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【技术实现步骤摘要】
:本专利技术涉及食源性致病菌的检测,尤其涉及副溶血弧菌的选择性增菌鉴别培养基及其制备方法。
技术介绍
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技术介绍
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1、食品安全问题是全社会共同关注的问题。由食源性致病菌引发的食品安全问题属于严重的公共安全问题,与人类健康密切相关。副溶血弧菌(vibrio parahaemolyticus)是我国首要的食源性致病菌,其主要分布在沿海和海洋水域等富盐的环境中。人们如果食用了被副溶血弧菌污染的未煮熟的食物会引起食物中毒,其发病潜伏期一般为1~4天,导致胃肠炎反应,如腹部绞痛、腹泻、恶心、呕吐、发烧等症状,严重者甚至会威胁生命。由于副溶血弧菌对人类的健康安全和财产安全造成了严重的损害和威胁。在我国,副溶血弧菌已被列为海产品安全卫生检测监控的主要项目,尤其是鱼虾类和贝壳类海产品。
2、目前对于副溶血弧菌检测方法主要有tcbs培养基,血清学实验,3%氯化钠三糖铁琼脂,神奈川实验等常规国标培养与鉴定方法,但该分离培养鉴定法操作复杂,检测灵敏度低,只能检测活菌,且检测周期长,一般需要一周左右,无法满足副溶血弧菌快速、灵敏的检测要求。近年来,基因检测技术应用广泛,该技术检测精准度很高,但需要专业人士的操作,而目前在食品安全管理方面还没有健全的制度体系保证操作人员的专业性;pcr检测方法也存在着操作复杂、需要预处理及假阳性等缺点;分子生物学方法、蛋白免疫方法等几大类仪器分析检测手段几乎都已经可以实现各类样品的定性检验,但是以质谱色谱技术为基础的检验技术仪器成本相对较高,生物传感器类检验方法在灵敏度方面略显不足,要满足这类
技术实现思路
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1、为了解决上述技术问题,本专利技术提出了一种副溶血弧菌的选择性鉴别增菌培养基及其制备方法。本专利技术的培养基能够在对目标菌进行增菌的同时抑制非目标菌的生长,且该专利技术的培养基制备方法简单,培养与检测副溶血弧菌的操作简单,特异性好,灵敏度高。
2、本专利技术的具体技术方案为:一种副溶血弧菌的选择性增菌鉴别培养基及制备方法,按重量份数计包括如下组分:
3、酵母浸粉2-10份,胰蛋白胨2-10份,牛胆粉4-7份,葡萄糖1-7份,显色剂0.03-0.06份,氯化钠20-50份,氨苄青霉素0.001-0.01份,去离子水或超纯水1000份。
4、在本专利技术中,以副溶血弧菌为目标菌,酵母浸粉、蛋白胨、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠作为基础培养基为细菌提供碳源、氮源、无机盐等,牛胆粉、牛胆酸钠作为抑制剂,抑制除目标菌以外的各种细菌,如大肠杆菌、沙门氏菌等等。
5、作为优选,按重量份数计,所述选择性培养基的组分为:
6、酵母浸粉3份,胰蛋白胨10份,牛胆粉4份,葡萄糖3份,显色剂0.05份,氯化钠35份,氨苄青霉素0.007份,去离子水或超纯水1000份。
7、一种副溶血弧菌选择性增菌鉴别培养基的制备方法,包括如下步骤:
8、称取酵母浸粉2-10份,胰蛋白胨2-10份,牛胆粉4-7份,葡萄糖1-7份,显色剂0.03-0.06份,氯化钠20-50份,先后加入到1000份离子水或超纯水中,混合均匀后用1mol/l的氢氧化钠溶液将所得混合物ph调节至8.6,加热煮沸3次灭菌,获得半成品培养基。
9、然后等待成品培养基冷却至室温,在无菌环境下加入0.001-0.01份氨苄青霉素,。混合均匀后制得成品培养基,放在4℃冰箱避光备用。使用时在无菌环境下加入待检测样品后放入37℃恒温培养箱培养12-24h观察其颜色变化情况即可。
10、与现有技术对比,本专利技术的增菌与鉴定方法操作简单,特异性好,灵敏度高。
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1.一种副溶血弧菌的选择性增菌鉴别培养基,其特征在于按重量份数计包括如下组分:
2.如权利要求1所述的副溶血弧菌选择性增菌鉴别培养基,其特征在于按重量份数计,所述选择性培养基的组分为:
3.如权利要求1所述的副溶血弧菌选择性增菌鉴别培养基,其特征在于通过检测在生长过程中由于代谢作用导致发生的颜色变化以检测副溶血弧菌。
4.如权利要求1所述的副溶血弧菌选择性增菌鉴别培养基,其特征在于pH值为8.5-8.7。
5.如权利要求1所述的副溶血弧菌选择性增菌鉴别培养基的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
6.权利要求1-5中的任一项成分用于分离和鉴定副溶血弧菌的体外用途。
【技术特征摘要】
1.一种副溶血弧菌的选择性增菌鉴别培养基,其特征在于按重量份数计包括如下组分:
2.如权利要求1所述的副溶血弧菌选择性增菌鉴别培养基,其特征在于按重量份数计,所述选择性培养基的组分为:
3.如权利要求1所述的副溶血弧菌选择性增菌鉴别培养基,其特征在于通过检测在生长过程中由于代谢作用导致发生...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨辉,崔倩,王可陵,王嘉文,朱海鹏,
申请(专利权)人:海南微氪生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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