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用于检测花生锈病抗性的KASP分子标记引物组及其应用制造技术

技术编号:43221423 阅读:4 留言:0更新日期:2024-11-05 17:13
本发明专利技术涉及用于检测花生锈病抗性的KASP分子标记引物组及其应用。所述KASP分子标记SNP位点Tif1_A02_3438294位于花生栽培种2号染色体上,突变位点为:G/A,根据该分子标记突变位点前后100bp的序列设计KASP引物组。利用KASP分子标记引物组进行PCR鉴定的方法,提取待鉴定花生材料的DNA,当检测的SNP位点Tif1_A02_3438294基因型为G:G,花生材料表现为抗病;当检测的SNP位点Tif1_A02_3438294基因型为A:A,则花生材料表现为感病。本发明专利技术的KASP分子标记可用于花生抗锈病材料的基因型筛选,该鉴定方法受环境影响小,结果稳定可靠,通过早期基因筛选可缩短育种年限,提高育种效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学,具体涉及一种用于检测花生锈病抗性的kasp分子标记引物组及应用技术。


技术介绍

1、花生(arachis hypogaea l.)是全球重要的油料作物和经济作物,由花生柄锈菌(puccinia arachidis speg)引起的花生锈病是一种世界性花生病害,流行范围广,严重影响花生的产量和品质,给花生生产带来巨大损失。

2、目前,生产上防控花生锈病的主要方法是药剂防治和培育抗病花生品种。在发病初期及时喷施药剂,能有效减少锈病发生,但是化学药剂存在成本高、危害环境和人体健康等问题,长期使用易导致病原菌产生耐药性,不符合绿色生产理念。选用抗病花生品种是最经济有效的防控措施,因地制宜种植高抗锈病的花生品种,如仲恺花1号、汕油21、粤油20等,可从根本上减少锈病发生。

3、利用传统育种手段培育抗锈病花生品种具有一定的盲目性,且效率低。开发检测花生锈病抗性的分子标记,可以借助分子标记辅助选择技术更加准确地筛选抗病品种,提高抗病育种效率。这种技术实现了从经验育种向定向、高效、精确育种转变,通过早期基因型选择,可大幅提高育种效率,而且分子标记辅助育种比传统的表型选择方法更准确。因此,开发和筛选与花生锈病抗性基因紧密连锁的分子标记,将其应用于花生品种抗病鉴定,对分子标记辅助选择育种及改良花生抗病性状具有重大意义。


技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足,本申请提供一种用于检测花生锈病抗性的kasp分子标记引物组以及利用该kasp引物组检测花生锈病抗性的方法,通过基因型选择,实现该性状的早期鉴定,大幅提高育种效率。

2、本专利技术的技术方案如下:

3、用于检测花生锈病抗性的kasp分子标记引物组,包括上游引物1和上游引物2和下游引物3;

4、上游引物1:attttccttcctaatccgtaggattc(seq id no.1)

5、上游引物2:aattttccttcctaatccgtaggattt(seq id no.2)

6、下游引物3:ttactcgtgaaaaacaatggccgtaaac(seq id no.3)

7、所述kasp分子标记的snp位点为tif1_a02_3438294,位于花生栽培种2号染色体上,突变位点为:g/a,突变位点前、后100bp的序列分别为:

8、aggtacaccgtgagagccaatcacagtttctactctatacataaacag tggctgatagggacagattactcgtgaaaaacaatggccgtaaaccgtggc t(seq id no.4);

9、aatcctacggattaggaaggaaaattggcaggcatataccgtggttgc ctaccacggtttacgaagaggagacattcaaaggtaaaatcccttacttcc c(seq id no.5)。

10、优选地,所述的kasp分子标记引物组检测花生锈病的方法:提取待鉴定花生材料的dna,利用kasp分子标记引物组对snp位点tif1_a02_3438294进行pcr扩增和基因型检测,根据snp位点的基因型预测待鉴定花生材料对锈病的抗性;

11、判断方法如下:当snp位点tif1_a02_3438294的基因型为g:g时,则花生材料表现为抗病;当snp位点tif1_a02_3438294的基因型为a:a时,则花生材料表现为感病。

12、一种所述的kasp分子标记引物组的检测试剂或试剂盒。

13、一种所述的kasp分子标记引物组在检测花生锈病中的应用。

14、本专利技术的有益效果:

15、(1)本专利技术的与花生抗锈病性状连锁的分子标记,通过锈病抗性差异大的花生品种构建的连锁群体进行qtl定位获得,与花生锈病抗性紧密连锁,可用于锈病抗性的分子标记辅助选择育种。

16、(2)本专利技术利用kasp分子标记引物组进行pcr鉴定,根据snp位点的基因型预测待鉴定花生材料的锈病抗性;当检测的snp位点tif1_a02_3438294基因型为g:g,则花生材料表现为抗病;当检测的snp位点tif1_a02_3438294基因型为a:a,则花生材料表现为感病。对室内和田间验证结果的比较表明,该基因型的预测结果和通过病情指数的判定结果一致。

17、(3)本专利技术的与抗锈病性状连锁的分子标记,可以用于检测花生材料的基因型,进而判断材料是否具有锈病抗性,通过高通量的基因分型系统检测,可大大节省人力物力,检测不受环境因素的影响,鉴定结果准确可靠,可用于花生锈病抗性材料的早期筛选,能缩短育种年限,提高育种效率。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于检测花生锈病抗性的KASP分子标记引物组,其特征在于:所述引物组包括上游引物1和上游引物2和下游引物3;

2.一种含权利要求1所述的KASP分子标记引物组的检测试剂或试剂盒。

3.一种利用权利要求1所述的KASP分子标记引物组检测花生锈病的方法,其特征在于,提取待鉴定花生材料的DNA,利用KASP分子标记引物组对SNP位点Tif1_A02_3438294进行PCR扩增和基因型检测,根据SNP位点的基因型预测待鉴定花生材料对锈病的抗性;

4.一种权利要求1所述的KASP分子标记引物组在检测花生锈病中的应用。

【技术特征摘要】

1.用于检测花生锈病抗性的kasp分子标记引物组,其特征在于:所述引物组包括上游引物1和上游引物2和下游引物3;

2.一种含权利要求1所述的kasp分子标记引物组的检测试剂或试剂盒。

3.一种利用权利要求1所述的kasp分子标记引物组检测花生锈病的方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:张新友石欣隆孙子淇齐飞艳董文召黄冰艳张毛宁刘鸿飞许淋虹赵瑞芳王娟汪蒙蒙郅晨阳
申请(专利权)人:神农种业实验室
类型:发明
国别省市:

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