【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物，尤其涉及hspsk基因在提高野大麦遗传转化效率中的应用。
技术介绍
1、野大麦是重要的饲草、生态草植物，在畜牧业发展和生态修复研究中具有重要价值。在野大麦植物的遗传改良研究中，遗传转化是一种必不可少的手段，在基因组编辑、性状精准改良、植物分子设计育种、基因功能研究等过程发挥着重要作用。
2、蒙农1号野大麦是育种家选育的一个优良品种，但其遗传转化过程中愈伤组织水泽化严重，不能再生，阻碍了其遗传转化技术体系的建立。因此，急需开发一套高效、稳定、广泛适用于蒙农1号野大麦的分子辅助转化工具，以大幅度提高蒙农1号野大麦的遗传转化效率，促进转基因育种技术和分子精准设计育种技术的发展，推动高产、优质、抗逆性强的新品种培育进程。
技术实现思路
1、为解决上述问题，本专利技术的目的是提供一种适用于蒙农1号野大麦的高效稳定的遗传转化体系。
2、一方面，本申请提供了hspsk基因在提高植物遗传转化效率中的应用。
3、进一步地，所述提高植物遗传转化效率是通过促进胚性愈伤组织的形成和/或愈伤组织再生实现的。
4、野大麦种子、幼穗、下胚轴等外植体诱导形成的愈伤组织为水泽化愈伤，没有再生能力。本专利技术在野大麦茎节和茎段转录组中，分析获得一个表达水平较高的hspsk基因(序列如seq id no.1)，将其过表达于野大麦下胚轴后，可促进其形成胚性愈伤组织，并提高其再生能力，以获得转基因阳性植株，并且，转基因植株生长健壮，发育正常。因此，野大麦hsp
5、进一步地，所述hspsk基因的核苷酸序列如seq id no.1所示或与seq id no.1具有至少75％同一性的核苷酸序列；优选的，所述hspsk基因编码的氨基酸序列如seq idno.2所示或与seq id no.2具有至少80％同一性的氨基酸序列。
6、其中，所述hspsk基因的核苷酸序列如seq id no.1所示或与seq id no.1具有75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％同一性的核苷酸序列；
7、所述hspsk基因编码的氨基酸序列如seq id no.2所示或与seq id no.2具有80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％同一性的氨基酸序列。
8、进一步地，所述植物为野大麦。
9、在一种优选的实施方式中，本申请采用蒙农1号野大麦作为实验材料进行。本领域技术人员可以理解的是，具体野大麦品种对本申请实验结果无影响，可采用方便获得的野大麦品种完成本申请所述技术方案。
10、另一方面，本申请还提供了一种提高植物遗传转化效率和/或促进胚性愈伤组织形成和再生的方法，所述方法包括提高植物中hspsk基因表达水平或mrna转录水平的步骤。
11、进一步地，所述方法包括向所述植物中导入hspsk基因序列来实现。
12、进一步地，所述hspsk基因的核苷酸序列如seq id no.1所示或与seq id no.1具有至少75％同一性的核苷酸序列；优选的，所述hspsk基因编码的氨基酸序列如seq idno.2所示或与seq id no.2具有至少80％同一性的氨基酸序列。
13、进一步地，所述植物为野大麦。
14、在一种优选的实施方式中，通过农杆菌遗传转化方法向所述植物中导入hspsk基因序列来实现。所述农杆菌遗传转化方法可选择通用的方法进行。
15、在上述过程中，本领域技术人员可根据实际情况选择已知质粒进行重组载体的构建并对构建的重组载体进行常规优化和修饰，也可选用常用农杆菌及其通用转化方法完成上述遗传转化过程，本申请中不对质粒种类和农杆菌种类进行强制性的限定。
16、在一种优选的实施方式中，所述载体可为panic6b。
17、另一方面，本申请还提供了一种野大麦的遗传转化方法，所述方法包括：提高野大麦中hspsk基因表达水平或mrna转录水平的步骤。
18、进一步地，所述hspsk基因的核苷酸序列如seq id no.1所示或与seq id no.1具有至少75％同一性的核苷酸序列；优选的，所述hspsk基因编码的氨基酸序列如seq idno.2所示或与seq id no.2具有至少80％同一性的氨基酸序列。
19、进一步地，所述方法包括：
20、步骤一、将野大麦转化受体浸入农杆菌侵染液中侵染；所述农杆菌携带野大麦hspsk基因；
21、步骤二、取出步骤一中侵染后的转化受体，将转化受体进行愈伤组织诱导培养获得胚性愈伤组织；
22、步骤三、将胚性愈伤组织进行芽诱导培养获得再生芽；
23、步骤四、将再生芽进行生根诱导培养获得转基因野大麦植株。
24、在一种优选的实施方式中，所述农杆菌为eha105。
25、进一步地，所述野大麦转化受体选自胚轴、种子、根、茎、叶中的一种或多种。
26、进一步地，所述野大麦转化受体为下胚轴。
27、本专利技术具有如下有益效果：
28、本专利技术中针对野大麦提出了一种高效遗传转化方法，该遗传转化方法能够实现高效创制基因过表达和基因编辑植株，具有转化体系效率高、转化周期短的优势，避免了现有技术中野大麦遗传转化过程中愈伤组织水泽化严重、不能再生的问题。
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1.HsPSK基因在提高植物遗传转化效率中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述提高植物遗传转化效率是通过促进胚性愈伤组织的形成和/或愈伤组织再生实现的。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述HsPSK基因的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示或与SEQ ID No.1具有至少75％同一性的核苷酸序列，所述HsPSK基因编码的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示或与SEQ ID No.2具有至少80％同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物为野大麦。
5.一种提高植物遗传转化效率和/或促进胚性愈伤组织形成和再生的方法，其特征在于，所述方法包括提高植物中HsPSK基因表达水平或mRNA转录水平的步骤。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法包括向所述植物中导入HsPSK基因序列来实现。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述植物为野大麦。
8.一种野大麦的遗传转化方法，其特征在于，所述方法包括：提高野大麦中HsPSK基
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法包括：
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述野大麦转化受体选自胚轴、种子、根、茎、叶中的一种或多种。
...【技术特征摘要】
1.hspsk基因在提高植物遗传转化效率中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述提高植物遗传转化效率是通过促进胚性愈伤组织的形成和/或愈伤组织再生实现的。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述hspsk基因的核苷酸序列如seq idno.1所示或与seq id no.1具有至少75％同一性的核苷酸序列，所述hspsk基因编码的氨基酸序列如seq id no.2所示或与seq id no.2具有至少80％同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物为野大麦。
5.一种提高植物遗传转化效率和/或促进胚性愈...
【专利技术属性】
技术研发人员：付春祥，刘敏，陈晓迪，王玉，赵彦，王召明，苑峰，刘亚玲，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：
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