一种通过人工雌核发育提高乌鲤生长速度的方法技术

技术编号：43230166 阅读：10 留言：0更新日期：2024-11-05 17:18

本发明专利技术属于鱼类人工雌核发育育种领域，公开了一种通过人工雌核发育提高乌鲤生长速度的方法，包括如下步骤：将团头鲂精子稀释后，在紫外灯下照射进行灭活处理，直至活跃的精子数量降至45‑55％时停止照射，将照射后的精子置于遮光条件下进行冷藏保存；将乌鲤卵子和处理后得到的精子在常温水中混合，使其受精，对受精卵在3‑6℃下进行冷休克处理23‑25min，再置于常温水中孵化。得到的雌核发育乌鲤，在外形及生物学特性上与母本乌鲤存在差异，生长速度更快，可以缩短育种周期；且可以经过回交获得新的乌鲤品系，为乌鲤的提纯复壮以及品质提升提供了重要的种质资源。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于鱼类人工雌核发育育种领域，尤其涉及一种通过人工雌核发育提高乌鲤生长速度的方法。

技术介绍

1、乌鲤是鲤鱼的一种变种又称禾花鲤，属鲤形目，鲤科，鲤亚科；乌鲤体型短而粗壮，头部较小，皮薄而肉嫩，无泥腥味，体色为紫红色，细叶鳞，部分因其腹部皮薄而隐约可见内脏。其生长速度快，且肉质鲜美肉多刺小，因此受到许多养殖户的青睐。可是由于长期的自交与近亲交配，导致其品质不断恶化，最为直观的感受就是生长速度和抗性能力都在下降。目前人工雌核发育技术在水产行业中主要应用于纯系的快速建立、单性种群利用和确定性别遗传机制。在传统育种技术中想要得到纯系一般需要多世代近亲交配，而一次有丝分裂相当于8～10代近亲交配，而且多世代的近亲交配会带来某些优势性状的退化。由此可以看出人工雌核发育技术的应用，能够迅速构建纯系，极大地缩短了育种的时间周期。

2、人工诱导雌核发育技术是通过使用异源精子来刺激卵子的发育和遗传物质的加倍，从而产生全雌性后代的一种技术。在卵子遗传物质加倍的步骤中，研究人员通过抑制第二极体的排出或抑制第一次卵裂来实现遗传物质的加倍。这种方法可以增加卵子中的染色体数目，从而产生具有双倍体遗传物质的后代。常用的诱导方法包括热休克、冷休克和静水压法。研究一种通过人工诱导雌核发育技术提高乌鲤生长速度的方法，对本领域具有十分重要的意义。

技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题是，克服以上
技术介绍
中提到的不足和缺陷，提供一种通过人工诱导雌核发育技术提高乌鲤生长速度的方法。

<p>2、为解决上述技术问题，本专利技术提出的技术方案为：

3、一种通过人工雌核发育提高乌鲤生长速度的方法，包括如下步骤：

4、(1)将团头鲂精子稀释后，在紫外灯下照射进行灭活处理，直至活跃的精子数量降至45-55％时停止照射，将照射后的精子置于遮光条件下进行冷藏保存；

5、(2)将乌鲤卵子和步骤(1)处理后得到的精子在常温水中混合，使其受精，对受精卵在3-6℃下进行冷休克处理23-25min，再置于常温水中孵化。

6、异源精子的选择了团头鲂作为提供异源精子的父本，确保获得的后代为雌核发育个体。冷休克是目的是抑制受精卵释放第二极体，从而促使卵子的遗传物质完成加倍。

7、上述的制备方法，优选的，在步骤(1)中，所述团头鲂精子稀释的具体操作如下：用hank’s液对团头鲂精子进行稀释，稀释倍数为1-10倍体积。

8、优选的，在步骤(1)中，所述灭活处理的具体操作如下：将稀释后的精子置于培养皿中放置在冰板上，在放置在摇床上，用15w紫外灯进行照射，紫外灯与精子之间的照射距离为28-32cm，整个紫外照射系统采用遮光布覆盖。

9、遮光布覆的目的是双重的：一方面保护实验人员免受过度的紫外照射，另一方面避免在照射过程中因光修复作用导致遗传活性的恢复，从而确保灭活效率。在进行紫外灭活处理的过程中，每隔1-3min手动摇匀培养皿，并进行一次显微镜检查。在镜检时，使用牙签取少量培养物样本置于载玻片上，然后调整显微镜至合适的焦距以清晰观察精子的形态。随后，滴加少量清水并用牙签轻轻搅拌，使精子与水混合并激活，以便观察其活力。这一过程会持续进行，直到视野中活跃的精子比例降低到大约50％，此时将停止紫外照射。

10、优选的，所述照射过程中每1-3min将培养皿摇匀，并定期观察精子活力。

11、优选的，所述冷藏保存的温度为4-5℃。

12、优选的，在步骤(2)中，所述常温水的温度为23-25℃。

13、优选的，在步骤(2)中，所述受精的时间为2-3min，所述孵化过程中确保每个受精卵之间有足够的空间，避免相互接触。这样的布局有利于受精卵在孵化过程中获得充分的氧气供应，通过这种方式，能够为受精卵提供一个适宜的环境，以促进其顺利孵化。

14、优选的，在步骤(2)中，对受精卵在4℃下进行冷休克处理23min。

15、与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：

16、1、本专利技术的方法，首次通过团头鲂异源精子刺激获得了雌核发育乌鲤后代，在外形及生物学特性上与母本乌鲤存在差异，生长速度更快，可以缩短育种周期；且可以经过回交获得新的乌鲤品系，为乌鲤的提纯复壮以及品质提升提供了重要的种质资源。

17、2、本专利技术的方法，在冷休克温度、冷休克时间、受精率、孵化率、外形均有所不同，培育效率更高。

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【技术保护点】

1.一种通过人工雌核发育提高乌鲤生长速度的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述团头鲂精子稀释的具体操作如下：用Hank’s液对团头鲂精子进行稀释，稀释倍数为1-10倍体积。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述灭活处理的具体操作如下：将稀释后的精子置于培养皿中放置在冰板上，在放置在摇床上，用15W紫外灯进行照射，紫外灯与精子之间的照射距离为28-32cm，整个紫外照射系统采用遮光布覆盖。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述照射过程中每1-3min将培养皿摇匀，并定期观察精子活力。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述冷藏保存的温度为4-5℃。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述常温水的温度为23-25℃。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述受精的时间为2-3min，所述孵化过程中确保每个受精卵之间有足够的空间，避免相互接触。

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【技术特征摘要】

1.一种通过人工雌核发育提高乌鲤生长速度的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述团头鲂精子稀释的具体操作如下：用hank’s液对团头鲂精子进行稀释，稀释倍数为1-10倍体积。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述灭活处理的具体操作如下：将稀释后的精子置于培养皿中放置在冰板上，在放置在摇床上，用15w紫外灯进行照射，紫外灯与精子之间的照射距离为28-32cm，整个紫外照射系统采用遮光布覆盖。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：覃钦博，刘少军，许效玮，黄旭，汪重庆，吴昌，许细丹，张坤，周悦，胡恩魁，李四阳，
申请(专利权)人：湖南师范大学，
类型：发明
国别省市：

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