【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体及其应用。
技术介绍
1、铜绿假单胞菌是一种条件致病革兰氏阴性杆菌，也是一种人畜共患病病原微生物，简称绿脓杆菌，由于其代谢的多功能性，除生活在土壤和水等多种生态环境中，也存在于家禽、家畜、野生动物、人和动物源性食品中。铜绿假单胞菌对人类而言是一种机会致病性的病原体，与越来越多的危及生命的急性和慢性感染有关，包括囊性纤维化、呼吸机相关性肺炎、尿路感染、外耳炎、烧伤和创伤、骨和关节感染、菌血症和全身感染。碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌在人临床的迅速传播更构成了全球人类健康的巨大威胁。铜绿假单胞菌常能从动物或其养殖环境中分离到，会导致动物的呼吸道症状、败血症、严重腹泻和死亡，其是水貂出血性肺炎的主要病原菌，会引起水貂急性、传染性和致命性肺部感染，感染的养殖场会出现集体、急性、高死亡率的爆发；感染家禽后可在家禽群中迅速传播，任何年龄的鸡都可能感染此菌，孵化期的蛋鸡感染铜绿假单胞菌后很容易产生“臭蛋”；感染水禽如鸭、鹅会造成水禽绿脓杆菌病导致死亡；初生仔猪感染绿脓杆菌病会出现呼吸困难、倒地不起、严重腹泻最终导致死亡。总言之，环境中铜绿假单胞菌引起的动物单独或混合感染往往会造成幼小畜禽的群体性爆发，对免疫力低下的畜禽会导致极高的致死性，给畜禽养殖业带来巨大经济损失，此外，畜禽及环境中的铜绿假单胞菌尤其是碳青霉烯耐药菌株会通过自然传播及食品给人类直接危害人类公众健康。
2、当前耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌已被列为迫切需要新治疗策略的关键病原体，迫切需要针对耐药铜绿假单胞菌开发新的抗菌
技术实现思路
1、本专利技术目的在于，提供一株碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体及其应用，以期解决上述
技术介绍
中提出的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、一株碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体，其命名为铜绿假单胞菌噬菌体(pseudomonas aeruginosaphage)vb_paep_qszh，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc m20241721。
4、本专利技术另一目的在于提供一种碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于预防和/或治疗由铜绿假单胞菌引起的感染性疾病药物中的应用。特别是，在制备用于预防和/或治疗由碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌引起的感染性疾病药物中的应用。
5、本专利技术另一目的在于提供一种碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于杀灭畜禽体表和/或畜禽体内铜绿假单胞菌的组合物中的应用。
6、本专利技术另一目的在于提供一种碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在杀灭空间环境中铜绿假单胞菌的药剂中的应用。
7、优选地，所述空间环境至少包括动物养殖环境和/或医疗环境。
8、本专利技术另一目的在于提供一种用于特异性杀灭铜绿假单胞菌的组合物，其包含上述的碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为活性成分。
9、本专利技术还提供一种环境消毒剂，其有效成分为包括上述噬菌体的制剂；优选地，噬菌体的含量不低于1×109pfu/ml，可用于养殖场、医院以及公共场所水泥地面和金属器械表面的消毒。
10、实验表明，在多种铜绿假单胞菌存在的环境中喷洒109pfu·ml-1噬菌体vb_paep_qszh鸡尾酒后，细菌在1h内被几乎被完全杀灭，证明本专利技术噬菌体具有良好的应用前景。
11、通过实验测定本专利技术碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体vb_paep_qszh的生物学特性，结果如下：
12、1、所述噬菌体vb_paep_qszh从自然环境中分离得到，宿主菌为cr-pa20025438。所述噬菌体vb_paep_qszh为短尾噬菌体，在固体培养基上可以形成透亮噬菌斑，形态大小一致，边缘清晰规则，直径为7mm。由电镜照片看出，噬菌体头部为正二十面体，头长约为62nm，尾长约为15nm。
13、2、所述噬菌体vb_paep_qszh对铜绿假单胞菌具有很强的杀菌活性，可以高效裂解人源碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌、猪源碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌、鹅源碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌、鸭源碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌、鸡源碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌等。
14、3、通过最佳感染复数测定实验得出，噬菌体vb_paep_qszh与相应宿主菌以0.00001的感染复数反应时，产生子代噬菌体的效价最高，即噬菌体vb_paep_qszh的最佳moi为0.00001。
15、4、通过一步生长曲线测定得出，该噬菌体vb_paep_qszh潜伏期约10min，裂解爆发期约持续140min，大约在噬菌体感染宿主菌后150min进入平稳期，裂解量约为352pfu·cell-1。
16、5、温度及酸碱度耐受性实验结果表明，噬菌体vb_paep_qszh在40℃、50℃环境下处理80min后效价依然保持在较高水平，在70℃处理20min后效价下降了44.00％。在80℃时，噬菌体vb_paep_qszh作用60min后失活。在ph＝3～11之间，噬菌体vb_paep_qszh效价均稳定在较高水平。
17、有益效果：本专利技术提供的一株碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌广谱裂解噬菌体，该噬菌体对铜绿假单胞菌具有很强的杀菌活性和广泛宿主谱，该噬菌体对来自于不同种类畜禽以及人临床碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌都具有很好的杀灭效果，裂解谱宽，应用范围广，弥补噬菌体宿主谱窄的局限性。
18、该噬菌体对碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌具有特异性，其裂解能力强，潜伏期短，爆发量高，对温度和酸碱耐受性强，无毒力基因及耐药基因。可以单独或与其他物质复配使用，例如容易配制成喷雾剂且便于大规模生产，可有效杀灭环境中的碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌。
19、本专利技术为体内外铜绿假单胞菌感染治疗、养殖业及其他环境中铜绿假单胞菌消毒净化提供一种安全、无毒的噬菌体消杀产品。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体，其命名为铜绿假单胞菌噬菌体(Pseudomonasaeruginosaphage)vB_PaeP_QSZH，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 20241721。
2.权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于预防和/或治疗由铜绿假单胞菌引起的感染性疾病药物中的应用。
3.权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于预防和/或治疗由碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌引起的感染性疾病药物中的应用。
4.权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于杀灭畜禽体表和/或畜禽体内铜绿假单胞菌的组合物中的应用。
5.权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在杀灭空间环境中铜绿假单胞菌的药剂中的应用。
6.权利要求5所述的应用中所述空间环境至少包括动物养殖环境和/或医疗环境。
7.一种用于特异性杀灭铜绿假单胞菌的组合物，其特征是，所述组合物活性成分包含权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬
8.一种环境消毒剂，其特征是，其有效成分包括权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体；所述噬菌体的含量不低于1×109PFU/ml。
9.权利要求8所述环境消毒剂，其特征是，所述环境消毒剂在养殖场、医院以及其他公共场所水泥地面和金属器械表面消毒中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一株碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体，其命名为铜绿假单胞菌噬菌体(pseudomonasaeruginosaphage)vb_paep_qszh，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc m 20241721。
2.权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于预防和/或治疗由铜绿假单胞菌引起的感染性疾病药物中的应用。
3.权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于预防和/或治疗由碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌引起的感染性疾病药物中的应用。
4.权利要求1所述碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌噬菌体作为有效成分在制备用于杀灭畜禽体表和/或畜禽体内铜绿假单胞菌的...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘宝涛，刘玉庆，李彦，李长安，王佳乐，郝小静，杨胜男，刘甜甜，王俊杰，邹明，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。