【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法。
技术介绍
1、布拉氏酵母菌(saccharomyces boulardii)作为酿酒酵母菌的亚种，最早从荔枝中分离得到。前期研究表明，布拉氏酵母菌可以促进肠上皮细胞的增殖、成熟以及绒毛增长，维持宿主胃肠道微生态平衡，抗毒止泻，增强非特异性免疫，保护肠道黏膜屏障并稳定肠道内环境，提高人和动物机体对营养物质的消化吸收能力，因此被鉴定为一种益生菌。然而，目前布拉氏酵母菌的胃肠道胁迫耐受机制尚未被研究报道，充分揭示其胃肠道胁迫抗逆机制，并利用生物技术手段增强其胃肠道胁迫耐受性，有利于进一步提高布拉氏酵母菌的应用效率，即在保证高存活率的同时减少外源益生菌的直接摄入量。因此，深入研究布拉氏酵母菌的胃肠道胁迫耐受机制，并探索提高其耐受性的方法，对于进一步提高其在健康管理和疾病治疗中的应用效率具有重要意义。
2、目前，提高益生菌胃肠道胁迫条件下的存活率的方法主要是通过生物活性物质包埋处理、分子生物技术改造等方法，例如利用多糖等物质将益生菌包埋制成胶囊，以提高其被服用后在人体内胃肠道胁迫环境下的存活率。分子生物学技术改造包括通过基因工程手段对益生菌进行改造，例如基因敲除、基因过表达、基因编辑(如crispr-cas9)等，对微生物的定向改造以提高其胁迫抗性，但基因改造后的益生菌仍然存在一定的安全隐患，需要严格的评估才能应用，且改造技术本身存在一定的技术难度和成本。
3、目前利用微生物预处理的方法提高其抵御胃肠道胁迫的生理特性是
技术实现思路
1、针对现有提高布拉氏酵母菌在胃肠道胁迫条件下存活率方法操作过程复杂、成本高、成活率低的技术问题，本专利技术旨在于提供一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法及其采用的预培养液。
2、为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
3、本专利技术提供一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，包括：
4、s1，制备布拉氏酵母菌种子液；
5、s2，将步骤s1布拉氏酵母菌种子液接种至预培养液中预培养，获得预培养后的布拉氏酵母菌；
6、s3，将步骤s2预培养后的布拉氏酵母菌进行体外胁迫处理，胁迫处理后离心收集菌体，获得胁迫条件下存活率高的布拉氏酵母菌；
7、所述预培养液的组成为酵母膏8g/l～12g/l，蛋白胨18g/l～22g/l，葡萄糖18g/l～22g/l，亚油酸18μg/ml～24μg/ml，余量为水，ph为5.8～6.2。
8、所述s1制备布拉氏酵母菌种子液，布拉氏酵母菌按照体积百分比4％～6％添加，30℃培养12h。
9、所述s1制备布拉氏酵母菌种子液，培养基组成为：10g/l酵母膏，20g/l蛋白胨，20g/l葡萄糖，ph为6.0。
10、所述步骤s2布拉氏酵母菌种子液按照体积百分比4％～6％接种量接种，预培养条件为30℃培养12h。
11、所述步骤s3体外胁迫处理，预培养后的布拉氏酵母菌按照体积百分比4％～6％添加，胁迫处理为：人工胃液处理后进行人工肠液处理。
12、所述人工胃液中胃蛋白酶10g/l，ph为2.5；人工胃液培养条件为37℃处理1h。
13、所述人工肠液组成为：胰蛋白酶10g/l，猪胆盐3g/l，kh2po413.6g/l，ph为6.8；人工肠液培养条件为37℃处理2h。
14、本专利技术提供一种上述预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法采用的预培养液，所述预培养液的组成为酵母膏8g/l～12g/l，蛋白胨18g/l～22g/l，葡萄糖18g/l～22g/l，亚油酸18μg/ml～24μg/ml，余量为水，ph为5.8～6.2。
15、所述预培养液的组成为酵母膏10g/l，蛋白胨20g/l，葡萄糖20g/l，亚油酸20μg/ml，余量为水，ph为6.0。
16、上述预培养液在提高肠道益生菌胁迫条件下存活率中的应用。
17、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
18、本专利技术提供的一种提高布拉氏酵母菌胁迫条件下存活率的方法，通过在外源添加亚油酸的预养液中对布拉氏酵母菌进行预培养处理，有利于其快速繁殖和生长，从而增加布拉氏酵母菌的生物量，能够显著提高布拉氏酵母菌在模拟的胃肠道胁迫环境中的存活率，本专利技术提供的方法简单易行，只需要在接种至胁迫条件前对布拉氏酵母菌进行预培养处理即可，成本低，易于大规模应用，对于拓展布拉氏酵母菌作为益生菌在食品、医药等领域的应用具有重要意义。
19、本专利技术提供的预培养液，为布拉氏酵母菌提供了一个理想的生长环境，有助于布拉氏酵母菌在胁迫条件下更好地存活和生长，亚油酸在预培养过程中被布拉氏酵母菌吸收利用，参与细胞膜的构建，使细胞膜脂肪酸组成比例发生变化，不饱和脂肪酸含量显著增加，不仅增强细胞膜的柔韧性，增加细胞膜的流动性和稳定性，同时可促进细胞对营养物质的吸收和转运，从而提高细胞的生长和代谢效率；另外还可增强其自身的抗氧化能力，保护细胞免受氧化应激损害从而适应胃肠道的复杂环境，从而提高布拉氏酵母菌对胃肠道中酸性、酶解等胁迫因素的耐受性，本专利技术为布拉氏酵母菌在益生菌产品中的应用提供了有价值的参考，并为其在预防和治疗胃肠道疾病方面的进一步研究提供了新的思路。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述S1制备布拉氏酵母菌种子液，布拉氏酵母菌按照体积百分比4％～6％添加，30℃培养12h。
3.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述S1制备布拉氏酵母菌种子液，培养基组成为：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖，pH为6.0。
4.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述步骤S2布拉氏酵母菌种子液按照体积百分比4％～6％接种量接种，预培养条件为30℃培养12h。
5.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述步骤S3体外胁迫处理，预培养后的布拉氏酵母菌按照体积百分比4％～6％添加，胁迫处理为：人工胃液处理后进行人工肠液处理。
6.根据权利
7.根据权利要求5所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述人工肠液组成为：胰蛋白酶10g/L，猪胆盐3g/L，KH2PO413.6g/L，pH为6.8；人工肠液培养条件为37℃处理2h。
8.一种实现权利要求1所述预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法的预培养液，其特征在于，所述预培养液的组成为酵母膏8g/L～12g/L，蛋白胨18g/L～22g/L，葡萄糖18g/L～22g/L，亚油酸18μg/mL～24μg/mL，余量为水，pH为5.8～6.2。
9.根据权利要求8所述预培养液，其特征在于，所述预培养液的组成为酵母膏10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，亚油酸20μg/mL，余量为水，pH为6.0。
10.根据权利要求8～9任意一项所述预培养液在提高肠道益生菌胁迫条件下存活率中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述s1制备布拉氏酵母菌种子液，布拉氏酵母菌按照体积百分比4％～6％添加，30℃培养12h。
3.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述s1制备布拉氏酵母菌种子液，培养基组成为：10g/l酵母膏，20g/l蛋白胨，20g/l葡萄糖，ph为6.0。
4.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述步骤s2布拉氏酵母菌种子液按照体积百分比4％～6％接种量接种，预培养条件为30℃培养12h。
5.根据权利要求1所述一种预培养提高布拉氏酵母菌在体外模拟胃肠道胁迫条件下存活率的方法，其特征在于，所述步骤s3体外胁迫处理，预培养后的布拉氏酵母菌按照体积百分比4％～6％添加，胁迫处理为：人工胃液处理后进行人工肠液处理。
6.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：王定康，王友发，王亚楠，彭雯，施琳，张天啸，孙晓敏，许睿洁，车碧众，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。