【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗菌组合物领域技术，尤其是指一种负载皂素的抗菌组合物的制备方法以及在抑制蜡样芽孢杆菌中的应用。
技术介绍
1、蜡样芽孢杆菌(bacillus cereus)是引起食物中毒最常见的病原体之一，生物膜的存在是引起蜡样芽孢杆菌持续性污染的关键；与浮游细胞相比，处于生物膜中的蜡样芽孢杆菌具有更强的抗生素抗性和污染能力。细菌生物膜表现出的极强粘附性和抗吞噬作用使其一旦在食品加工机械、器具、运输管道上形成，便成为难以清除的潜在污染源，给食品加工造成巨大安全隐患，因此开发安全有效的抑菌剂，及时抑制蜡样芽孢杆菌的生长和生物膜的形成，对于提高食品安全质量具有重要意义和应用价值。
2、目前的防治策略主要包括传统的抗生素、天然植物性抑菌剂等，一方面，细菌生物膜胞外聚合物(eps)基质作为嵌入和屏蔽细菌细胞的物理屏障在很大程度上影响生物膜内外部小分子物质(如抗生素、天然植物性抑菌剂)的渗透并降低其流动性，另一方面，单一抗生素对生物膜的作用极为有限，且多药耐药菌株的出现严重降低了抗生素治疗的疗效，因此有必要探索新的生物膜预防和破坏策略。
3、油茶皂素是从油茶饼粕中提取出的一类糖苷化合物，是一类富含皂苷的天然非离子型表面活性剂，不仅具有去污、起泡、乳化等表面活性，还兼具杀菌、消炎、抑制细胞增殖等多种生理活性。研究表明，油茶皂素不仅对蜡样芽孢杆菌的生长具有抑制效果，还对其生物膜的形成具有明显的控制作用，可以通过抑制eps(胞外聚合物)的形成进而干预整个生物膜形成过程。
4、在生物被膜控制方面，纳米粒子被认为是
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术针对现有技术存在之缺失，其主要目的是提供一种负载皂素的抗菌组合物的制备方法以及在抑制蜡样芽孢杆菌中的应用，其通过采用本申请提供的制备方法获得的负载皂素的抗菌组合物对蜡样芽孢杆菌抑制效果明显；本申请采用的制备方法成本低，且所采用的原材料均为无毒副作用的物质，应用于食品器皿抑菌时安全性高。
2、为实现上述目的，本专利技术采用如下之技术方案：
3、一种负载皂素的抗菌组合物的制备方法，包括如下步骤：
4、第一、制备酸性电解水：采用质量浓度为0.02％-0.04％的氯化钠溶液作为电解液进行电解，电解得到ph值为3.2-3.5、有效氯浓度为65-70mg/l的酸性电解水；
5、第二、制备油茶皂素：以榨油后的油茶饼粕为原料采用提取溶剂进行提取得到含油茶皂素的粗提取物，将粗提取物浓缩干燥后采用大孔树脂柱进行洗脱，洗脱液为蒸馏水和乙醇溶液；分别采集洗脱液，浓缩干燥后得油茶皂素；
6、第三、制备中药混合物：将含有马齿苋、金银花和五味子的中药原料进行乙醇提取，浓缩干燥得到醇提浓缩液；采用乙醇的质量百分数为70-75％；醇提完成后采用硅胶柱进行有效抑菌成分的分离提取，以氯仿-甲醇混合液作为洗脱液，洗脱后收集洗脱液得到含有抑菌成分的中药混合物；
7、第四、制备含有纳米二氧化钛的抗菌组合物：将制备好的酸性电解水、油茶皂素和中药混合物混合均匀，并向混合物中加入纳米二氧化钛粉末；用超声波超声1-3min使纳米二氧化钛粉末完全分散在酸性电解水、油茶皂素和中药混合物中，配置成含有纳米二氧化钛的抗菌组合物。
8、作为一种优选方案：所述步骤四中得到的抑菌组合物，包括如下原料：酸性电解水、油茶皂素、中药混合物和纳米二氧化钛粉末，其中各原料组分按质量份计酸性电解水85-90、油茶皂素5-8份、中药混合物2-5份和纳米二氧化钛粉末1-2份。
9、作为一种优选方案：所述步骤二提取过程中采用的提取溶剂是浓度为70％的丙酮-水溶液，料液比(g∶ml)＝1∶8，提取温度为85℃，提取时间为2-3h，提取次数为3次。
10、作为一种优选方案：所述步骤二中洗脱时分别用蒸馏水、浓度为15％的乙醇溶液洗脱杂质，最后以3倍树脂量(ml/g)的浓度75％乙醇溶液洗脱。
11、作为一种优选方案：所述步骤三中的以氯仿-甲醇混合液作为洗脱液时，氯仿与甲醇的体积比为2:1-4:1。
12、作为一种优选方案：所述步骤三中对含有马齿苋、金银花和五味子的中药原料进行乙醇提取时，各组分按重量份计为马齿苋30-40份、金银花30-40份和五味子10-20份。
13、作为一种优选方案：所述步骤三中对含有马齿苋、金银花和五味子的中药原料进行乙醇提取时，各组分按重量份计为马齿苋40份、金银花40份和五味子20份。
14、作为一种优选方案：所述步骤三中对含有马齿苋、金银花和五味子的中药原料进行乙醇提取时，先在乙醇溶液中浸泡2-3小时，后在温度为85-90℃的条件下采用质量百分数为70-75％的乙醇进行提取，提取时间为2-3小时，提取次数为2-3次。
15、所述的负载皂素的抗菌组合物的应用，所述负载皂素的抗菌组合物用于在食品中抑制蜡样芽孢杆菌。
16、作为一种优选方案：所述负载皂素的抗菌组合物用于涂抹在食品器皿上抑制蜡样芽孢杆菌。
17、本专利技术与现有技术相比具有明显的优点和有益效果，具体而言，由上述技术方案可知，通过采用本申请提供的制备方法获得的负载皂素的抗菌组合物对蜡样芽孢杆菌抑制效果明显；本申请采用的制备方法成本低，且所采用的原材料均为无毒副作用的物质，应用于食品器皿抑菌时安全性高；本申请所制备的负载皂素的抗菌组合物选用的油茶皂素和中药混合物均属于中药成分，原料易得，提取工艺简单，降低了生产成本。<本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤四中得到的抑菌组合物，包括如下原料：酸性电解水、油茶皂素、中药混合物和纳米二氧化钛粉末，其中各原料组分按质量份计酸性电解水85-90、油茶皂素5-8份、中药混合物2-5份和纳米二氧化钛粉末1-2份。
3.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤二提取过程中采用的提取溶剂是浓度为70％的丙酮-水溶液，料液比(g∶ml)＝1∶8，提取温度为85℃，提取时间为2-3h，提取次数为3次。
4.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤二中洗脱时分别用蒸馏水、浓度为15％的乙醇溶液洗脱杂质，最后以3倍树脂量(ml/g)的浓度75％乙醇溶液洗脱。
5.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤三中的以氯仿-甲醇混合液作为洗脱液时，氯仿与甲醇的体积比为2:1-4:1。
6.根据权利要求1所述的负载皂素的
7.根据权利要求6所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤三中对含有马齿苋、金银花和五味子的中药原料进行乙醇提取时，各组分按重量份计为马齿苋40份、金银花40份和五味子20份。
8.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤三中对含有马齿苋、金银花和五味子的中药原料进行乙醇提取时，先在乙醇溶液中浸泡2-3小时，后在温度为85-90℃的条件下采用质量百分数为70-75％的乙醇进行提取，提取时间为2-3小时，提取次数为2-3次。
9.一种如权利要求1-8任一项所述的负载皂素的抗菌组合物的应用，其特征在于：所述负载皂素的抗菌组合物用于在食品中抑制蜡样芽孢杆菌。
10.根据权利要求9所述的负载皂素的抗菌组合物的应用，其特征在于：所述负载皂素的抗菌组合物用于涂抹在食品器皿上抑制蜡样芽孢杆菌。
...【技术特征摘要】
1.一种负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤四中得到的抑菌组合物，包括如下原料：酸性电解水、油茶皂素、中药混合物和纳米二氧化钛粉末，其中各原料组分按质量份计酸性电解水85-90、油茶皂素5-8份、中药混合物2-5份和纳米二氧化钛粉末1-2份。
3.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤二提取过程中采用的提取溶剂是浓度为70％的丙酮-水溶液，料液比(g∶ml)＝1∶8，提取温度为85℃，提取时间为2-3h，提取次数为3次。
4.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤二中洗脱时分别用蒸馏水、浓度为15％的乙醇溶液洗脱杂质，最后以3倍树脂量(ml/g)的浓度75％乙醇溶液洗脱。
5.根据权利要求1所述的负载皂素的抗菌组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤三中的以氯仿-甲醇混合液作为洗脱液时，氯仿与甲醇的体积比为2:1-4:1。
6.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：廖海霞，马英姿，刘思思，李昌珠，刘汝宽，肖志红，涂佳，肖静晶，李力，吉悦娜，
申请(专利权)人：中南林业科技大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。