【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫治疗和分子免疫学领域；具体公开了一组抗tslp的单克隆抗体及其医药用途。
技术介绍
1、胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin，tslp)主要表达于胸腺、肺、皮肤、肠道和扁桃体的上皮细胞，以及基质细胞和肥大细胞。tslp的受体包括胸腺基质淋巴细胞受体crlf2(tslpr)和il-7rα链，tslp和细胞膜上的tslpr结合后，再与il-7rα结合，三者形成稳定tslp-tslpr-il-7rα的复合物，进而激活jak2和stats信号通路(quentmeier h et al.,(2001)leukemia 15(8):1286-92；monica rimoldi et al.,(2005)nature immunology6(5):507-14)。tslp通过诱导树突状细胞极化，促进辅助性t细胞th2的分化。此外，tslp还能直接激活t细胞受体进而推动t细胞的增殖，促进th2细胞因子的产生。因此，tslp在th2介导的炎症中，起着非常重要的作用(rui he et al.,(2010)annals of the new york academy science 1883:13-24)。相关的疾病包括特应性皮炎(atopic dermatitis,ad)、哮喘、炎性关节炎、湿疹、嗜酸性食管炎和其它过敏性炎症疾病。
2、tslp的表达与特应性皮炎(atopic dermatitis,ad)密切相关。研究显示，tslp在特应性皮炎患者的受损皮肤中明显增加，说明
3、tslp与过敏性气道炎症的发生也有着密切的联系。研究表明，哮喘患者的支气管黏膜中tslp表达量显著升高，并且与疾病的严重程度成正相关。在小鼠气道炎症模型实验中也得到同样的结果。tslpr基因敲除的小鼠，在哮喘模型中，未产生气道炎症，说明阻断tslp/tslpr信号通路能有效抑制炎症的发生。实验表明，tslp阻断型抗体可以抑制il-4、il-5和il-13等细胞因子诱导的哮喘，并可抑制th2细胞因子的释放及其引起的炎症反应(baohua zhou et al.,(2005)nature immunology 6(10):1047-53；sun ying et al.,(2008)the journal of immunology 181(4):2790-8)
4、根据报道，我国的特应性皮炎(ad)患病率不断上升，患者人群涉及各年龄段，且年龄较小发病率越高，1-7岁年龄段儿童特应性皮炎发病率为12.94％，1岁以下儿童发病率高达30.48％。而哮喘方面，全球的哮喘患者至少3亿人，并且每年递增，现有药物不能完全控住病情并且可能有副作用。因此，把tslp作为治疗特应性皮炎和哮喘的重要新靶点，开发新型tslp特异性抗体将有助于病患的治疗和康复，具有广阔的应用前景和重要的社会价值。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术公开了一组抗tslp的单克隆抗体及其医药用途，采用杂交瘤技术获得了tslp单克隆抗体，并成功对其进行了人源化改造。这些抗体在制备应用于阻断或调节tslp水平、以及治疗特应性皮炎和哮喘疾病的相关药物方面有巨大的应用前景。
2、本专利技术的技术方案如下：
3、一组抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段，包括重链和轻链，所述重链的cdr1的氨基酸序列为seq id no：9、15、21、27中的一种；所述重链的cdr2的氨基酸序列为seq idno：10、16、22、28中的一种；所述重链的cdr3的氨基酸序列为seq id no：11、17、23、29中的一种；所述轻链的cdr1的氨基酸序列为seq id no：12、18、24、30中的一种；所述轻链的cdr2的氨基酸序列为seq id no：13、19、25、31中的一种；所述轻链的cdr3的氨基酸序列为seqid no：14、20、26、32中的一种；其中所述抗原结合片段的重链和轻链包含分别跨越所述抗体的重链和轻链的cdr1到cdr3的氨基酸序列。
4、进一步的，上述一组抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链可变区的氨基酸序列为seq id no：1、3、5、7中的一种；所述轻链可变区的氨基酸序列为seq id no：2、4、6、8中的一种。
5、进一步的，上述一组抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段，所述重链和轻链经过人源化和亲和力成熟；所述人源化后的重链可变区的氨基酸序列为seq id no：33；所述人源化后的轻链可变区的氨基酸序列为seq id no：34；所述亲和力成熟后的重链可变区的氨基酸序列为seq id no：35、36中的一种；所述亲和力成熟后的轻链可变区的氨基酸序列为seq id no：37、38中的一种。
6、进一步的，上述一组抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段在制备如下药物中的用途：阻断tslp与tslp受体结合的药物、调节tslp活性或tslp水平的药物、调节tslp对机体免疫激活的药物或者调节t淋巴细胞的药物。优选的，所述药物为治疗特应性皮炎或哮喘疾病相关药物。
7、一种核酸分子，所述核酸分子编码上述的抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段。
8、一种表达载体，所述表达载体包含上述的核酸分子的序列以及与该序列相关的表达调控序列。
9、一种宿主细胞，含有上述的核酸分子或表达载体。
10、一种单克隆抗体偶联物，包括单克隆抗体和偶联部分，所述单克隆抗体为上述的抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段，所述偶联部分为为放射性核素、药物、毒素、细胞因子、细胞因子受体片段、酶、荧光素、和生物素中的一种或多种。
11、进一步的，上述单克隆抗体偶联物在制备如下药物中的用途：阻断tslp与tslp受体结合的药物、调节tslp活性或tslp水平的药物、调节tslp对机体免疫激活的药物或者调节t淋巴细胞的药物。优选的，所述药物为治疗特应性皮炎或哮喘疾病相关药物。
12、进一步的，表达上述抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段的核酸分子、表达载体、宿主细胞或如在制备如下药物中的用途：阻断tslp与tslp受体结合的药物、调节tslp活性或tslp水平的药物、调节tslp对机体免疫激活的药物或者调节t淋巴细胞的药物。优选的，所述药物为治疗特应性皮炎或哮喘疾病相关药物。
13、相比现有技术，本专利技术具有如下有益效果:
14、本专利技术采用重组tslp作为抗原免疫小鼠，将小鼠脾脏细本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一组抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合片段，包括重链和轻链，其特征在于，所述重链的CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO：9、15、21、27中的一种；所述重链的CDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO：10、16、22、28中的一种；所述重链的CDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO：11、17、23、29中的一种；所述轻链的CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO：12、18、24、30中的一种；所述轻链的CDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO：13、19、25、31中的一种；所述轻链的CDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO：14、20、26、32中的一种；其中所述抗原结合片段的重链和轻链包含分别跨越所述抗体的重链和轻链的CDR1到CDR3的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的一组抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO：1、3、5、7中的一种；所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO：2、4、6、8中的一种。
3.根据权利要求2所述的一组抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合片段，其特
4.如权利要求1-3任一项所述的抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合片段在制备如下药物中的用途，其特征在于，所述药物为阻断TSLP与TSLP受体结合的药物、调节TSLP活性或TSLP水平的药物、调节TSLP对机体免疫激活的药物或者调节T淋巴细胞的药物。
5.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1-3任一项所述的抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合片段。
6.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含如权利要求5所述的核酸分子的序列以及与该序列相关的表达调控序列。
7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有如权利要求6所述的表达载体。
8.一种单克隆抗体偶联物，包括单克隆抗体和偶联部分，其特征在于，所述单克隆抗体为权利要求1-3任一项所述的抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合片段，所述偶联部分为为放射性核素、药物、毒素、细胞因子、细胞因子受体片段、酶、荧光素、和生物素中的一种或多种。
9.如权利要求8所述的单克隆抗体偶联物在制备如下药物中的用途，其特征在于，所述药物为阻断TSLP与TSLP受体结合的药物、调节TSLP活性或TSLP水平的药物、调节TSLP对机体免疫激活的药物或者调节T淋巴细胞的药物。
10.表达如权利要求1-3任一项所述的抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合片段的核酸分子、表达载体、或宿主细胞在制备如下药物中的用途：阻断TSLP与TSLP受体结合的药物、调节TSLP活性或TSLP水平的药物、调节TSLP对机体免疫激活的药物或者调节T淋巴细胞的药物。
...【技术特征摘要】
1.一组抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段，包括重链和轻链，其特征在于，所述重链的cdr1的氨基酸序列为seq id no：9、15、21、27中的一种；所述重链的cdr2的氨基酸序列为seq id no：10、16、22、28中的一种；所述重链的cdr3的氨基酸序列为seq id no：11、17、23、29中的一种；所述轻链的cdr1的氨基酸序列为seq id no：12、18、24、30中的一种；所述轻链的cdr2的氨基酸序列为seq id no：13、19、25、31中的一种；所述轻链的cdr3的氨基酸序列为seq id no：14、20、26、32中的一种；其中所述抗原结合片段的重链和轻链包含分别跨越所述抗体的重链和轻链的cdr1到cdr3的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的一组抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列为seq id no：1、3、5、7中的一种；所述轻链可变区的氨基酸序列为seq id no：2、4、6、8中的一种。
3.根据权利要求2所述的一组抗tslp单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链和轻链经过人源化和亲和力成熟；所述人源化后的重链可变区的氨基酸序列为seq idno：33；所述人源化后的轻链可变区的氨基酸序列为seq id no：34；所述亲和力成熟后的重链可变区的氨基酸序列为seq id no：35、36中的一种；所述亲和力成熟后的轻链可变区的氨基酸序列为seq id no：37、38中的一种。
4.如权...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙键，邱均专，陈均勇，孙锴，李忠良，王振生，区日山，
申请(专利权)人：东大生物技术苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：
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