【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医疗，具体涉及gpr116在治疗或预防肝硬化中的应用。
技术介绍
1、肝硬化是慢性肝病的不可逆后果，涉及广泛的纤维化和肝脏结构的重组，导致门静脉高压。门静脉高压通过促进脾血管扩张和增加血流入量，加剧肝损伤。肝脏血管承受着升高的水压(hp)，导致肝窦内皮细胞(lsecs)功能障碍，导致腹水、静脉曲张出血和肝性脑病等严重的临床表现。这每年导致全球约120万人死亡。尽管如此，肝硬化和门静脉高压的病理生理机制仍然知之甚少，治疗选择有限，除肝移植外没有fda批准的药物。因此，探索新的治疗靶点和策略至关重要。
2、新兴研究强调抗血管生成治疗在肝纤维化早期阶段的潜力。血管生成由肝损伤和机械扰动引发，似乎是一个有前途的靶点。然而，通过腐蚀铸型和微ct成像在早期纤维化中看到血管生成，但在肝硬化中观察到的血管数量减少，血管密度降低，处于血管退化状态。这种差异表明，肝硬化阶段的治疗策略不再是抗血管生成，而是抑制血管退化。
3、随着肝硬化的发展，肝脏机械微环境显著改变，主要是通过过度沉积的细胞外基质(ecm)，增强了基质的刚度。尽管先前的研究表明基质刚度可以调节肝窦内皮细胞(lsecs)的形态和功能，并重现早期纤维化血管生成，但在体外持续增加的基质刚度未能重现肝硬化中的血管退化。此外，基质沉积损害了肝窦微循环，并增加了肝内血管阻力，导致窦状静脉血流动力学异常(如剪切应力和拉伸扰动，静水压升高)。流体剪切应力和拉伸被报道可以导致lsecs窗孔丧失、毛细血管化、炎症、微血栓和血管收缩，从而促进肝硬化的进展。尽管有报
4、gpr116，一种粘附型g蛋白偶联受体(agpcr)，在内皮细胞(ecs)中表达，已被证明在血管畸形和渗漏中发挥作用。然而，其与肝血管的关系尚未被探索。粘附型gpcr具有独特的gpcr蛋白酶切割位点(gps)自切割结构域和ntf-ctf结构，对机械扰动高度敏感。基于gpr116的机械力激活机制以及其对多种疾病的调控作用,研发以gpr116为靶点的药物是重要的肝硬化治疗的应用方向。但目前gpr116在肝硬化中的作用机制尚不清楚。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。针对肝硬化，目前尚无有效的能够治疗肝硬化的药物。而且现有技术中未有针对gpr116与肝硬化之间存在关系的报道或者研究。本专利技术的专利技术人创造性的发现gpr116可以作为靶点，应用在肝硬化治疗领域。
2、具体而言，本专利技术提供了如下技术方案：
3、在本专利技术的第一方面提供了一种生物标志物在下述中的任意一种应用：
4、a1)在制备用于治疗和/或预防肝硬化的药物的应用；
5、a2)在制备用于评估治疗和/或预防肝硬化的药物中的应用；
6、a3)在制备用于筛选或预测治疗肝硬化的药物中的应用；
7、所述生物标志物为grp116。
8、本专利技术提供了gpr116作为靶点在治疗和/或预防肝硬化中的应用。本专利技术通过动物实验证明用aav载体向肝硬化肝脏内递送shrna以敲低gpr116的表达，可以减少肝脏内胶原的沉积，促进肝脏内的血管化，并抑制血管凋亡；通过动物实验证明特异性敲除内皮细胞上的gpr116可以增加肝硬化肝脏中血管密度，促进血管化相关基因表达，减少血管凋亡。本专利技术通过体外细胞实验证明敲低gpr116可以抑制在肝硬化条件的高静水压和高刚度下的肝窦内皮细胞(lsec)发生细胞凋亡，敲低gpr116的lsec可以抑制星型细胞(hsc)的激活和胶原的重塑和降低胶原刚度。这些结果表明gpr116参与肝硬化进展过程中血管损伤调控，抑制gpr116的表达可以显著减缓或预防肝硬化。本专利技术提供了gpr116作为靶点在治疗或预防肝硬化中的新用途，为临床上肝硬化的防止提供了新的策略。
9、根据本专利技术的实施例，所述药物能够抑制grp116的表达量和/或活性；
10、任选地，所述药物包括结合grp116的抗体、多肽、蛋白质或者核酸分子。
11、根据本专利技术的实施例，所述药物包括核酸分子，所述核酸分子包括特异性shrna分子，所述shrna分子选自下列中的至少一种：
12、b1)所述shrna分子靶向grp116基因的表达；
13、b2)所述shrna分子的正义链序列如seq id no:1所示，和/或所述shrna分子的反义链序列如seq id no:2所示；或所述shrna分子的正义链序列如seq id no:3所示，和/或所述shrna分子的反义链序列如seq id no:4所示。
14、根据本专利技术的实施例，所述shrna分子通过腺相关病毒递送。
15、根据本专利技术的实施例，所述药物至少具有下述性质之一：
16、c1)降低肝脏组织中grp116表达；
17、c2)提高肝脏组织中血管化相关基因cd31、ang2和vwf表达；
18、c3)肝脏中表达内皮细胞的cd31信号增加，改善血管损伤；
19、c4)减少肝脏自组织中胶原沉积；
20、c5)抑制星型细胞激活；
21、c6)抑制胶原重塑；
22、c7)抑制内皮细胞凋亡。
23、本专利技术通过体外细胞实验证明敲低gpr116可以抑制在肝硬化条件的高静水压和高刚度下的肝窦内皮细胞(lsec)发生细胞凋亡，敲低gpr116的lsec可以抑制星型细胞(hsc)的激活和胶原的重塑和降低胶原刚度。
24、在本专利技术的第二方面提供了试剂在制备治疗和/或预防肝硬化的药物或试剂盒中的应用，所述试剂能够抑制grp116的表达和/或活性；
25、根据本专利技术的实施例，所述试剂包括结合grp116的抗体、多肽、蛋白质或者核酸分子。
26、根据本专利技术的实施例，所述核酸分子包括特异性shrna分子，所述shrna分子选自下列中的至少一种：
27、b1)所述shrna分子靶向grp116基因的表达；
28、b2)所述shrna分子的正义链序列如seq id no:1所示，和/或所述shrna分子的反义链序列如seq id no:2所示；或所述shrna分子的正义链序列如seq id no:3所示，和/或所述shrna分子的反义链序列如seq id no:4所示。
29、根据本专利技术的实施例，所述shrna分子通过腺相关病毒递送。
30、本专利技术通过动物实验证明用aav载体向肝硬化肝脏内递送shrna以敲低gpr116的表达，可以减少肝脏内胶原的沉积，促进肝脏内的血管化，并抑制血管凋亡；通过动物实验证明特异性敲除内皮细胞上的gpr116可以增加肝硬化肝脏中血管密度，促进血管化相关基因表达，减少血管凋亡。
31、在本专利技术的第三方面提供了grp116抑制本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.生物标志物在下述中的任意一种应用：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物能够抑制GRP116的表达量和/或活性；
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括核酸分子，所述核酸分子包括特异性shRNA分子，所述shRNA分子选自下列中的至少一种：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述shRNA分子通过腺相关病毒递送。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物至少具有下述性质之一：
6.试剂在制备治疗和/或预防肝硬化的药物或试剂盒中的应用，所述试剂能够抑制GRP116的表达和/或活性；
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述核酸分子包括特异性shRNA分子，所述shRNA分子选自下列中的至少一种：
8.GRP116抑制剂在制备用于治疗和/或预防肝硬化的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述GRP116抑制剂包括降低GRP116蛋白表达量或GPR116蛋白含量的物质，或抑制GRP116基因表达的物质；
<...【技术特征摘要】
1.生物标志物在下述中的任意一种应用：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物能够抑制grp116的表达量和/或活性；
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括核酸分子，所述核酸分子包括特异性shrna分子，所述shrna分子选自下列中的至少一种：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述shrna分子通过腺相关病毒递送。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物至少具有下述性质之一：
6.试剂在制备治疗和/或预防肝硬化的药物或试剂盒中的应用，所述试剂能够抑...
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