System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡分子生物学鉴定方法及应用技术_技高网

一种白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡分子生物学鉴定方法及应用技术

技术编号:43171537 阅读:11 留言:0更新日期:2024-11-01 20:01
本发明专利技术公开一种白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡分子生物学鉴定方法及应用,用于鉴定的分子标记为位于鸡基因组16号染色体76216bp(Gallus_gallus‑4.0)处的SNP位点,其存在G/A多态性,当该位置碱基为G时,为AB系公鸡;当该位置碱基为A时,为CD系公鸡。本发明专利技术所述方法能够快速、准确鉴别白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡,便于基层推广和使用,具有广阔的市场应用前景,此外,基于本发明专利技术方法开发的检测试剂盒,可产生可观的经济效益和良好的社会价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学,尤其涉及一种白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡分子生物学鉴定方法及应用。


技术介绍

1、目前国内外肉鸡品种大都为配套系,充分利用不同品系之间杂种优势,从而提高后代经济性状的性能。我国肉鸡由白羽肉鸡、黄羽肉鸡和817肉鸡3种类型组成。白羽肉鸡采用四系配套制种方式(图1),父本a、b两系生长速度较快,繁殖性略差;母本c、d两系繁殖性能较好,生长速度略差。黄羽肉鸡多为三系或两系配套。

2、817肉鸡是用白羽肉鸡父母代父系公鸡(ab系公鸡)与高产褐壳蛋鸡商品代杂交配套生产的(图2)。817名字取自山东省农科院家禽研究所于1988年8月17日完成杂交组合的筛选工作。该模式充分利用了白羽肉鸡的“快速”和商品代褐壳蛋鸡的“高产”的优点,以制种成本低、生产效率高和适应性强的优势,迅速占领了部分黄羽肉鸡的市场。目前817肉鸡每年出栏量25亿只左右,是我国肉鸡品类的重要组成部分。

3、肉鸡冰鲜上市速度会进一步加快,817肉鸡优势会进一步凸显。国外白羽肉鸡育种企业认为这种制种模式侵犯了其知识产权,收紧了a系和b系的供应,导致ab系公鸡供应紧缺。有些企业就用父母代母系公鸡(cd系公鸡)(图1中c♂x d♀的后代,一般淘汰)来着代替,cd系公鸡配套生产的817肉鸡生长速度和饲料转化效率等主要性能指标都低于ab系公鸡配套生产的817肉鸡,造成了一定的市场混乱。

4、因此亟需一种快速、准确而又易于操作的技术鉴别一种白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡,保证我国817肉鸡行业有序、健康、稳定发展。


技术实现思路

1、本专利技术的目的之一在于针对现有技术不足,提供一种白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡分子生物学鉴定方法。

2、本专利技术的目的之二在于提供用于检测上述分子标记的引物。

3、本专利技术的目的之三在于提供上述分子标记的用途。

4、本专利技术的目的之四在于提供利用上述分子标记的检测方法。

5、本专利技术的目的通过以下技术方案实现:

6、一种鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡分子标记,所述分子标记为位于鸡基因组16号染色体76216bp(gallus_gallus-4.0)处的snp位点,其存在g/a多态性,当该位置碱基为g时,为ab系公鸡;当该位置碱基为a时,为cd系公鸡。

7、本专利技术还提供一种鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡的分子标记的引物对,其中:

8、正向引物(seq id no.1):5'-cggagtcactgacagcagag-3'

9、反向引物(seq id no.2):5'-gcagcatctgatggacacct-3'。

10、本专利技术还提供含有上述引物对的用于鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡基因型的试剂盒。

11、本专利技术还提供上述分子标记或引物或试剂盒对在鉴别或选育白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡中的应用。

12、本专利技术还提供上述分子标记或引物或试剂盒对在筛选或辅助筛选ab系公鸡中的应用。

13、本专利技术还提供上述分子标记或引物或试剂盒对在筛选或辅助筛选cd系公鸡中的应用。

14、在一种具体的实例中,本专利技术所述的应用,具体为提取待检测品种鸡基因组dna,以待检测品种鸡基因组dna为模版,通过引物对seq id no.1/seq id no.2进行pcr扩增,得到pcr扩增产物,sanger测序检测扩增序列的第206bp处的snp位点的基因型,当该位置碱基为g时,为ab系公鸡;当该位置碱基为a时,为cd系公鸡。

15、在一种具体的实施方式中,

16、本专利技术所述应用中,提取待测鸡肉中的基因组dna,可以按照本领域的常规方法,提取所用样本可以为常用的样本,例如血液、鸡肉、羽毛、组织、口腔拭子等均可。

17、在一种具体的实施方式中,本专利技术所述应用中,

18、pcr扩增的反应体系为:2×pcr mix(南京诺唯赞生物有限公司)25μl,10μmol/l正反向引物各1μl,50-100μg/ml模板dna 2μl,超纯水21μl。

19、在一种具体的实施方式中,本专利技术所述应用中,pcr扩增的反应程序为:95℃5min,(95℃30s,58℃30s,72℃60s)35循环,72℃10min。

20、本专利技术sanger测序可以按照本领域的常规方法,例如反应结束后,pcr产物在abi3730测序仪进行sanger测序,并进行序列比对。

21、本专利技术待检测的白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡可以通过扩增序列扩增出一条388bp的序列(seq id no.3或seq id no.4),确定388bp的序列第206bp处的snp位点的基因型,当该位置碱基为g时,为ab系公鸡(seq id no.3);当该位置碱基为a时,为cd系公鸡(seqid no.4)。

22、有益效果:

23、本专利技术利用鸡基因组序列的差异鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡,优点在于能够快速、准确鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡,打击以次充好的不良商家。并且该法操作简单、易于实验室操作、便于基层推广和使用,具有广阔的市场应用前景,此外,基于本专利技术方法开发的检测试剂盒,可产生可观的经济效益和良好的社会价值。

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【技术保护点】

1.一种鉴别白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡分子标记,所述分子标记为位于鸡基因组16号染色体76216bp处的SNP位点,其存在G/A多态性,当该位置碱基为G时,为AB系公鸡;当该位置碱基为A时,为CD系公鸡。

2.一种鉴别白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡的分子标记的引物对。

3.根据权利要求2所述的引物对,其特征在于所述引物对如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示。

4.含有权利要求2或3所述引物对的用于鉴别白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡基因型的试剂盒。

5.权利要求1所述的分子标记、权利要求2或3所述引物对或权利要求4所述试剂盒在鉴别或选育白羽肉鸡配套系中AB和CD系公鸡中的应用,具体为提取待检测品种鸡基因组DNA,以待检测品种鸡基因组DNA为模版,通过引物对SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2进行PCR扩增,得到PCR扩增产物,sanger测序检测扩增序列的第206bp处的SNP位点的基因型,当该位置碱基为G时,为AB系公鸡;当该位置碱基为A时,为CD系公鸡。

6.权利要求1所述的分子标记、权利要求2或3所述引物对或权利要求4所述试剂盒在筛选或辅助筛选AB系公鸡中的应用,具体为提取待检测品种鸡基因组DNA,以待检测品种鸡基因组DNA为模版,通过引物对SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2进行PCR扩增,得到PCR扩增产物,sanger测序检测扩增序列的第206bp处的SNP位点的基因型,当该位置碱基为G时,为AB系公鸡;当该位置碱基为A时,为CD系公鸡。

7.权利要求1所述的分子标记、权利要求2或3所述引物对或权利要求4所述试剂盒在筛选或辅助筛选CD系公鸡中的应用,具体为提取待检测品种鸡基因组DNA,以待检测品种鸡基因组DNA为模版,通过引物对SEQ ID NO.1/SEQ ID NO.2进行PCR扩增,得到PCR扩增产物,sanger测序检测扩增序列的第206bp处的SNP位点的基因型,当该位置碱基为G时,为AB系公鸡;当该位置碱基为A时,为CD系公鸡。

8.根据权利要求5~7任一项所述的应用,其特征在于,提取待测鸡肉中的基因组DNA的样本为血液、鸡肉、羽毛、组织或口腔拭子。

9.根据权利要求5~7任一项所述的应用,其特征在于,PCR扩增的反应体系为:2×PCRMix(南京诺唯赞生物有限公司)25μL,10μmol/L正反向引物各1μL,50-100μg/ml模板DNA2μL,超纯水21μL。

10.根据权利要求5~7任一项所述的应用,其特征在于,PCR扩增的反应程序为:95℃5min,(95℃30s,58℃30s,72℃60s)35循环,72℃10min。

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【技术特征摘要】

1.一种鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡分子标记,所述分子标记为位于鸡基因组16号染色体76216bp处的snp位点,其存在g/a多态性,当该位置碱基为g时,为ab系公鸡;当该位置碱基为a时,为cd系公鸡。

2.一种鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡的分子标记的引物对。

3.根据权利要求2所述的引物对,其特征在于所述引物对如seq id no.1和seq idno.2所示。

4.含有权利要求2或3所述引物对的用于鉴别白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡基因型的试剂盒。

5.权利要求1所述的分子标记、权利要求2或3所述引物对或权利要求4所述试剂盒在鉴别或选育白羽肉鸡配套系中ab和cd系公鸡中的应用,具体为提取待检测品种鸡基因组dna,以待检测品种鸡基因组dna为模版,通过引物对seq id no.1/seq id no.2进行pcr扩增,得到pcr扩增产物,sanger测序检测扩增序列的第206bp处的snp位点的基因型,当该位置碱基为g时,为ab系公鸡;当该位置碱基为a时,为cd系公鸡。

6.权利要求1所述的分子标记、权利要求2或3所述引物对或权利要求4所述试剂盒在筛选或辅助筛选ab系公鸡中的应用,具体为提取待检测品种鸡基因组dna,以待检测品种鸡基因组dna为模版,通过引物对seq id n...

【专利技术属性】
技术研发人员:贾晓旭高玉时陆俊贤唐修君陈皖强周倩樊艳凤唐梦君马尹鹏黄胜海
申请(专利权)人:江苏省家禽科学研究所
类型:发明
国别省市:

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