【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物领域，特别是涉及一种抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体、试剂盒及其应用。
技术介绍
1、随着广谱抗生素、糖皮质激素及免疫抑制剂的广泛应用，器官移植的开展，特别是近年来，骨髓移植、造血干细胞移植的开展，真菌感染越来越多，其中侵袭性曲霉菌感染是危害最大，预后严重的深部真菌感染。侵袭性曲霉菌病(invasive aspergillosis，ia)为严重的机会性感染，此类感染在免疫缺陷患者和住院患者中有很高的发病率和病死率。侵袭性曲霉菌病临床表现多样化，症状体征缺乏特异性，病情进展迅速，常危及患者的生命。早期快速诊断有助于及时控制病情，改善预后。
2、目前，侵袭性曲霉菌病的诊断主要是靠病原菌培养、影像学和组织病理学这三种方法。虽然下呼吸道痰培养易获得病原学结果而且操作成本较为廉价，易鉴定出曲霉菌属并进行适当抗真菌治疗，但痰培养时间一般为48-96h或更长，且阳性结果低，阳性率波动为20％～50％。另外，仅1次痰培养结果显示曲霉菌属的临床意义并不十分明确，因为很难区分是真正感染还是定植菌。胸部电子计算机断层扫描(computer tomography，ct)的应用对各种肺部疾病诊断有一定帮助，粒细胞减少患者侵袭性曲霉菌病(invasive pulmonaryaspergillosis，ipa)的影像学表现为典型月晕征和新月征，而非粒细胞减少患者ipa的上述影像学表现则十分罕见，且特异性较低。肺部团块影、浸润影、结节影常见。而确诊的ipa诊断金标准为组织病理学证据，组织病理学检查虽然对诊断有非常重要的价值，但侵入性检
3、因此侵袭性曲霉感染的病原学诊断，尤其是早期快速诊断十分困难，病人常常因未能得到及时的诊断而延误了治疗。发展曲霉菌感染的早期、特异、敏感的快速诊断方法一直是真菌感染研究领域的热点和难点。
4、半乳甘露聚糖(galactomannan,gm)是曲霉细胞壁的主要成分，其半乳糖和甘露糖之比为1:1.17，相对分子质量在25000-75000之间。在菌丝繁殖期，其能释放到人体体液中，如血液、尿液及肺泡灌洗液等。体外及动物模型研究发现gm在ia疾病早期即能释放出来，与血浆中浓度相比，肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，balf)中gm浓度更高。对中性粒细胞减少患者来说，血浆gm试验为早期发现及时诊断ia的重要方法。
5、以上各种局限性导致目前临床上侵袭性曲霉菌感染的早期诊断非常困难。因此，临床上十分需要一种灵敏度高、特异性好、且操作简单，适用于侵袭性曲霉菌感染早期诊断的检测方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体、试剂盒及其应用，以解决上述现有技术存在的问题。本专利技术提供的来源于抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体与曲霉半乳甘露聚糖特异性结合，抗体亲和力高，能够准确诊断曲霉半乳甘露聚糖。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术提供了一种抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体，所述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体包括轻链可变区决定簇互补区和重链可变区决定簇互补区；
4、所述轻链可变区决定簇互补区包括氨基酸序列如seq id no.1所示的vl-cdr1、氨基酸序列如seq id no.2所示的vl-cdr2和氨基酸序列如seq id no.3所示的vl-cdr3；
5、所述重链可变区决定簇互补区包括氨基酸序列如seq id no.4所示的vh-cdr1、氨基酸序列如seq id no.5所示的vh-cdr2和氨基酸序列如seq id no.6所示的vh-cdr3。
6、优选的，所述轻链可变区决定簇互补区的氨基酸序列如seq id no.7所示；所述重链可变区决定簇互补区的氨基酸序列为seq id no.8。
7、本专利技术提供了一种编码抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的核酸分子，所述核酸分子编码上述的抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的轻链可变区决定簇互补区和重链可变区决定簇互补区。
8、优选的，编码所述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的轻链可变区决定簇互补区的核酸分子的核苷酸序列如seq id no.9所示；编码所述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的重链可变区决定簇互补区的核酸分子的核苷酸序列如seq id no.10所示。
9、本专利技术提供了一种包含上述的核酸分子的重组载体。
10、进一步优选的，所述重组载体为含有上述的核酸分子的真核重组表达质粒pcmvp-neo-ban-anti-galactomannan。
11、本专利技术提供了一种包含上述的核酸分子或上述的重组载体的重组细胞。
12、进一步优选的，所述重组细胞为抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的重组表达中国仓鼠卵巢细胞。
13、所述重组载体及将重组载体导入细胞后所得的所述重组表达细胞都属于本专利技术保护范围，所述重组载体是指所有包含抗上述的核酸分子的重组载体(也可以称为重组质粒)，所述重组表达细胞是指所有包含上述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的基因的重组表达细胞，并不限于本专利技术所指出的含有上述的核酸分子的真核重组表达质粒pcmvp-neo-ban-anti-galactomannan及抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的重组表达中国仓鼠卵巢细胞，应理解为，本专利技术要求保护的技术方案中所涉及的重组载体为将上述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的基因插入到本领域技术人员能够购买到的任一表达载体(也可以称为表达质粒)中所获得的重组载体；重组细胞为将上述重组载体导入任一表达细胞后所获得的重组表达细胞。
14、本专利技术提供了一种用于检测曲霉半乳甘露聚糖的组合物，所述组合物包括上述的抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体。
15、本专利技术提供了上述的抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体或上述的组合物在制备检测曲霉半乳甘露聚糖的产品中的应用。
16、优选的，所述产品包括试剂、试剂盒和芯片。
17、进一步优选的，所述试剂盒为曲霉半乳甘露聚糖磁微粒化学发光检测试剂盒。
18、本专利技术提供了一种曲霉半乳甘露聚糖检测试剂盒，所述曲霉半乳甘露聚糖检测试剂盒包括上述的抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体。
19、进一步优选的，所述试剂盒为曲霉半乳甘露聚糖磁微粒化学发光检测试剂盒。
20、进一步优选的，所述曲霉半乳甘露聚糖磁微粒化学发光检测试剂盒中含有采用生物素标记的上述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体。
21、进一步的，所述曲霉半乳甘露聚糖磁微粒化学发光检测试剂盒中还含有采用化学发光基团标记的上述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体。
22、本专利技术还优选提供了一种曲霉半乳甘露聚糖磁微粒化学发光检测方法，利用上述曲霉半乳甘露聚糖磁微粒化学发光检测试剂盒，采用磁微粒化学发光法进行检测。
23、进一步优选的，所述曲霉本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体，其特征在于，所述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体包括轻链可变区决定簇互补区和重链可变区决定簇互补区；
2.根据权利要求1所述的抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体，其特征在于，所述轻链可变区决定簇互补区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；所述重链可变区决定簇互补区的氨基酸序列为SEQ ID NO.8。
3.一种编码抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1或2所述的抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的轻链可变区决定簇互补区和重链可变区决定簇互补区。
4.根据权利要求3所述的核酸分子，其特征在于，编码所述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的轻链可变区决定簇互补区的核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；编码所述抗曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的重链可变区决定簇互补区的核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。
5.一种包含权利要求3或4所述的核酸分子的重组载体。
6.一种包含权利要求3或4所述的核酸分子或权利要求5所述的重组载体的重组细胞。
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