【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境污染治理，具体涉及一种脱氮除磷菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
1、传统的生物脱氮除磷过程是通过硝化菌、反硝化菌以及聚磷菌共同存在下实现的。传统生物脱氮是分别在自养硝化菌和厌氧反硝化菌的作用下实现氨氮氧化为亚硝酸盐或硝酸盐，再被还原为气态含氮产物，实现废水脱氮。传统生物除磷是利用聚磷菌在缺氧条件下向胞外释磷，再在有氧条件下吸收磷从而实现除磷的。由于不同过程中微生物的供氧条件不同，需要交替提供厌氧和好氧条件，增加了污水处理过程的操作复杂程度。因此存在一定程度的矛盾和竞争，使得生物脱氮除磷在实际应用过程中经常出现脱氮和除磷效果不能同时达到最佳的现象，从而影响脱除效果。
2、近年来，异养硝化-好氧反硝化聚磷菌的发现引起越来越多的关注。该类菌可以在单一好氧、异养条件下同时去除污水中的氮磷，克服了传统工艺的主要缺点，同时还能够去除一定量的含碳有机污染物。然而，在实际应用中，某些污水中磷的负荷可能超过脱氮除磷菌的除磷负荷，进而造成污水除磷不彻底。
3、cn201610007503.0公开了一株异养硝化-好氧反硝化并聚磷的不动杆菌及其在废水除氮磷中的应用，该菌株为不动杆菌(acinetobactersp.)wzuf26，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.9045。该菌株去除氮磷污水的氮磷的适宜温度为15-30℃，有比较广的温度适应范围；在适宜条件下，该菌株对人工氮磷污水的nh4+-n、no3--n、no2--n和p的去除速率分别为8.16mg/(l·h)、
4、cn202010549908.3公开了一种强化污水脱氮除磷的复合菌剂及其应用。所述复合菌剂包含以下重量份数的原料：不动杆菌40～60份、芽孢杆菌20～30份、生物膜5～15份、铁屑5～25份。相对于目前的脱氮除磷技术，该微生物菌剂能够通过生物膜与铁屑协同强化实现微生物对污水高效的脱氮除磷。但该方法是通过物理、化学和生物的多重作用协同强化污水脱氮除磷效果，铁屑的长期引入会造成水中金属离子的积累。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种脱氮除磷菌剂及其制备方法和应用。本专利技术提供的菌剂能够在同一条件下高效去除污水中总氮和总磷，长期使用不会造成二次污染。
2、本专利技术第一方面提供了一种脱氮除磷菌剂，该菌剂包括皮特不动杆菌(acinetobacter pittii)pa6和铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)，其中皮特不动杆菌(acinetobacter pittii)pa6的保藏编号为cgmcc no.25181。
3、本专利技术中，铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)采用模式菌株，保藏编号为cgmcc 1.1785，购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
4、本专利技术中，皮特不动杆菌(acinetobacter pittii)pa6已于2022年06月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.25181，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。主要形态特征为：在tsa培养基培养，37℃培养18h后，菌落黄色，圆形，表面湿润，不透明，边缘整齐。在显微镜下菌体呈杆状，0.3-0.5μm×0.4-1.0μm，单个或成对排列，革兰氏阴性。
5、本专利技术菌剂中，优选的，皮特不动杆菌(acinetobacter pittii)pa6和铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)按菌体质量比为1-10:1，优选为1-3:1混合。
6、本专利技术第二方面提供了一种脱氮除磷菌剂的制备方法，包括以下内容：将皮特不动杆菌(acinetobacter pittii)pa6和铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)分别接种于lb固体培养基上进行活化培养；活化后用接菌环取平板上的菌落分别接种于lb液体培养基中，好氧培养至od660为0.8以上，优选为1.0-1.2，获得液体菌液；收集菌体后重悬，使菌悬液的od660为1.5-2.0，再按所需比例混合，即为脱氮除磷菌剂。
7、本专利技术菌剂制备方法中，所述的lb液体培养基配方为：nacl5-15g/l，蛋白胨5-15g/l，酵母浸粉3-8g/l。固体培养基是在液体培养基中加入1％-2％的琼脂。
8、本专利技术菌剂制备方法中，活化培养条件为：温度为25-30℃，培养时间为12-48h。
9、本专利技术菌剂制备方法中，好氧培养条件为：ph值为6-9，温度为25-30℃，溶解氧浓度为0.5-2.0mg/l。
10、本专利技术菌剂制备方法中，可以采用过滤、离心等方式收集菌体。
11、本专利技术菌剂制备方法中，重悬可以采用培养液、生理盐水等，优选采用生理盐水。
12、本专利技术菌剂制备方法中，两种菌重悬后的菌悬液按照质量比为1-10:1，优选为1-3:1混合。
13、本专利技术第三方面提供了上述脱氮除磷菌剂的应用，用于废水的同时脱氮除磷。
14、本专利技术应用中，用于含有氨氮、硝氮/亚硝氮、磷酸盐、cod废水或污水的处理，所处理废水中总氮(氨氮、硝氮、亚硝氮的总和)浓度不高于300mg/l，优选50-200mg/l，总磷浓度不高于30mg/l，优选为10-30mg/l，cod浓度不高于4000mg/l。
15、本专利技术应用中，菌剂投加量以质量分数计为0.1％-1％，优选0.2％-0.6％。
16、本专利技术应用中，脱氮除磷时最好投加一定量碳源，碳源可以是乙酸钠、乳酸钠、柠檬酸钠、丁二酸钠等中的至少一种，按照cod/tn比为10:1-30:1，优选15:1-20:1进行投加。
17、本专利技术应用中，废水的处理条件一般为：温度为15～35℃，ph为6-9，溶解氧浓度为0.5-2.0mg/l。
18、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
19、(1)本专利技术菌剂通过皮特不动杆菌(acinetobacter pittii)pa6和铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)的协同配合，在好氧、异养条件下能够实现总氮、总磷的同时高效去除。脱除效果明显优于单一菌单独使用效果。
20、(2)本专利技术菌剂配方简单，制备过程简单，无二次污染。
21、(3)本专利技术菌剂可以直接作为接种物用于处理含氮含磷废水，解决了脱氮除磷过程中硝化菌、反硝化菌和聚磷菌的竞争和不利影响。
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1.一种脱氮除磷菌剂，其特征在于：该菌剂包括皮特不动杆菌（Acinetobacter pittii）PA6和铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），其中皮特不动杆菌（Acinetobacter pittii）PA6的保藏编号为CGMCC No. 25181。
2.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于：皮特不动杆菌（Acinetobacter pittii）PA6已于2022年06月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 25181，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；主要形态特征为：在 TSA培养基培养，37℃培养18h后，菌落黄色，圆形，表面湿润，不透明，边缘整齐；在显微镜下菌体呈杆状，0.3-0.5μm×0.4-1.0μm，单个或成对排列，革兰氏阴性。
3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于：铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）采用模式菌株，保藏编号CGMCC 1.1785，购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
<...【技术特征摘要】
1.一种脱氮除磷菌剂，其特征在于：该菌剂包括皮特不动杆菌（acinetobacter pittii）pa6和铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa），其中皮特不动杆菌（acinetobacter pittii）pa6的保藏编号为cgmcc no. 25181。
2.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于：皮特不动杆菌（acinetobacter pittii）pa6已于2022年06月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 25181，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；主要形态特征为：在 tsa培养基培养，37℃培养18h后，菌落黄色，圆形，表面湿润，不透明，边缘整齐；在显微镜下菌体呈杆状，0.3-0.5μm×0.4-1.0μm，单个或成对排列，革兰氏阴性。
3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于：铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa）采用模式菌株，保藏编号cgmcc 1.1785，购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
4.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于：菌剂中皮特不动杆菌（acinetobacter pittii）pa6和铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa）按菌体质量比为1-10:1，优选为1-3:1混合。
5.一种权利要求1-4任意一项所述脱氮除磷菌剂的制备方法，其特征在于包括以下内容：将皮特不动杆菌（acinetobacter pittii）pa6和铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa）分别接种于lb固体培养基上进行活化培养；活化后用接菌环取平板上的菌落分别接种于lb液体培养基中，好氧培养至od660为0.8以上，优选为1.0-1.2，获得液体菌液；收集菌体后重悬，使菌悬液的od660为1.5-2...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈明翔，孙丹凤，王刚，高会杰，
申请(专利权)人：中国石油化工股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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