【技术实现步骤摘要】
技术介绍
1、紧密连接蛋白(claudin)为位于上皮和内皮的紧密连接(tight junction)内的整合膜蛋白。据预测，紧密连接蛋白包含四个跨膜区段，两个胞外环，和位于细胞质中的n端和c端。跨膜蛋白紧密连接蛋白(cldn)家族在上皮和内皮的紧密连接的维持中起着关键作用，并且也可能在细胞骨架的维持和细胞信号传导中起作用。
2、紧密连接蛋白-6(cldn6)是癌胚基因(oncofetal gene)，在鼠和人的干细胞以及定型为上皮细胞命运的胚状体中表达(turksen，k.et al.(2001)dev dyn 222，292-300；anderson wj.et al.(2008)dev dyn 237，504-12；turksen k.et al.(2002)development，129，1775-84；assou s.et al.(2007)stem cells 25，961-73)。作为肿瘤相关抗原，由于其在表皮形态发生的早期表达，在表皮分化和屏障形成中至关重要，因此可归类为分化抗原(differentiation antigen)。另外在上皮组织或新生儿舌、皮肤、胃和乳房的正常上皮组织中观察到表达(abuazza g.et al.(2006)，am j physiol renal physiol 291，1132-1141；troy t.c.et a1.(2007)，molecular biotechnology 36，1 66-74；zhao l.et al.(2008)，am j physiol
3、图1b所示的cldn3、cldn4、cldn6和cldn9的序列比对表明，cldn6对其他紧密连接蛋白高度保守。cldn6与其他紧密连接蛋白的高度同源性，特别是与cldn9和cldn4的高度同源性，使得难以提供具有适于诊断目的特性(如特异性和亲和力)的cldn6抗体。本专利技术人发现针对位于cldn6的c端部分的某个表位的抗体满足抗体的诊断应用标准，特别是用于检测和鉴定表达cldn6的细胞。
4、本专利技术的抗体可用于例如诊断癌症和/或确定癌细胞是否表达cldn6。优选地，癌症疾病或癌细胞的特征在于cldn6的表面表达。表达cldn6的癌细胞为靶向cldn6的疗法(例如抗cldn6抗体的疗法)的合适靶标。在一实施方案中，癌细胞表达或异常表达cldn6，而相应的正常细胞不表达cldn6或cldn6表达水平较低。
技术实现思路
1、在一方面，本专利技术涉及一种抗体或其抗原结合片段，其结合：
2、(i)具有氨基酸序列eyptkny(seq id no：38)的肽，和/或
3、(ii)紧密连接蛋白6(cldn6)，其中所述抗体或其抗原结合片段通过至少与cldn6内的表位结合来结合cldn6，所述表位具有氨基酸序列eyptkny(seq id no：38)，和/或
4、(iii)具有氨基酸序列eyptknyv(seq id no：29)的肽，和/或
5、(iv)紧密连接蛋白6(cldn6)，其中所述抗体或其抗原结合片段通过至少与cldn6内的表位结合来结合cldn6，所述表位具有氨基酸序列eyptknyv(seq id no：29)，和/或
6、(v)具有氨基酸序列aisrgpseyptknyv(seq id no：15)的肽，其中所述抗体或其抗原结合片段不结合具有氨基酸序列tsapaisrgpseypt(seq id no：14)的肽，和/或
7、(vi)紧密连接蛋白6(cldn6)，其中所述抗体或其抗原结合片段通过至少与cldn6内的表位结合来结合cldn6，所述表位具有氨基酸序列aisrgpseyptknyv(seq id no：15)，其中所述抗体或其抗原结合片段不结合具有氨基酸序列tsapaisrgpseypt(seq id no：14)的肽。
8、在本文所述方面的实施方案中以及在其他方面，本专利技术涉及单克隆抗体或其抗原结合片段，其
9、(i)结合具有氨基酸序列aisrgpseyptknyv(seq id no：15)的肽和/或
10、(ii)结合紧密连接蛋白6(cldn6)，其中所述抗体或其抗原结合片段通过至少与cldn6内的表位结合来结合cldn6，所述表位具有氨基酸序列aisrgpseyptknyv(seq id no：15)。
11、在本文所述方面的实施方案中以及在其他方面，本专利技术涉及一种抗体或其抗原结合片段，其结合以下肽中的一个或多个，优选全部：
12、paisrgpseyptkny(seq id no：22)、aisrgpseyptknyv(seq id no：15)、isrgpseyptknyv(seq id no：23)、srgpseyptknyv(seq id no：24)、rgpseyptknyv(seq idno：25)、gpseyptknyv(seq id no：26)、pseyptknyv(seq id no：27)、seyptknyv(seq idno：28)和eyptknyv(seq id no：29)，其中所述抗体或其抗原结合片段不结合具有氨基酸序列tsapaisrgpseypt(seq id no：14)的肽。
13、在一实施方案中，所述抗体或抗原结合片段以最低亲和力与所述肽结合和以最高亲和力与所述肽结合的结合亲和力的差异为50％或更少、40％或更少、30％或更少、20％或更少或10％或更少。
14、本文所述的抗体或抗原结合片段优选不与这样的肽结合，其包含氨基酸序列eyptk(seq id no：59)和/或氨基酸序列eyptkn(seq id no：60)但不包含氨基酸序列eyptkny(seq id no：38)。换句话说，本文所述的抗体或抗原结合片段与具有氨基酸序列eyptkny(seq id no：38)的肽和/或具有氨基酸序列eyptknyv(seq id no：29)的肽的结合是由于第二个酪氨酸的存在，所述第二个酪氨酸在氨基酸序列eyptk(seq id no：59)和/或氨基酸序列eyptkn(seq id no：60)中缺失。如本文所示，优选的抗体或抗原结合片段不与这样的肽结合，其包含氨基酸序列yptkny(seq id no：61)和/本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗体或其抗原结合片段，其：
2.权利要求1的抗体或其抗原结合片段，其中所述CLDN6存在于癌细胞上。
3.权利要求1或2的抗体或其抗原结合片段，其中所述癌细胞为表达CLDN6的癌细胞。
4.权利要求2或3的抗体或其抗原结合片段，其中所述癌细胞为选自以下癌的细胞：卵巢癌(尤其是卵巢腺癌和卵巢畸胎癌)、肺癌(包括小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)，尤其是鳞状细胞肺癌和腺癌)、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、皮肤癌(尤其是基底细胞癌和鳞状细胞癌)、恶性黑色素瘤、头颈癌(尤其是恶性多形性腺瘤)、肉瘤(尤其是滑膜肉瘤和癌肉瘤)、胆管癌、膀胱癌(尤其是移行细胞癌和乳头状癌)、肾癌(尤其是肾细胞癌，其包括透明细胞肾细胞癌和乳头状肾细胞癌)、结肠癌、小肠癌(包括回肠癌，尤其是小肠腺癌和回肠腺癌)、睾丸胚胎癌、胎盘绒毛膜癌、宫颈癌、睾丸癌(尤其是睾丸精原细胞瘤、睾丸畸胎瘤和胚胎睾丸癌)、子宫癌、生殖细胞肿瘤(例如畸胎瘤或胚胎癌，尤其是睾丸生殖细胞肿瘤及其转移形式)。
5.权利要求1-4中任一项的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或
6.权利要求1-5中任一项的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体选自：
7.权利要求1-5中任一项的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体选自：
8.权利要求1-5中任一项的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体选自：
9.一种用于确定细胞是否表达CLDN6的方法，其包括以下步骤：
10.一种用于确定癌症是否可以通过靶向CLDN6的癌症疗法来治疗的方法，其包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种抗体或其抗原结合片段，其：
2.权利要求1的抗体或其抗原结合片段，其中所述cldn6存在于癌细胞上。
3.权利要求1或2的抗体或其抗原结合片段，其中所述癌细胞为表达cldn6的癌细胞。
4.权利要求2或3的抗体或其抗原结合片段，其中所述癌细胞为选自以下癌的细胞：卵巢癌(尤其是卵巢腺癌和卵巢畸胎癌)、肺癌(包括小细胞肺癌(sclc)和非小细胞肺癌(nsclc)，尤其是鳞状细胞肺癌和腺癌)、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、皮肤癌(尤其是基底细胞癌和鳞状细胞癌)、恶性黑色素瘤、头颈癌(尤其是恶性多形性腺瘤)、肉瘤(尤其是滑膜肉瘤和癌肉瘤)、胆管癌、膀胱癌(尤其是移行细胞癌和乳头状癌)、肾癌(尤其是肾细胞癌，其包括透明细胞肾细胞癌和乳头状肾细胞癌)、结肠癌、小肠癌(包括回肠癌，尤其是小肠腺癌和回肠腺癌)、睾丸胚胎癌、胎盘绒毛膜癌、宫颈癌、睾丸癌...
【专利技术属性】
技术研发人员：R·米特纳赫特克劳斯，S·韦尔，K·瓦尔特，O·蒂雷西，U·沙欣，
申请(专利权)人：安斯泰来制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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