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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种改善myo抗体表达的碱基序列及应用。
技术介绍
1、肌红蛋白(myo)是一种氧结合血红素蛋白,具有转运和贮存氧的功能,主要分布于心肌和骨骼肌中。在急性心肌损伤时,myo首先被释放入血液中,通常2-3小时后,浓度就会超过正常上限。因此,可以作为急性心肌损伤早期诊断标志物。
2、myo抗体能够特异性识别样本中的myo蛋白,可以应用于elisa、wb、免疫组化等针对myo蛋白检测的技术中。在实际应用中,采用商业化载体表达的myo抗体存在表达量低、纯度差的问题,严重影响了其实际应用。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种改善myo抗体表达的碱基序列及应用,可以有效解决上述问题。
2、本专利技术是这样实现的:
3、本专利技术提供一种改善myo抗体表达的碱基序列,其碱基序列如seqidno:1所示。
4、作为进一步改进的,所述的改善myo抗体表达的碱基序列,还包括myo抗体的重链和轻链序列,所述重链序列和轻链序列的碱基序列分别如seq id no: 2seq id no:3所示,所述重链序列和轻链序列分别插入到所述改善myo抗体表达的碱基序列的624bp-655bp和1355bp-1396bp位置。
5、本专利技术进一步提供一种表达载体,将上述的改善myo抗体表达的碱基序列克隆入表达载体得到。
6、本专利技术进一步提供一种重组工程细胞株,为将上述的表达载体转化入工程细胞得到。
7、本专利技术
8、将上述的重组工程细胞株置于摇床中培养获得细胞培养液;
9、然后将所述细胞培养液进行纯化得到myo抗体。
10、本专利技术进一步提供一种试剂盒,所述的试剂盒含有上述的改善myo抗体表达的碱基序列,或者上述的表达载体,或者上所述的重组工程细胞株。
11、本专利技术的有益效果是:本专利技术提供的上述改善myo抗体表达的碱基序列其为组合序列,包括高效复制起始元件(3391bp-3977bp)、启动子元件(40bp-571bp、758bp-1341bp)、polya转录终止序列(680bp-740bp、1431bp-1486bp)、抗性筛选标记基因(2121bp-2914bp)等元件。上述元件优化了序列gc含量,并按照哺乳动物细胞密码子偏好性设计序列,去除了序列中不利于转录的二级结构、隐藏的终止密码子及反向重复序列。该序列应用于myo抗体的表达,解决了myo商业化载体实际应用中抗体表达量低,纯度差的问题,提高了生产效率的同时降低了生产成本。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种改善Myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,其碱基序列如SEQIDNO:1所示。
2.如权利要求1所述的改善Myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,还包括Myo抗体的重链和轻链序列,所述重链序列和轻链序列的碱基序列分别如SEQ ID NO: 2SEQ ID NO:3所示,所述重链序列和轻链序列分别插入到所述改善Myo抗体表达的碱基序列的624bp-655bp和1355bp-1396bp位置。
3.一种表达载体,其特征在于:将权利要求2所述的改善Myo抗体表达的碱基序列克隆入表达载体得到。
4.一种重组工程细胞株,其特征在于:为将权利要求3所述的表达载体转化入工程细胞得到。
5.一种Myo抗体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
6.一种试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒含有权利要求1或2所述的改善Myo抗体表达的碱基序列,或者权利要求3所述的表达载体,或者如权利要求4所述的重组工程细胞株。
【技术特征摘要】
1.一种改善myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,其碱基序列如seqidno:1所示。
2.如权利要求1所述的改善myo抗体表达的碱基序列,其特征在于,还包括myo抗体的重链和轻链序列,所述重链序列和轻链序列的碱基序列分别如seq id no: 2seq id no:3所示,所述重链序列和轻链序列分别插入到所述改善myo抗体表达的碱基序列的624bp-655bp和1355bp-1396bp位置。
3.一种...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨志伟,张明辉,王雅莹,黄飞鸿,李萌萌,李旸欣,沈杰鹏,张娇,黄奋飞,杨萍萍,周斌,章永垒,
申请(专利权)人:厦门康基生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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