用于辅助诊断孤独症的RNA生物标志物、检测试剂盒及其应用制造技术

技术编号：42981125 阅读：10 留言：0更新日期：2024-10-15 13:16

用于辅助诊断孤独症的生物标志物及检测试剂盒和应用，属于孤独症检测技术领域。本发明专利技术为解决现有技术中孤独症的诊断方法存在准确率较低、操作繁琐及耗时长的技术问题，提供一种用于辅助诊断孤独症的生物标志物及检测试剂盒，所述生物标志物包括XIST、KIF21A、IGFBP3、ITM2C、IGHM、IGLV7‑46、IGLV9‑49、IGHV3‑7、IGHV3‑21、IGLV3‑25、IGKV2‑28、IGKV1‑33基因；所述检测试剂盒包括上述基因及内参基因的引物序列。本发明专利技术提供的检测试剂盒，可应用于孤独症初步辅助诊断，在临床上可对孤独症治疗疗效进行及时评价，以及对孤独症患者病情进行动态监测。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于孤独症检测，涉及一种用于辅助诊断孤独症的生物标志物和检测试剂盒。

技术介绍

1、孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder，asd)简称孤独症，是一类以社交交流障碍、兴趣或活动范围狭窄以及重复刻板行为为主要特征的神经发育障碍性疾病。通常在婴幼儿期起病，并可伴随患者终生。流行病学调查数据显示，在全球范围内孤独症患病率呈现显著的上升趋势，已经成为世界上人数增长最快的严重疾病。根据美国cdc最新(2023)的报道显示，孤独症患病率已高达1/36，我国首次报道的6-10岁儿童孤独症患病率已达1.0％。目前，孤独症病因及发病机制尚不清楚，也无特效药物可以治愈。asd致残率高，预后较差，给患儿家庭带来沉重的精神压力和家庭经济负担，因此，该病引起了全社会的广泛关注。

2、越来越多研究发现，早期发现、早期诊断、早期行为康复和教育训练可显著改善孤独症患儿的不良预后。目前，asd尚无有效的药物或方法彻底治愈，只能通过一些药物或方法缓解患者的核心症状，通过早期干预训练提升患者神经系统发展、生活自理能力和社会交往能力，从而提高生存质量。因此，及早发现病症，早期诊断，有助于早期采取干预措施。

3、孤独症的诊断目前较为普遍的方法是采用儿童孤独症评定量表来进行诊断，该表是1980年由e.schopler.r.j.reichler和b.r.renner所编制的，儿童孤独症评定量表是根据儿童的表现，对儿童的人际关系、模仿(词和动作)情感反应、躯体应用能力、与非生命物体的关系、对环境变化的适应、视觉反应、

技术实现思路

1、本专利技术为了解决现有技术中孤独症的诊断方法受主观经验的影响，存在诊断准确率较低、操作繁琐及耗时长的技术问题，提供了一种用于辅助诊断孤独症的rna生物标志物、检测试剂盒及其应用。

2、本专利技术的目的之一在于提供xist、kif21a、igfbp3、itm2c、ighm、iglv7-46、iglv9-49、ighv3-7、ighv3-21、iglv3-25、igkv2-28、igkv1-33基因作为鉴别孤独症的rna生物标志物中的应用。

3、本专利技术的目的之二在于提供xist、kif21a、igfbp3、itm2c、ighm、iglv7-46、iglv9-49、ighv3-7、ighv3-21、iglv3-25、igkv2-28、igkv1-33基因在制备孤独症基因诊断产品中的应用。

4、在本专利技术的一种优选实施例中，所述xist基因id为ensg00000229807.11；所述kif21a基因id为ensg00000139116.18；所述igfbp3基因id为ensg00000146674.15；所述itm2c基因id为ensg00000135916.16；所述ighm基因id为ensg00000211899.10；所述iglv7-46基因id为ensg00000211649.3；所述iglv9-49基因id为ensg00000223350.2；所述ighv3-7基因id为ensg00000223350.2；所述ighv3-21基因id为ensg00000211947.2；所述iglv3-25基因id为ensg00000211659.2；所述igkv2-28基因id为ensg00000244116.3；所述igkv1-33基因id为ensg00000242076.1；所述基因id来源于h19基因库。

5、本专利技术的目的之三在于提供一种用于孤独症辅助诊断的检测试剂盒，所述检测试剂盒中包括检测xist、kif21a、igfbp3、itm2c、ighm、iglv7-46、iglv9-49、ighv3-7、ighv3-21、iglv3-25、igkv2-28、igkv1-33基因的引物组。

6、在本专利技术的一种优选实施例中，所述检测xist基因的引物组中上游引物序列为seq id no.1所示，下游引物序列为seq id no.2所示；所述检测kif21a基因的引物组中上游引物序列为seq id no.3所示，下游引物序列为seq id no.4所示；所述检测igfbp3基因的引物组中上游引物序列为seq id no.5所示，下游引物序列为seq id no.6所示；所述检测itm2c基因的引物组中上游引物序列为seq id no.7所示，下游引物序列为seq id no.8所示；所述检测ighm基因的引物组中上游引物序列为seq id no.9所示，下游引物序列为seq id no.10所示；所述检测iglv7-46基因的引物组中上游引物序列为seq id no.11所示，下游引物序列为seq id no.12所示；所述检测iglv9-49基因的引物组中上游引物序列为seq id no.13所示，下游引物序列为seq id no.14所示；所述检测ighv3-7基因的引物组中上游引物序列为seq id no.15所示，下游引物序列为seq id no.16所示；所述检测ighv3-21基因的引物组中上游引物序列为seq id no.17所示，下游引物序列为seq idno.18所示；所述检测iglv3-25基因的引物组中上游引物序列为seq id no.19所示，下游引物序列为seq id no.20所示；所述检测igkv2-28基因的引物组中上游引物序列为seq idno.21所示，下游引物序列为seq id no.22所示；所述检测igkv1-33基因的引物组中上游引物序列为seq id no.23所示，下游引物序列为seq id no.24所示。

7、在本专利技术的一个优选实施例中，所述检测试剂盒中还包括rna提取试剂，cdna逆转录试剂，sybr green pcr master mix，灭菌水。

8、在本专利技术的一个优选实施例中，所述检测试剂盒中还包括检测内参基因的引物组。

9、在本专利技术的一个优选实施例中，所述的内参基因为gapdh，所述内参基因的引物组序列为seq id no.25和seq id no.26所示。

10、本专利技术的目的之四在于提供上述检测试剂盒的非诊断目的使用方法，所述使用方法包括以下步骤：先提取待测血液样本总rna，再进行逆转录获得cdna，所得产物加入到检测试剂盒中，然后进行qpcr，从而检测xist、kif21a、igfbp3、itm2c、ighm、iglv7-46、iglv9-4本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.XIST、KIF21A、IGFBP3、ITM2C、IGHM、IGLV7-46、IGLV9-49、IGHV3-7、IGHV3-21、IGLV3-25、IGKV2-28、IGKV1-33基因作为鉴别孤独症的RNA生物标志物中的应用。

2.XIST、KIF21A、IGFBP3、ITM2C、IGHM、IGLV7-46、IGLV9-49、IGHV3-7、IGHV3-21、IGLV3-25、IGKV2-28、IGKV1-33基因在制备孤独症辅助诊断产品中的应用。

3.根据权利要求1至2任一项所述的应用，其特征在于，所述XIST基因ID为ENSG00000229807.11；所述KIF21A基因ID为ENSG00000139116.18；所述IGFBP3基因ID为ENSG00000146674.15；所述ITM2C基因ID为ENSG00000135916.16；所述IGHM基因ID为ENSG00000211899.10；所述IGLV7-46基因ID为ENSG00000211649.3；所述IGLV9-49基因ID为ENSG00000223350.2；所述IGHV3-

4.一种用于孤独症辅助诊断的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括检测XIST、KIF21A、IGFBP3、ITM2C、IGHM、IGLV7-46、IGLV9-49、IGHV3-7、IGHV3-21、IGLV3-25、IGKV2-28、IGKV1-33基因的引物组。

5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测XIST基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.1所示，下游引物序列为SEQ ID NO.2所示；所述检测KIF21A基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.3所示，下游引物序列为SEQ ID NO.4所示；所述检测IGFBP3基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.5所示，下游引物序列为SEQ ID NO.6所示；所述检测ITM2C基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.7所示，下游引物序列为SEQID NO.8所示；所述检测IGHM基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.9所示，下游引物序列为SEQ ID NO.10所示；所述检测IGLV7-46基因的引物组中上游引物序列为SEQ IDNO.11所示，下游引物序列为SEQ ID NO.12所示；所述检测IGLV9-49基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.13所示，下游引物序列为SEQ ID NO.14所示；所述检测IGHV3-7基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.15所示，下游引物序列为SEQ ID NO.16所示；所述检测IGHV3-21基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.17所示，下游引物序列为SEQ IDNO.18所示；所述检测IGLV3-25基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.19所示，下游引物序列为SEQ ID NO.20所示；所述检测IGKV2-28基因的引物组中上游引物序列为SEQ IDNO.21所示，下游引物序列为SEQ ID NO.22所示；所述检测IGKV1-33基因的引物组中上游引物序列为SEQ ID NO.23所示，下游引物序列为SEQ ID NO.24所示。

6.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中还包括RNA提取试剂，cDNA逆转录试剂，SYBR Green PCR Master Mix，灭菌水。

7.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中还包括检测内参基因的引物组。

8.根据权利要求7所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的内参基因为GAPDH，所述内参基因的引物组序列为SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26所示。

9.权利要求4至8任意一项所述用于孤独症辅助诊断的检测试剂盒的非诊断目的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括以下步骤：先提取待测血液样本总RNA，再进行逆转录获得cDNA，所得产物加入到试剂盒中，然后进行qPCR，从而检测XIST、KIF21A、IGFBP3、ITM2C、IGHM、IGLV7-46、IGLV9-49、IGHV3-7、IGHV3-21、IGLV3-25、IGKV2-28、IGKV1-33基因的相对表...

【技术特征摘要】

1.xist、kif21a、igfbp3、itm2c、ighm、iglv7-46、iglv9-49、ighv3-7、ighv3-21、iglv3-25、igkv2-28、igkv1-33基因作为鉴别孤独症的rna生物标志物中的应用。

2.xist、kif21a、igfbp3、itm2c、ighm、iglv7-46、iglv9-49、ighv3-7、ighv3-21、iglv3-25、igkv2-28、igkv1-33基因在制备孤独症辅助诊断产品中的应用。

3.根据权利要求1至2任一项所述的应用，其特征在于，所述xist基因id为ensg00000229807.11；所述kif21a基因id为ensg00000139116.18；所述igfbp3基因id为ensg00000146674.15；所述itm2c基因id为ensg00000135916.16；所述ighm基因id为ensg00000211899.10；所述iglv7-46基因id为ensg00000211649.3；所述iglv9-49基因id为ensg00000223350.2；所述ighv3-7基因id为ensg00000223350.2；所述ighv3-21基因id为ensg00000211947.2；所述iglv3-25基因id为ensg00000211659.2；所述igkv2-28基因id为ensg00000244116.3；所述igkv1-33基因id为ensg00000242076.1；

4.一种用于孤独症辅助诊断的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括检测xist、kif21a、igfbp3、itm2c、ighm、iglv7-46、iglv9-49、ighv3-7、ighv3-21、iglv3-25、igkv2-28、igkv1-33基因的引物组。

5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测xist基因的引物组中上游引物序列为seq id no.1所示，下游引物序列为seq id no.2所示；所述检测kif21a基因的引物组中上游引物序列为seq id no.3所示，下游引物序列为seq id no.4所示；所述检测igfbp3基因的引物组中上游引物序列为seq id no.5所示，下游引物序列为seq id no.6所示；所述检测itm2c基因的引物组中上游引物序列为seq id no.7所示，下游引物序列为seqid no.8所示；所述检测ighm基因的引物组中上游引物序列为seq id no.9所示，下游引物序列为seq id ...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹明扬，郭佩雯，杜蔡瑶，高雅，杨森，
申请(专利权)人：哈尔滨医科大学，
类型：发明
国别省市：

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