【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于化学药物分析检测领域，涉及一种噁拉戈利钠遗传毒性杂质的检测方法，具体涉及一种噁拉戈利钠遗传毒性杂质甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯的检测方法。
技术介绍
1、噁拉戈利钠(英文名称：elagolix，商品名：orilissa)于2018年7月获得美国食品和药物管理局的批准，用于治疗因子宫内膜异位症导致的疼痛。噁拉戈利钠是一种口服促性腺激素释放激素(gnrh)拮抗剂，通过与垂体腺中的gnrh受体竞争性结合来抑制内源性gnrh信号传导。
2、在制备噁拉戈利钠过程中，需用到甲磺酸及甲磺酰氯，图1为中间体以及降解产物流程图。其中，杂质甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯为磺酸酯化物，具有遗传毒性警示结构。
3、甲磺酸甲酯结构式如下：
4、
5、甲磺酸乙酯结构式如下：
6、
7、按icch m7和中国药典2020年版四部通则9101遗传毒性杂质控制指导原则，按ttc1.5μg/天计算，杂质甲磺酸甲/乙酯限度为3.75ppm。需对噁拉戈利钠中甲磺酸甲/乙酯进行检测，以期达到标准要求。
8、遗传毒性杂质限度较低，大多使用lc-ms或gc-ms检测遗传毒性杂质。由于lc-ms或gc-ms仪器较为昂贵，故开发常规气相色谱方法检测遗传毒性杂质更具有实用性。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种基于气相色谱法高灵敏度检测噁拉戈利钠遗传毒性杂质的方法，并且该检测方法经验证均符合标准。
2、甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯无法
3、专利技术人配制供试品溶液和对照品溶液，对气相色谱检测条件进行了筛选。
4、供试品溶液：取噁拉戈利钠样品200mg，精密称定，置于顶空瓶中，精密加入2ml n,n-二甲基甲酰胺，再加入6g碘化钠及3ml水，密封，振摇使溶解。
5、对照品溶液：取甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯各适量，精密称定，加n,n-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml约含甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯各0.375μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入6g碘化钠及3ml水，密封，摇匀。
6、先筛选气相色谱柱，使用hp-innowax毛细管色谱柱(内径0.53mm，长度30m，膜厚1.0μm)，起始柱温为50℃，维持6分钟，以每分钟20℃的速率升温至220℃，维持8分钟；进样口温度为180℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟。
7、对照品溶液与供试品溶液的图谱见图2，可见供试品溶液中噁拉戈利钠及其他杂质干扰甲磺酸乙酯出峰。
8、调整前述气相色谱检测条件的起始柱温为40℃，无法使其他杂质峰与甲磺酸乙酯分离。
9、将hp-innowax毛细管色谱柱更换为db-624毛细管柱(长度60m，内径0.32mm，膜厚1.8μm)，起始柱温为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至220℃，维持8分钟；进样口温度为180℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟。对照品溶液与供试品溶液的图谱见图3，可见其他杂质峰与甲磺酸乙酯分离度符合要求，不干扰甲磺酸甲酯/乙酯检测。
10、因此，专利技术人选择db-624气相色谱柱，进一步筛选顶空平衡温度。
11、顶空平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟，起始柱温为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至220℃，维持8分钟；进样口温度为180℃；检测器温度为250℃；加标供试品溶液，甲磺酸甲酯回收率为59.8％，甲磺酸乙酯回收率为66.6％，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯的回收率均不在75％～120％范围内。
12、调整顶空平衡温度为60℃，平衡时间为30分钟，起始柱温为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至220℃，维持8分钟；进样口温度为180℃；检测器温度为250℃对照品溶液与加标供试品溶液图谱见图4，甲磺酸甲酯回收率为104.8％，甲磺酸乙酯回收率为96.8％，甲磺酸甲酯和甲磺酸乙酯的回收率均在75％～120％范围内，符合要求。
13、最终筛选出的最优气相色谱检测条件：气相色谱条件：色谱柱：以6％氰丙基苯-94％二甲基硅氧烷为固定相的毛细管柱(db-624毛细管柱，长度60m，内径0.32mm，膜厚度1.8μm)；起始柱温为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至220℃，维持8分钟；进样口温度为180℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为60℃，平衡时间为30分钟。
14、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
15、一种噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，该方法为通过气相色谱法检测噁拉戈利钠中遗传毒性杂质甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯的含量；包括：分别配制甲磺酸甲酯对照品溶液、甲磺酸乙酯对照品溶液、供试品溶液；分别精密量取供试品溶液和甲磺酸甲酯对照品溶液、甲磺酸乙酯对照品溶液，顶空进样，记录色谱图，采用外标法，以峰面积计算供试品溶液中甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯的含量。
16、所述的气相色谱检测条件：色谱柱：以6％氰丙基苯-94％二甲基硅氧烷为固定相的毛细管柱；起始柱温为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至200～220℃，维持8分钟；进样口温度为180～200℃；载气：n2；检测器温度为250～280℃；顶空瓶平衡温度为60℃，平衡时间为30分钟。
17、优选的，色谱柱为db-624毛细管柱(长度60m，内径0.32mm，膜厚度1.8μm)。
18、配制供试品溶液：取噁拉戈利钠样品0.2～0.3g，精密称定，置于顶空瓶中，精密加入2ml n,n-二甲基甲酰胺，再加入5～7g碘化钠及2～3ml水，密封，振摇使溶解。
19、优选的，配制供试品溶液：取噁拉戈利钠样品200mg，精密称定，置于顶空瓶中，精密加入2ml n,n-二甲基甲酰胺，再加入6g碘化钠及3ml水，密封，振摇使溶解。
20、配制甲磺酸甲酯对照品溶液：取甲磺酸甲酯适量，精密称定，加n,n-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml约含甲磺酸甲酯0.3～0.4μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入5～7g碘化钠及2～3ml水，密封，摇匀。
21、优选的，配制甲磺酸甲酯对照品溶液：取甲磺酸甲酯适量，精密称定，加n,n-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml约含甲磺酸甲酯0.375μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入6g碘化钠及3ml水，密封，摇匀。
22、配制甲磺酸乙酯对照品溶液：取甲磺酸乙酯适量，精密称定，加n,n-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml约含甲磺酸乙酯0.3～0.4μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入5～7g碘化钠及2～3ml水，密封，摇匀。
23、优选的，配制甲磺酸乙酯对照品溶液：取甲磺酸乙酯适量，精密称定，加n,n-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml约含甲磺酸乙酯0.375μg的溶液，量取2ml置于顶空本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：该方法为通过气相色谱法检测噁拉戈利钠中遗传毒性杂质甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯的含量；包括：分别配制甲磺酸甲酯对照品溶液、甲磺酸乙酯对照品溶液、供试品溶液；分别精密量取供试品溶液和甲磺酸甲酯对照品溶液、甲磺酸乙酯对照品溶液，顶空进样，记录色谱图，采用外标法，以峰面积计算供试品溶液中甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯的含量。
2.根据权利要求1所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：所述的气相色谱检测条件：色谱柱：以6％氰丙基苯-94％二甲基硅氧烷为固定相的毛细管柱；起始温度为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至200～220℃，维持8分钟；进样口温度为180～200℃；载气：N2；检测器温度为250～280℃；顶空瓶平衡温度为60℃，平衡时间为30分钟。
3.根据权利要求2所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：所述的气相色谱检测条件：色谱柱：DB-624毛细管柱，长度60m，内径0.32mm，膜厚度1.8μm；起始温度为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至220℃，维持8分钟；进样
4.根据权利要求1所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：配制供试品溶液：取噁拉戈利钠样品0.2～0.3g，精密称定，置于顶空瓶中，精密加入2ml N,N-二甲基甲酰胺，再加入5～7g碘化钠及2～3ml水，密封，振摇使溶解。
5.根据权利要求4所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：配制供试品溶液：取噁拉戈利钠样品200mg，精密称定，置于顶空瓶中，精密加入2ml N,N-二甲基甲酰胺，再加入6g碘化钠及3ml水，密封，振摇使溶解。
6.根据权利要求1所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：配制甲磺酸甲酯对照品溶液：取甲磺酸甲酯适量，精密称定，加N,N-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml含甲磺酸甲酯0.3～0.4μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入5～7g碘化钠及2～3ml水，密封，摇匀。
7.根据权利要求6所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：配制甲磺酸甲酯对照品溶液：取甲磺酸甲酯适量，精密称定，加N,N-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml含甲磺酸甲酯0.375μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入6g碘化钠及3ml水，密封，摇匀。
8.根据权利要求1所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：配制甲磺酸乙酯对照品溶液：取甲磺酸乙酯适量，精密称定，加N,N-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml含甲磺酸乙酯0.3～0.4μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入5～7g碘化钠及2～3ml水，密封，摇匀。
9.根据权利要求8所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：配制甲磺酸乙酯对照品溶液：取甲磺酸乙酯适量，精密称定，加N,N-二甲基甲酰胺稀释制成每1ml含甲磺酸乙酯0.375μg的溶液，量取2ml置于顶空瓶中，再加入6g碘化钠及3ml水，密封，摇匀。
...【技术特征摘要】
1.一种噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：该方法为通过气相色谱法检测噁拉戈利钠中遗传毒性杂质甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯的含量；包括：分别配制甲磺酸甲酯对照品溶液、甲磺酸乙酯对照品溶液、供试品溶液；分别精密量取供试品溶液和甲磺酸甲酯对照品溶液、甲磺酸乙酯对照品溶液，顶空进样，记录色谱图，采用外标法，以峰面积计算供试品溶液中甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯的含量。
2.根据权利要求1所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：所述的气相色谱检测条件：色谱柱：以6％氰丙基苯-94％二甲基硅氧烷为固定相的毛细管柱；起始温度为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至200～220℃，维持8分钟；进样口温度为180～200℃；载气：n2；检测器温度为250～280℃；顶空瓶平衡温度为60℃，平衡时间为30分钟。
3.根据权利要求2所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：所述的气相色谱检测条件：色谱柱：db-624毛细管柱，长度60m，内径0.32mm，膜厚度1.8μm；起始温度为50℃，维持10分钟，以每分钟30℃的速率升至220℃，维持8分钟；进样口温度为180℃；检测器温度为250℃；顶空瓶平衡温度为60℃，平衡时间为30分钟。
4.根据权利要求1所述的噁拉戈利钠遗传毒性杂质检测方法，其特征在于：配制供试品溶液：取噁拉戈利钠样品0.2～0.3g，精密称定，置于顶空瓶中，精密加入2ml n,n-二甲基甲酰胺，再加入5～7g碘化钠及2～3ml水，密封，振摇使溶解。
<...【专利技术属性】
技术研发人员：谢俊，万辉，田丽娟，杨俊，吴云登，刘文一，赵梦灵，蔡莹，黄春玉，李剑，徐向阳，许润，
申请(专利权)人：金陵药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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