【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及海藻糖制备，特别是涉及一种用于酶固定的载体及制备海藻糖的方法。
技术介绍
1、海藻糖在恶劣环境条件下对细胞具有保护作用，有效地保护蛋白质分子不变性失活，故而在生物医药领域具有广阔的应用前景。
2、中国专利技术专利cn108130351b公开了大颗粒海藻糖制备方法，cn103981233b公开了一种以木薯淀粉为原料制备海藻糖的方法，现在海藻糖制备路径中，比较突出的是酶转化法，其原理在于是采用葡萄糖、麦芽糖或淀粉等为底物,通过与海藻糖合成有关的酶的作用转化成海藻糖。这种方法缺陷在于酶的溶解度不好，致使酶的使用量较大，反应时间较长，使得制备海藻糖的成本增加，不利于海藻糖的工业化生产。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种制备酶固定载体的方法，本专利技术利用氯化镁改善蒙脱土的形貌，提升酶固定载体的比表面积，增大固定于载体的酶与反应液的接触面积，提升反应效率。
2、为解决此技术问题，本专利技术的技术方案是：一种制备酶固定载体的方法，包括以下步骤：
3、s11、向去离子水中加入插层剂、氯化镁与蒙脱土，超声分散，均匀混合；
4、s12、将s11混合均匀的物料置于微波反应器中，在微波的作用下，插层剂和氯化镁进入至蒙脱土层间；
5、s13、蒸发去离子水获得固体；
6、s14、煅烧s13所得固体，得到改性蒙脱土混合物；
7、淬火；
8、球磨粉碎，得到粒径为600nm至800nm的改性
9、优选所述插层剂为双十八烷基四羟乙基二溴丙二铵。本专利技术利用双十八烷基四羟乙基二溴丙二铵与蒙脱土发生阳离子交换反应吸附插入在其层间，从而使蒙脱土表面发生变化，层间距增大，伴随着双十八烷基四羟乙基二溴丙二铵长分子链进入的同时氯化镁也进入蒙脱土的层间，在增大层间距的同时引入氯化镁。
10、优选步骤s11中氯化镁与蒙脱土质量比1：（10至16）；
11、插层剂与氯化镁的质量比为（0.5至0.8）:1。
12、优选步骤s12中微波的工艺条件为：微波功率800w，微波时间为45min至60min。
13、优选步骤s14中煅烧温度600℃至700℃，煅烧时间2h至3h。本专利技术通过煅烧去除蒙脱土层间的插层剂，且氯化镁通过煅烧产生mg-o，通过mg-o与蒙脱土层间的si、al、mg混合，mg的半径最小，其致使原有晶体变形，mg的位点处键长短，形成的晶体更小，同时插层剂和氯元素的离开会形成孔隙，改性蒙脱土载体比表面积更大。
14、本专利技术的另一目的在于提供一种应用制得的酶固定载体制备海藻糖的方法，本专利技术利用改性蒙脱土具有高比表面积且蒙脱土的吸附特性有效吸附酶，提升酶与反应液的接触面积，利用改性蒙脱土促进酶在反应液中的分散速率和分散程度，提升反应效率，缩短反应时间。
15、为解决此技术问题，本专利技术的技术方案是：一种本专利技术提出的制备酶固定载体的方法制得改性蒙脱土载体的应用，将所述改性蒙脱土载体用于固定酶制备海藻糖。
16、为解决此技术问题，本专利技术的技术方案是：一种应用改性蒙脱土载体制备海藻糖的方法，包括以下步骤：
17、s1、使用磷酸缓冲液调节淀粉分散液的ph为5.5至6.0，调节温度为45℃至55℃，恒温搅拌下加入由所述的改性蒙脱土载体固定的α-淀粉酶；
18、s2、过滤s1的物料，得过α-淀粉酶转化液；
19、s3、调节s2所得滤液的ph为6.5至7.0，保持温度为30℃至40℃；
20、s4、向经过s3的液相添加由改性蒙脱土载体固定的麦芽寡糖基海藻糖水解酶，搅拌，恒温30℃至40℃，转化12小时，得麦芽寡糖基海藻糖水解酶转化液；
21、s5、过滤经过s4的物料，向液相中投入活性炭脱色，搅拌;过滤活性炭得脱色液；
22、s6、将s5所得滤液通过离子交换脱盐至电导率小于50 μs/cm得脱盐液；
23、s7、将s6所得脱盐液进行稀释，色谱分离，分离温度为65℃至75℃，得海藻糖溶液。
24、优选步骤s1中加入改性蒙脱土载体固定的α-淀粉酶的转化时间为10min至30min。由于α-淀粉酶随着改性蒙脱土载体在溶液中分散速度快，有效缩短了酶的溶解时间。
25、优选步骤s1中α-淀粉酶与淀粉的质量比为1：（20至30）。
26、优选步骤s4中麦芽寡糖基海藻糖水解酶与步骤s1中淀粉的质量比为1：（23至31）。
27、步骤s5中活性炭与s1中淀粉的质量比为（0.1至0.3）：1。
28、通过采用上述技术方案，本专利技术的有益效果是：
29、本专利技术氯化镁随着插层剂进入至蒙脱土的层间，煅烧混合有插层剂和氯化镁的蒙脱土，高温下，氯化镁煅烧会产生mg-o,mg-o与蒙脱土中原来的si、al、mg混合，mg的半径最小，其致使原有晶体变形，mg的位点处键长短，形成的晶体更小，同时氯元素和插层剂的离开会形成孔隙，改性载体比表面积更大，配合蒙脱土具有层状结构且不溶于水，当α-淀粉酶或者麦芽寡糖基海藻糖水解酶吸附于经过改性的蒙脱土表面时，酶随着蒙脱土在反应液中分散，增加固定于载体的酶与液相的接触面积，且颗粒的分散比酶自身的分散要快；进一步本专利技术将所得的改性蒙脱土载体作为酶的固定相生产海藻糖，能够大大缩短反应时间和减少酶的用量；同时，酶的载体，使用后可多次重复利用。此外，酶解过程中，随着改性蒙脱土分散的酶与底物的接触更多，提高酶的活性，减少反应时间。
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1.一种制备酶固定载体的方法，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
4.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
6.一种应用权利要求1至5任一项所述的制备酶固定载体的方法制得改性蒙脱土载体制备海藻糖的方法，其特征在于：
7.根据权利要求6所述的制备海藻糖的方法，其特征在于：步骤S1中加入改性蒙脱土载体固定的α-淀粉酶的转化时间为30min。
8.根据权利要求6所述的制备海藻糖的方法，其特征在于：步骤S1中α-淀粉酶与淀粉的质量比为1：（20至30）。
9.根据权利要求6所述的制备海藻糖的方法，其特征在于：
10.根据权利要求6所述的制备海藻糖的方法，其特征在于：
【技术特征摘要】
1.一种制备酶固定载体的方法，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
3.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
4.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
5.根据权利要求1所述的制备酶固定载体的方法，其特征在于：
6.一种应用权利要求1至5任一项所述的制备酶固定载体的方法制得改性蒙脱土载体制备...
【专利技术属性】
技术研发人员：方金法，黄强，蒋新明，
申请(专利权)人：浙江晟格生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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