【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，具体地，涉及一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针及其应用。
技术介绍
1、草地贪夜蛾(spodoptera frugiperda)作为一种农业害虫，其食量大、传播速度快且危害性强，具有较强的耐药性，目前其对有机磷类、烟碱类和拟除虫菊酯类化学农药已产生明显抗性。近几年来从天然产物中筛选出防控草地贪夜蛾的活性成分并开发生物农药的研究日益增加。
2、苦参碱(mat)是从苦参、山豆根或苦豆子中提取出的一种水溶性生物碱，具有广泛的医用和农用活性，是多种生物碱的总称。研究发现，苦参碱及其衍生物显示出广泛的生物学特性，其在抗癌、抗心脑血管、抗病毒、调节免疫系统、调节消化系统和抗肿瘤等医药领域方面有重要的作用，此外苦参碱及其衍生物还具有杀虫、杀螨及抗菌等活性，其作为农药在农用领域中属于无残留低毒的农药产品，对绿色生态的发展、环境污染的控制以及农产品质量的提高等都具有及其重要的意义。
3、尽管苦参碱本身具有广泛的诸如抗肿瘤、抗炎和抗病毒等医用活性和杀虫、杀螨和抗菌等农用活性，但苦参碱本身也存在药效慢、活性较弱、使用剂量大且持效性较短等缺点，极大影响了其进一步推广和使用。
4、因此，为了提高苦参碱的生物活性，针对苦参碱进行相关结构的改造和修饰的研究越来越多，但因苦参碱及其衍生物的靶标蛋白尚未明显，且相关作用机制不清晰等原因，导致苦参碱及其衍生物的研究效率较低，合成与应用过程较为艰辛。其中苦参碱的新衍生物的设计合成主要依据实验经验，导致合成与开发设计相对盲目，获得的新衍生物活性参差不齐，无法根据
5、因此，目前急需一种能够识别草地贪夜蛾sf9细胞潜在靶标蛋白的分子探针，能够准确垂钓得到草地贪夜蛾sf9细胞的靶标蛋白，进而有针对性的对苦参碱结构进行改造和修饰，从而合成杀虫活性更好的苦参碱衍生物农药。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了克服现有技术的上述不足，提供一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针及其应用。
2、本专利技术的第一目的是提供一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针。
3、本专利技术的第二目的是提供上述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针在确定苦参碱类农药的作用靶点中的应用。
4、本专利技术的第三目的是提供上述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针在指导农业杀虫中的应用。
5、为了实现上述目的，本专利技术是通过以下方案予以实现的：
6、一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，所述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针由活性基团、连接基团和报告基团连接得到；
7、所述活性基团为苦参碱衍生物，所述连接基团为6-氨基己酸和/或2-甲氧基羰基-6-氨基己酸，所述报告基团为生物素、罗丹明和/或叠氮-炔；
8、所述苦参碱衍生物的化学式如式i所示，
9、
10、当r1为nh2时，r2为h；当r2为nh2时，r1为h。
11、进一步优选地，所述苦参碱衍生物的化学式如式ii所示，
12、
13、优选地，所述连接基团为6-氨基己酸。
14、优选地，所述报告基团为生物素。
15、优选地，所述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针的化学式如式iii所示，
16、
17、本专利技术还请求保护上述任一所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针在确定苦参碱类农药的作用靶点中的应用。
18、优选地，所述作用靶点为α-tubulin和/或actin muscle-type a2。
19、本专利技术还请求保护上述任一所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针在指导农业杀虫中的应用。
20、优选地，所述指导农业杀虫为指导合成靶向作用靶点的的苦参碱类农药。
21、更优选地，所述作用靶点为α-tubulin和/或actin muscle-type a2。
22、更优选地，所述杀虫为杀草地贪夜蛾。
23、本专利技术还请求保护一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针的制备方法，包括以下步骤：
24、s1.利用michael加成反应在槐果碱的13位上引入3-硝基吡唑或4-硝基吡唑，接着进行氢化反应，得到如式i所示苦参碱衍生物；
25、s2.将连接基团与报告基团连接，得到连接臂；
26、所述连接基团为6-氨基己酸和/或2-甲氧基羰基-6-氨基己酸，所述报告基团为生物素、罗丹明和/或叠氮-炔；
27、s3.将步骤s1得到的苦参碱衍生物和步骤s2得到的连接臂通过酰胺化反应进行结合，得到吡唑苦参碱衍生物活性分子探针；
28、
29、步骤s1中引入3-硝基吡唑时，r1为nh2，r2为h；步骤s1中引入4-硝基吡唑时，r1为h，r2为nh2。
30、优选地，步骤s1为：利用michael加成反应在槐果碱的13位上引入3-硝基吡唑。
31、优选地，步骤s1中所述氢化反应为pd/c加氢还原反应。
32、优选地，步骤s2中所述连接基团为6-氨基己酸。
33、优选地，步骤s2中所述报告基团为生物素。
34、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
35、本专利技术提供了一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，由活性基团、连接基团和报告基团连接而成；所述活性基团为苦参碱衍生物，所述连接基团为6-氨基己酸和/或2-甲氧基羰基-6-氨基己酸，所述报告基团为生物素、罗丹明和/或叠氮-炔；所述苦参碱衍生物的化学式如式i所示。利用本专利技术所述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针能够确定苦参碱衍生物作用于sf9细胞时的潜在靶标蛋白，有助于针对性改造和修饰苦参碱，高效合成出具有优异杀虫活性的苦参碱类农药，实现对农业害虫更好的防治。
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1.一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针由活性基团、连接基团和报告基团连接得到；
2.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述苦参碱衍生物的化学式如式II所示，
3.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述连接基团为6-氨基己酸。
4.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述报告基团为生物素。
5.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针的化学式如式III所示，
6.权利要求1～5任一所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针在确定苦参碱类农药的作用靶点中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述作用靶点为α-tubulin和/或actinMuscle-Type A2。
8.权利要求1～5任一所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针在指导农业杀虫中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述指导农业杀虫
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述杀虫为杀草地贪夜蛾。
...【技术特征摘要】
1.一种吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述吡唑苦参碱衍生物活性分子探针由活性基团、连接基团和报告基团连接得到；
2.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述苦参碱衍生物的化学式如式ii所示，
3.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述连接基团为6-氨基己酸。
4.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述报告基团为生物素。
5.根据权利要求1所述的吡唑苦参碱衍生物活性分子探针，其特征在于，所述吡唑苦参碱衍生物活性分子...
【专利技术属性】
技术研发人员：程杏安，马孟雨，李俊杰，蒋旭红，刘欣，邹启文，刘志聪，
申请(专利权)人：仲恺农业工程学院，
类型：发明
国别省市：
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