一种鸡隐性白羽基因的分子鉴定方法技术

技术编号:4314444 阅读:787 留言:1更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属于鸡分子标记制备技术领域。具体涉及鸡隐性白羽基因的分子鉴定方法。建立了一种鸡隐性白羽基因分子鉴定方法,利用鸡隐性白羽控制基因(插入逆转录病毒的TYR基因)和有色羽控制基因TYR基因的核苷酸序列分别设计了引物对1和引物对2,其中引物对1用于检测隐性白羽等位基因,引物对2用于检测有色羽等位基因。方法是:提取待鉴定鸡的基因组DNA,用引物对1和引物对2做PCR扩增;电泳检测扩增产物;根据电泳结果判断鸡的羽色基因型:若只有引物对1扩增出产物,则为隐性白羽纯合子(表型为白羽);若只有引物对2扩增出产物,则是非隐性白羽纯合子(表型可能为有色或白羽);若两对引物均能扩增出产物,则是隐性白羽杂合子(表型可能为有色或白羽)。本发明专利技术为鸡隐性白羽基因型鉴定提供了一种快捷的方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种鸡隐性白羽基因的分子鉴定方法,其特征在于,    (1)根据鸡TYR基因隐性白羽和有色羽的个体中核苷酸序列的差异,分别设计引物对1和引物对2;其中引物对1用于检测鸡隐性白羽等位基因,引物对2用于检测鸡有色羽等位基因;(2)提取待鉴定鸡的基因组DNA,用引物对1和引物对2分别进行PCR扩增,分别得到如序列表SEQ  ID  NO:1和序列表SEQID  NO:2所示的核苷酸序列;    (3)电泳检测步骤(2)PCR扩增的产物,根据电泳图谱中出现条带数及大小判定结果;(4)进行基因型分型;    其中:    步骤(1)所述引物对1的正向引物为5’GTTGCCTCTGGCTCTATT  3’,反向引物为5’TTTCTGTGAGTAAGGGTTG  3’;    所述引物对2的正向引物为5’TTGTTGGAGGCTGGGTAT  3’,反向引物为5’ATGGGCTTGCTTGAGGTA  3’;    步骤(2)所述的PCR扩增步骤如下:    1)检测扩增的产物是否有逆转录病毒基因插入:以引物对1为扩增引物建立20ul体系如下:10×PCR缓冲液,10mM/L的dNTP,25mM/L的MgCl↓[2],2.5U的Tag聚合酶,10umol/L的模板,加适量双蒸水至20ul;反应程序为94℃预变性5min,94℃变性40s,53.3℃退火40s,72℃延伸15s,30个循环,72℃再延伸5min,4℃下保存备用;    2)检测扩增的产物是否是正常的TYR基因:以引物对2为扩增引物;建立20ul反应体系:10×PCR缓冲液,10mM/L的dNTP,25mM/L的MgCl↓[2],2.5U的Tag聚合酶,10umol/L的模板,加适量双蒸水至20ul;反应程序为:94℃预变性5min,94℃变性40s,53℃退火40s,72℃延伸35s,30个循环,72℃再延伸5min,于4℃下保存备用。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:龚炎长彭秀丽李世军俸艳萍杨桓陈忠
申请(专利权)人:华中农业大学
类型:发明
国别省市:83[中国|武汉]

网友询问留言 已有1条评论
  • 来自[山东省泰安市联通] 2014年12月05日 15:14
    白羽安徽卫视综艺节目主持人辽宁沈阳人2003年以全国专业前十名的成绩考入中国传媒大学原北京广播学院播音系2007年本科毕业后进入重庆广播电视集团总台工作先后主持新闻综艺娱乐等多种类型节目2010年获得第二十五届中国电视金鹰奖电视栏目主持人提名奖是该奖项最年轻的入围者2012年获得重庆市十佳播音员主持人称号同年参加安徽广播电视台电视节目主持人大赛一举荣获全国冠军后签约安徽卫视现主持安徽卫视势不可挡等节目
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