【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗体领域，具体涉及特异性结合哺乳动物、特别是人的b7-h3的抗体及其制备方法、其偶联物和应用；特别是用于治疗癌症的全人抗体及全人抗体偶联物。
技术介绍
1、b7-h3又名cd276，最早于2001年报道(chapoval ai等,nat immmunol 2001,2(3):269-274)，其蛋白因其缺少一个heptad结构以及b30.2结构域故而认为不属于嗜乳脂蛋白和髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白，并鉴定属于b7家族免疫球蛋白超家族成员(chapoval ai等,nat immmunol 2001,2(3):269-274)。与家族其它成员如pd-l1、b7-h4、cd80、cd86等不同的是：b7-h3在人体中以两种不同的变体形式存在：即2igb7-h3和4igb7-h3，其中4igb7-h3由2igb7-h3的外显子复制，人体中主要以4igb7-h3的形式存在(sun m等，the journalof immunology 2002,168(12):6294-6297；ling v等，genomics2003,82(3):365-377；steinberger p等,j immunol 2004,172(4):2352-2359)，而在鼠中只含有2igb7-h3结构(sun m等，the journal of immunology 2002,168(12):6294-6297)。研究结果显示，天然小鼠的2igb7-h3与人的4igb7-h3显示出相似的功能且无功能差异(ling v等，genomics2003,8
2、虽然b7-h3的mrna水平表达较为广泛，比如可在人体诸多组织器官中包括心脏、肝、胎盘、前列腺、睾丸、子宫、胰腺、小肠以及结肠中等检查到高水平的b7-h3的mrna水平，但蛋白表达水平相对局限在静息的成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞、羊水干细胞等非免疫细胞，以及受诱导的抗原提呈细胞、nk细胞表面(hofmeyer ka等,proc natl acad sci u sa 2008,105(30):10277-10278；yi kh等,immunol rev 2009,229(1):145-151；picarda e等,clin cancer res2016,22(14):3425-3431)。b7-h3蛋白水平在正常健康组织中低表达，比如可在正常人体的肝、肺、膀胱、睾丸、前列腺、乳房、胎盘、淋巴器官等组织可检测到b7-h3较低的蛋白水平，但b7-h3蛋白在大量的恶性肿瘤中过表达，是肿瘤细胞的一个标志性抗原。研究表明b7-h3可在前列腺癌、卵巢癌、结直肠癌、肾细胞癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、黑色素瘤、胃癌、膀胱癌、恶性神经胶质瘤以及骨肉瘤等诸多癌症中高表达，特别是在头颈部癌、肾癌、脑胶质瘤以及甲状腺癌等多种癌症中异常高表达(roth tj等，cancer res2007,67(16):7893-7900；zang x等，modern pathol 2010,23(8):1104-1112；ingebrigtsen va等，int j cancer 2012,131(11):2528-2536；sun j等，cancer immunology,immunotherapy 2010,59(8):1163-1171；crispen pl等，clin cancer res2008,14(16):5150-5157；zhang g等，lung cancer 2009,66(2):245-249；yamato i等，br j cancer2009,101(10):1709-1716；tekle c等,int j cancer 2012,130(10):2282-2290；katayamaa等,int j oncol 2011,38(5):1219-1226；wu cp等，world j gastroenterol 2006,12(3):457-459；wu d等，oncol lett 2015,9(3):1420-1424)。b7-h3不仅表达肿瘤细胞上，在肿瘤新生血管内皮细胞上同样高表达，是一个非常广谱的肿瘤标志性抗原。b7-h3蛋白高表达可促进癌症进展，与患者的不良预后及较差的生存获益有关。
3、虽然早期研究结果表明b7-h3可刺激活化t细胞功能，促进cd4及cd8细胞的增殖以及ifn-γ的分泌，但随着研究的深入，现已表明b7-h3作为一种免疫检查点主要起着抑制t细胞功能的作用，其下调t细胞活性，是t细胞的负调节分子。woong-kyung suh以及durbakav.r.prasad的研究均表明鼠的b7-h3蛋白可剂量依赖性的显著抑制cd4、cd8细胞的增殖(suh w等，nat immunol 2003,4(9):899-906；prasad dvr等，the journal of immunology2004,173(4):2500-2506)。judith leitner等人的研究同样表明人的4ig-b7-h3ig以及2ig-b7-h3ig在体外均可抑制t细胞的增殖，以及抑制cd4、cd8细胞的相关细胞因子(ifn-γ、il-2、il-10、il-13)的分泌(leitner j等，eur j immunol 2009,39(7):1754-1764)，进一步分析指出b7-h3主要是通过抑制il-2的产生从而介导抑制t细胞增殖。而在小鼠体内靶向中和b7-h3的抗体可显著促进实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae)的进展以及促进cd4细胞的增殖，客观说明b7-h3在体内抑制t细胞功能(prasad dvr等，the journal ofimmunology 2004,173(4):2500-2506)。在woong-kyung suh的研究中，在免疫eae条件下，b7-h3缺陷型小鼠相比野生型小鼠显示更早的发生实验性自身免疫性脑脊髓炎(由th1细胞引起)，说明b7-h3主要抑制th1细胞(suh w等，nat immunol 2003,4(9):899-906)。如上所述，b7-h3对t细胞的功能存在争论，但b7-h3促进t细胞功能目前只出现在小鼠的研究中，而人b7-h3促进t细胞功能暂未有报道，虽然b7-h3的受体未确定，但目前学界主要观点认为b7-h3是t细胞的负调控分子。
4、基于b7-h3可抑制t细胞活性从而介导肿瘤细胞逃逸免疫监视，因此阻断b7-h3与未知受体的结合从而介导t细胞活化以及抑制肿瘤细胞活性是行之有效的，比如enoblituzumab的现有临床结果表明其对不同肿瘤均有不同程度的缓解，具有较好的疗效，但仍有多名患者发生疾病进展，因此单纯开发针对b7-h3的单克隆抗体在临床上仍不能达本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗B7-H3抗体，其特征在于，其包含互补决定区：重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3，轻链CDR1、轻链CDR2和轻链CDR3，
2.如权利要求1所述的抗B7-H3抗体，其特征在于，所述的抗B7-H3抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:24所示，或者与如序列表中SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列有至少80％的同源性；
3.如权利要求1或2所述的抗B7-H3抗体，其特征在于，所述的抗B7-H3抗体可以为以下任何一种抗体形式：
4.一种编码如权利要求1～3任一项所述的抗B7-H3抗体的核酸。
5.一种表达载体，其包含如权利要求4所述的核酸。
6.一种转化体，其包含如权利要求5所述的表达载体或者基因组中整合有如权利要求4所述的核酸。
7.一种抗B7-H3抗体的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：培养如权利要求6所述的转化体，从培养物中获得所述抗B7-H3抗体。
8.一种免疫偶联物，其特征在于，其包括如权利要求1～3任一项所述的抗B7
9.一种药物组合物，其特征在于，其包括如权利要求1～3任一项所述的抗B7-H3抗体或者如权利要求8所述的免疫偶联物，以及药学上可接受的载体。
10.一种如权利要求1～3任一项所述的抗B7-H3抗体、如权利要求8所述的免疫偶联物或者如权利要求9所述的药物组合物在制备治疗B7-H3表达异常相关疾病的药物中的应用，所述的B7-H3表达异常相关疾病优选肿瘤，所述的肿瘤优选癌症，所述的癌症优选肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、结直肠癌、黑素瘤、肝癌、卵巢癌、膀胱癌、胃癌、食管癌或肾癌。
...【技术特征摘要】
1.一种抗b7-h3抗体，其特征在于，其包含互补决定区：重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3，轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3，
2.如权利要求1所述的抗b7-h3抗体，其特征在于，所述的抗b7-h3抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如序列表中seq id no:24所示，或者与如序列表中seq id no:24所示的氨基酸序列有至少80％的同源性；
3.如权利要求1或2所述的抗b7-h3抗体，其特征在于，所述的抗b7-h3抗体可以为以下任何一种抗体形式：
4.一种编码如权利要求1～3任一项所述的抗b7-h3抗体的核酸。
5.一种表达载体，其包含如权利要求4所述的核酸。
6.一种转化体，其包含如权利要求5所述的表达载体或者基因组中整合有如权利要求4所述的核酸。
7.一种抗b7-h3抗体的制备方法，其特征在于，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭青松，吴芳，杨彤，沈毅珺，
申请(专利权)人：泰州复旦张江药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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