【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别涉及一种糖基转移酶及其在生物合成甜菊糖苷中的应用。
技术介绍
1、甜味剂是食品工业中用来提供甜味的食品添加剂，目的是降低食品中的糖分和热量，满足消费者对低热量或无糖食品的需求。随着健康意识的提高，传统化工合成的甜味剂因潜在的健康风险而受到限制，而生物合成甜味剂，尤其是从植物中提取的天然甜味剂，因其健康和安全的特性而越来越受欢迎。在生物合成的甜味剂中，甜菊糖苷因其高甜度、低热量和天然来源而成为研究和应用的热点。甜菊糖苷是从甜叶菊中提取的一系列化合物，它们通过糖基化反应在植物体内合成。其中，莱鲍迪苷m（reb m）、莱鲍迪苷d（reb d）、莱鲍迪苷i（reb i）等因出色的甜味特性和无热量而备受关注。
2、在甜菊糖苷的生产中，糖基转移酶发挥着至关重要的作用，能够催化特定的糖基化反应，将糖分子添加到甜菊醇骨架上，生成具有甜味的糖苷。例如，通过糖基转移酶ugt76g1的催化，可以将reb d转化为更甜、口感更好的reb m。通过基因工程技术对糖基转移酶进行优化，能够提高其催化效率和底物特异性，从而提升甜菊糖苷的生产效率和产品质量。有助于实现甜菊糖苷的商业化生产，也为开发新型甜味剂提供了新的可能性，推动了食品工业向更健康、更可持续的方向发展。因此提供一种优化的糖基转移酶突变体具有重要的现实意义。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提供了一种糖基转移酶及其在生物合成甜菊糖苷中的应用，解决了甜叶菊来源糖基转移酶催化活性有限、转化效率较低、不利于工业化生产
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了糖基转移酶，具有：
4、（1）、如seq id no: 1所示的氨基酸序列；或
5、（2）、如（1）所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个残基获得的氨基酸序列，且功能与（1）的相同或相似；或
6、（3）、与如（1）或（2）所示的氨基酸序列至少有90%同源性的氨基酸序列。
7、本专利技术还提供了核酸分子，具有编码上述糖基转移酶的核苷酸序列。
8、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述糖基转移酶的核苷酸序列具有：
9、（4）、如seq id no: 2所示的核苷酸序列；或
10、（5）、如（4）所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且功能与（4）的相同或相似；或
11、（6）、与如（4）或（5）所示的核苷酸序列至少有90%同源性的核苷酸序列。
12、本专利技术还提供了上述糖基转移酶的突变体，其突变位点为：
13、（a1）、y147l；或
14、（a2）、g118f；或
15、（a3）、s51a；或
16、（a4）、k334p；或
17、（a5）、k208d；或
18、（a6）、v278s；或
19、（a7）、k208d和v278s；或
20、（a8）、k208d、v278s和k334p；或
21、（a9）、k208d、v278s、k334p、s51a和y147l。
22、本专利技术还提供了核酸分子，具有编码上述突变体的核苷酸序列。
23、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第439~441位tat替换为ctg的seq id no: 2。
24、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第352~354位ggt替换为ttt的seq id no: 2。
25、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第151~153位agc替换为gcc的seq id no: 2。
26、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第1000~1002位aaa替换为ccg的seq id no: 2。
27、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第622~624位aaa替换为gat的seq id no: 2。
28、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第832~834位gtt替换为agc的seq id no: 2。
29、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第622~624位aaa替换为gat、第832~834位gtt替换为agc的seq id no: 2。
30、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第622~624位aaa替换为gat、第832~834位gtt替换为agc、第1000~1002位aaa替换为ccg的seq id no: 2。
31、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述核酸分子所述编码上述突变体的核苷酸序列为第622~624位aaa替换为gat、第832~834位gtt替换为agc、第1000~1002位aaa替换为ccg、第151~153位agc替换为gcc、第439~441位tat替换为ctg的seq id no: 2。
32、本专利技术还提供了表达载体，具有以下至少一项：
33、（b1）、上述具有编码上述糖基转移酶的核苷酸序列的核酸分子；
34、（b2）、上述具有编码上述突变体的核苷酸序列的核酸分子。
35、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述表达载体还具有eugt11。
36、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述表达载体的骨架为petduet-1。
37、本专利技术还提供了表达载体组合，包括上述表达载体，以及具有atsus1的表达载体。
38、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述表达载体所述具有atsus1的表达载体的骨架为prsfduet-1。
39、本专利技术还提供了宿主细胞，具有以下任一项：
40、（c1）、上述具有编码上述糖基转移酶的核苷酸序列的核酸分子；
41、（c2）、上述具有编码上述突变体的核苷酸序列的核酸分子；
42、（c3）、上述表达载体；
43、（c4）、上述表达载体组合。
44、在本专利技术的一些具体实施方案中，上述宿主细胞包括动物细胞、细菌细胞、真菌细胞；
45、所述细菌包括大肠杆菌。
46、本专利技术还提供了糖基转移酶的制备方法，基于以下任一项制备：
47、（d1）、上述具有编码上述糖基转移酶的核苷酸序列的核酸分子；
48、（d2）、上述具有编码上述突变体的核苷酸序列的核酸分子；
49、（d3）、上述表达载体；
50、（d4）、上述宿主细胞；
51、（d5）上述表本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.糖基转移酶，其特征在于，其氨基酸序列具有SEQ ID NO: 1所示序列。
2.核酸分子，其特征在于，具有编码权利要求1所述的糖基转移酶的核苷酸序列。
3.如权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，其核苷酸序列具有SEQ ID NO: 2所示序列。
4.如权利要求1所述的糖基转移酶的突变体，其特征在于，突变位点为：
5.核酸分子，其特征在于，具有编码权利要求4所述的突变体的核苷酸序列。
6.表达载体，其特征在于，具有以下至少一项：
7.宿主细胞，不包括具有全能性的细胞，其特征在于，具有以下任一项：
8.糖基转移酶的制备方法，其特征在于，基于以下任一项制备：
9.以下任一项在制备甜菊糖苷中的应用：
10.甜菊糖苷的制备方法，其特征在于，包括：基于权利要求7所述的宿主细胞将底物转化为甜菊糖苷；
【技术特征摘要】
1.糖基转移酶，其特征在于，其氨基酸序列具有seq id no: 1所示序列。
2.核酸分子，其特征在于，具有编码权利要求1所述的糖基转移酶的核苷酸序列。
3.如权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，其核苷酸序列具有seq id no: 2所示序列。
4.如权利要求1所述的糖基转移酶的突变体，其特征在于，突变位点为：
5.核酸分子，其特征在于，具有编码权...
【专利技术属性】
技术研发人员：李伟，潘月，裴亮，李政泓，徐馨雨，
申请(专利权)人：四川盈嘉合生科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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