System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 改善Myo抗体表达的碱基序列及应用制造技术_技高网

改善Myo抗体表达的碱基序列及应用制造技术

技术编号:43099796 阅读:5 留言:0更新日期:2024-10-26 09:44
本发明专利技术提供的一种改善Myo抗体表达的碱基序列,其碱基序列为组合序列,其中包括高效复制起始元件(3391bp‑3977bp)、启动子元件(40bp‑571bp、758bp‑1341bp)、polyA转录终止序列(680bp‑740bp、1431bp‑1486bp)、抗性筛选标记基因(2121bp‑2914bp)等元件。上述元件优化了序列GC含量,并按照哺乳动物细胞密码子偏好性设计序列,去除了序列中不利于转录的二级结构、隐藏的终止密码子及反向重复序列。该序列应用于Myo抗体的表达,解决了Myo商业化载体实际应用中抗体表达量低,纯度差的问题,提高了生产效率的同时降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种改善myo抗体表达的碱基序列及应用。


技术介绍

1、肌红蛋白(myo)是一种氧结合血红素蛋白,具有转运和贮存氧的功能,主要分布于心肌和骨骼肌中。在急性心肌损伤时,myo首先被释放入血液中,通常2-3小时后,浓度就会超过正常上限。因此,可以作为急性心肌损伤早期诊断标志物。

2、myo抗体能够特异性识别样本中的myo蛋白,可以应用于elisa、wb、免疫组化等针对myo蛋白检测的技术中。在实际应用中,采用商业化载体表达的myo抗体存在表达量低、纯度差的问题,严重影响了其实际应用。


技术实现思路

1、本专利技术提供了一种改善myo抗体表达的碱基序列及应用,可以有效解决上述问题。

2、本专利技术是这样实现的:

3、本专利技术提供一种改善myo抗体表达的碱基序列,其碱基序列如seqidno:1所示。

4、作为进一步改进的,所述的改善myo抗体表达的碱基序列,还包括myo抗体的重链和轻链序列,所述重链序列和轻链序列的碱基序列分别如seq id no: 2seq id no:3所示,所述重链序列和轻链序列分别插入到所述改善myo抗体表达的碱基序列的624bp-655bp和1355bp-1396bp位置。

5、本专利技术进一步提供一种表达载体,将上述的改善myo抗体表达的碱基序列克隆入表达载体得到。

6、本专利技术进一步提供一种重组工程细胞株,为将上述的表达载体转化入工程细胞得到。

7、本专利技术进一步提供一种myo抗体的制备方法,包括以下步骤:

8、将上述的重组工程细胞株置于摇床中培养获得细胞培养液;

9、然后将所述细胞培养液进行纯化得到myo抗体。

10、本专利技术进一步提供一种试剂盒,所述的试剂盒含有上述的改善myo抗体表达的碱基序列,或者上述的表达载体,或者上所述的重组工程细胞株。

11、本专利技术的有益效果是:本专利技术提供的上述改善myo抗体表达的碱基序列其为组合序列,包括高效复制起始元件(3391bp-3977bp)、启动子元件(40bp-571bp、758bp-1341bp)、polya转录终止序列(680bp-740bp、1431bp-1486bp)、抗性筛选标记基因(2121bp-2914bp)等元件。上述元件优化了序列gc含量,并按照哺乳动物细胞密码子偏好性设计序列,去除了序列中不利于转录的二级结构、隐藏的终止密码子及反向重复序列。该序列应用于myo抗体的表达,解决了myo商业化载体实际应用中抗体表达量低,纯度差的问题,提高了生产效率的同时降低了生产成本。

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【技术保护点】

1.一种改善Myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,其碱基序列如SEQIDNO:1所示。

2.如权利要求1所述的改善Myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,还包括Myo抗体的重链和轻链序列,所述重链序列和轻链序列的碱基序列分别如SEQ ID NO: 2SEQ ID NO:3所示,所述重链序列和轻链序列分别插入到所述改善Myo抗体表达的碱基序列的624bp-655bp和1355bp-1396bp位置。

3.一种表达载体,其特征在于:将权利要求2所述的改善Myo抗体表达的碱基序列克隆入表达载体得到。

4.一种重组工程细胞株,其特征在于:为将权利要求3所述的表达载体转化入工程细胞得到。

5.一种Myo抗体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

6.一种试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒含有权利要求1或2所述的改善Myo抗体表达的碱基序列,或者权利要求3所述的表达载体,或者如权利要求4所述的重组工程细胞株。

【技术特征摘要】

1.一种改善myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,其碱基序列如seqidno:1所示。

2.如权利要求1所述的改善myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,还包括myo抗体的重链和轻链序列,所述重链序列和轻链序列的碱基序列分别如seq id no: 2seq id no:3所示,所述重链序列和轻链序列分别插入到所述改善myo抗体表达的碱基序列的624bp-655bp和1355bp-1396bp位置。

3.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨志伟张明辉王雅莹黄飞鸿李萌萌李旸欣沈杰鹏张娇黄奋飞杨萍萍周斌章永垒
申请(专利权)人:厦门康基生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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