【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医疗，尤其涉及一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法及应用。
技术介绍
1、多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome，pcos)是一种困扰育龄期女性的代谢性疾病，全球范围内该病的患病率在10％-13％之间。而我国育龄妇女在2020年pcos的患病率接近7.8％。pcos临床以稀发排卵或无排卵、胰岛素抵抗(insulinresistance，ir)、高雄激素血症(hyperandrogenemia，ha)等为主要特征，远期可并发ⅱ型糖尿病、子宫内膜癌、心脑血管疾病等，危害患者的身心健康。pcos的发病机制涉及多种因素，大量研究证实氧化应激在pcos的发病因素中占据重要位置，氧化应激与患者的ha、ir和排卵障碍等有着密切联系。卵巢成纤维细胞的过度增殖以及细胞外基质(ecm)成分的沉积会造成卵巢纤维化，进而引起卵巢功能障碍。有报道显示pcos患者体内tgf-β1和ctgf含量明显高于正常女性，表明pcos常伴有卵巢纤维化的发生。
2、二甲双胍(metformin，met)是一种噻唑烷二酮衍生物，是临床常见的胰岛素增敏剂，许多国家都将其用于治疗型ⅱ糖尿病。此外，met在减轻体重、降低ir和雄激素水平，以及改善排卵功能障碍等方面也发挥着正面作用。然而，长期使用met会出现恶心、呕吐和胃肠道不适等明显副作用。met治疗pcos产生的不良反应促使我们在临床上寻找毒性低、疗效优、不良反应少的潜在药物。
3、生物碱、黄酮、木脂素等天然产物在改善pcos中发挥重要作用。牡荆素(vi
4、因此，本专利技术提供一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法及应用解决上述技术问题。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术提供一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，拟采用经典的来曲唑诱导雌性大鼠制备pcos大鼠模型，通过观察vitexin对pcos大鼠卵巢纤维化的改善作用，探究其作用机制，为利用牡荆素作为临床药物治疗育龄期妇女多囊卵巢综合征提供实验参考依据。
2、本专利技术提供的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法包括步骤：s1、动物造模及分组；s2、监测大鼠动情周期；s3、采集生物样本；s4、检测血清生化指标；s5、检测卵巢组织中纤维化因子的蛋白表达；s6、数据处理与统计学分析。
3、优选的，所述步骤s1具体为：将40只大鼠随机分为control组、pcos组、met组、vitexin-l组及vitexin-h组，每组8只；control组每日灌服1wt％cmc；pcos组每日灌服含来曲唑1mg/kg的1wt％cmc混悬液；met组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+met 265mg/kg的1wt％cmc混悬液；vitexin-l组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+vitexin20mg/kg的1wt％cmc混悬液；vitexin-h组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+vitexin40mg/kg的1wt％cmc混悬液。
4、优选的，所述步骤s1中，造模期间对各组大鼠每3天测量一次体重，并绘制各组大鼠增长曲线。
5、优选的，所述步骤s2具体为：从造模的第17天起，每日同一时间对各组大鼠进行连续10天的阴道涂片检查，以阴道上皮细胞分类染色法观察实验动物的动情周期。
6、优选的，所述步骤s3具体为：在实验第28天，将实验动物禁食12h后，使用2％三溴乙醇(10ml/kg)麻醉大鼠，腹腔静脉取血，并使用高速冷冻离心机在4℃、离心力1000(×g)条件下离心10min制备血清；并拍照记录每只大鼠卵巢及子宫形态，取部分子宫周脂肪及一侧卵巢经10％(v/v)福尔马林溶液固定，he染色和masson’s染色卵巢后观察各组大鼠卵巢组织病理学变化。
7、优选的，所述步骤s4具体为：取上述制备的血清，按照相应的elisa试剂盒说明书操作，检测大鼠血清中性激素e2、t、fsh、lh含量，并计算lh/fsh比值；检测血清中脂质代谢因子tg、tc、ldl-c、hdl-c水平；检测血清中氧化应激因子mda、sod、cat、gpx的水平。
8、优选的，所述步骤s5具体为：取蛋白质样品分别加入6％、12％sds-page凝胶中进行电泳分离，样品的浓缩压为80v，分离压为120v；电泳结束将蛋白转至聚偏二氟乙烯氟(pvdf)膜，冰浴，250ma恒流转膜90min，5％脱脂牛奶封闭2h；将pvdf膜分别孵育于一抗collagenⅰ、α-sma、ctgf、gapdh中4℃过夜；第2天于室温下孵育二抗1h，使用化学成像仪显影；采用image j软件对目标条带进行灰度分析。
9、优选的，所述步骤s6具体为：实验数据采用spss26.0统计软件进行分析，结果以均值(means)±标准差(sd)，使用单因素方差分析(anova)进行多组间比较，组间两两比较采用最小显著性差异法(least significant difference，lsd)进行显著性差异检验，方差齐性采用tamhane’t2法检验，p＜0.05有统计学意义；使用graphpad prism9.5进行绘图。
10、一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法在治疗育龄期妇女多囊卵巢综合征方面的应用。
11、与相关技术相比较，本专利技术提供的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法及应用具有如下有益效果：
12、本专利技术提供一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法及应用：
13、本专利技术提供的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的研究方法，能够显著改善pcos大鼠的体重、动情周期、卵巢病理变化等指标，调节性激素水平和脂代谢水平，降低氧化应激水平，从而减轻pcos的症状，提高患者的生活质量；该方法具有操作简便、成本低廉、疗效显著等优点，为pcos的临床药物防治提供了新的思路，为利用牡荆素作为临床药物治疗育龄期妇女多囊卵巢综合征实验参考依据。
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1.一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，包括步骤：
2.根据权利要求1所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤S1具体为：将40只大鼠随机分为Control组、PCOS组、Met组、Vitexin-L组及Vitexin-H组，每组8只；Control组每日灌服1wt％CMC；PCOS组每日灌服含来曲唑1mg/kg的1wt％CMC混悬液；Met组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+Met 265mg/kg的1wt％CMC混悬液；Vitexin-L组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+Vitexin20mg/kg的1wt％CMC混悬液；Vitexin-H组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+Vitexin40mg/kg的1wt％CMC混悬液。
3.根据权利要求2所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤S1中，造模期间对各组大鼠每3天测量一次体重，并绘制各组大鼠增长曲线。
4.根据权利要求1所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤S2具体为：从造模的第17天起，每日同一时间对
5.根据权利要求1所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤S3具体为：在实验第28天，将实验动物禁食12h后，使用2％三溴乙醇麻醉大鼠，腹腔静脉取血，并使用高速冷冻离心机离心10min制备血清；并拍照记录每只大鼠卵巢及子宫形态，取部分子宫周脂肪及一侧卵巢经10％(V/V)福尔马林溶液固定，HE染色和Masson’s染色卵巢后观察各组大鼠卵巢组织病理学变化。
6.根据权利要求5所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤S4具体为：取上述制备的血清，按照相应的ELISA试剂盒说明书操作，检测大鼠血清中性激素E2、T、FSH、LH含量，并计算LH/FSH比值；检测血清中脂质代谢因子TG、TC、LDL-C、HDL-C水平；检测血清中氧化应激因子MDA、SOD、Cat、GPx的水平。
7.根据权利要求1所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤S5具体为：
8.根据权利要求1所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤S6具体为：
9.一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的应用，其特征在于，通过上述权利要求1-9任一项所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，探究在治疗育龄期妇女多囊卵巢综合征方面的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，包括步骤：
2.根据权利要求1所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤s1具体为：将40只大鼠随机分为control组、pcos组、met组、vitexin-l组及vitexin-h组，每组8只；control组每日灌服1wt％cmc；pcos组每日灌服含来曲唑1mg/kg的1wt％cmc混悬液；met组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+met 265mg/kg的1wt％cmc混悬液；vitexin-l组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+vitexin20mg/kg的1wt％cmc混悬液；vitexin-h组每日分别灌服含来曲唑1mg/kg+vitexin40mg/kg的1wt％cmc混悬液。
3.根据权利要求2所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤s1中，造模期间对各组大鼠每3天测量一次体重，并绘制各组大鼠增长曲线。
4.根据权利要求1所述的利用牡荆素治疗多囊卵巢综合征的方法，其特征在于，所述步骤s2具体为：从造模的第17天起，每日同一时间对各组大鼠进行连续10天的阴道涂片检查，以阴道上皮细胞分类染色法观察实验动物的动情周期。
5.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋家乐，宋子纯，闫传智，黄春想，王可盈，周燕园，
申请(专利权)人：桂林医学院，
类型：发明
国别省市：
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