲磺酸、氯化氢乙醚、三甲基氯硅烷、三甲基溴硅烷、三乙基氯硅烷、三氟化硼乙醚、三氟化硼四氢呋喃、三氟甲磺酸三甲基硅酯、三氟甲磺酸三乙基硅酯、氯化铁、氯化铝、氯化锌、三氟甲磺酸铜、三氟甲磺酸钪、三氟甲磺酸锌、三氟甲磺酸银、三氟甲磺酸铁、全氟磺酸树脂nafion和固体酸hnd-580中的一种；
16、反应结束后，向反应液中加入碱溶液淬灭，分液，用乙酸乙酯萃取3次，有机相用饱和氯化钠溶液洗，再经无水硫酸镁干燥，抽滤，减压除去溶剂，所得粗品重结晶，得到中间体4；所加入的碱为氢氧化锂、碳酸锂、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸氢钾、碳酸钾氢、氧化钙、氢氧化钡中的一种；重结晶的所用的溶剂为体积比1本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种新型疫苗佐剂MPLA中间体的合成方法，有以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂MPLA中间体的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述碱为氢氧化锂、碳酸锂、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸氢钾、碳酸钾、氢氧化铯、碳酸铯、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四丁基氢氧化铵中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂MPLA中间体的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述碱为吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、三乙胺、二异丙基乙胺、四甲基乙二胺、三乙烯二胺中的一种；
4.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂MPLA中间体的合成方法，其特征在于，步骤(3)中，所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯、乙醚、甲基叔丁基醚、丁醚、环戊基甲醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、乙酸甲酯、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、碳酸二乙酯和乙腈中的一种；
5.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂MPLA中间体的合成方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的碱为
6.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂MPLA中间体的合成方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、乙醚、甲基叔丁基醚、丁醚、四氢呋喃、2-甲基-四氢呋喃、环戊基甲醚、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二乙基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和二甲基亚砜中的一种；所述的酸为盐酸、硫酸、对甲苯磺酸一水合物、对甲苯磺酸吡啶盐、樟脑磺酸、三氟乙酸、三氟甲磺酸、氯化氢乙醚、氯化锌、氯化铁、氯化铝、四氯化钛、三氟甲磺酸钪、三氟甲磺酸锌、三氟甲磺酸铁、三氟甲磺酸铜、全氟磺酸树脂Nafion和固体酸HND-580中的一种。
7.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂MPLA中间体的合成方法，其特征在于，步骤(6)中，所述的有机溶剂为二氯甲烷、乙醚、甲基叔丁基醚、甲基环戊基醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、碳酸二乙酯、吡啶、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二乙基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜中的一种；所述的碱为吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、三乙胺、二异丙基乙胺、四甲基乙二胺、三乙烯二胺中的一种；
...【技术特征摘要】
1.一种新型疫苗佐剂mpla中间体的合成方法，有以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂mpla中间体的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述碱为氢氧化锂、碳酸锂、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸氢钾、碳酸钾、氢氧化铯、碳酸铯、氢氧化钙、氢氧化钡、四甲基氢氧化铵、四丁基氢氧化铵中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂mpla中间体的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述碱为吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、n-甲基吗啉、n-甲基哌啶、n-乙基哌啶、三乙胺、二异丙基乙胺、四甲基乙二胺、三乙烯二胺中的一种；
4.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂mpla中间体的合成方法，其特征在于，步骤(3)中，所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯、乙醚、甲基叔丁基醚、丁醚、环戊基甲醚、四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、乙酸甲酯、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、碳酸二乙酯和乙腈中的一种；
5.根据权利要求1所述的一种新型疫苗佐剂mpla中间体的合成方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的碱为钠、氨水、氨的甲醇溶液、甲胺的甲醇溶液、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯、四甲基氢氧化铵、四丁基氢氧化铵、碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、甲醇钠、甲醇钾、乙醇钠和乙醇钾中的一种；所述的溶剂为甲醇、乙醇、体积比0.5～4:1的二氯甲烷/甲醇、体积比0.5～4:1的二氯甲烷/乙醇、体积比0.5～4:1的氯仿/甲醇、体积比0.5～4:1的氯仿/乙醇、体积比0.5～4:1的1,2-二氯乙烷/甲醇、体积比0.5～4:1的1,2-...
【专利技术属性】
技术研发人员：王博，侍钊平，刘耘彤，张传磊，孙承良，邹志弢，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：
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