【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学测定，尤其是一种用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒及测定tps的方法。
技术介绍
1、癌症是工业世界的主要死因之一。为了改善对病人的护理，目前人们正努力寻找更多与预后、治疗反应的早期迹象和疾病进展有关的信息。因此，肿瘤标志物可做为一类有意义的物质来表明体内可能存在的肿瘤。肿瘤标志物可以是肿瘤分泌的一种物质，也可以是人体对肿瘤存在的一种特定反应。理想情况下，这类生物标志物应在体液（如尿液、血液或血清）中进行检测。
2、所有真核细胞都有细胞质的细胞骨架结构，即由包括细胞角蛋白在内的各种中间丝蛋白组成的中间丝。细胞骨架网络负责细胞的机械完整性，在细胞分裂、运动和细胞间接触等细胞过程中至关重要。目前已发现20多种不同的细胞角蛋白，其中细胞角蛋白8、18和19在简单上皮细胞中含量最高。细胞角蛋白具有上皮细胞特异性，在正常细胞转变为恶性细胞的过程中，细胞角蛋白模式通常会保留下来。细胞角蛋白从增殖或凋亡的细胞中释放出来时，可作为上皮恶性肿瘤的有用标志物，明显反映细胞的持续活动。
3、测定体液中可溶性细胞角蛋白片段的临床价值在于早期发现上皮细胞癌的复发和快速评估治疗反应的疗效。临床上应用最多的三种细胞角蛋白标记物是组织多肽抗原tpa、组织多肽特异性抗原tps和cyfra21-1。细胞角蛋白肿瘤标志物可以先于传统方法准确预测疾病状态，并为更有效的管理提供了一种简单、无创、廉价和可靠的工具。
4、美国专利us 10,386,363公开了一种检测样品中至少两种细胞角蛋白8、18和19的
技术实现思路
1、为了克服上述现有问题的不足，本专利技术提供了一种用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒及测定tps的方法。
2、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，包括：
3、抗试剂a，其有效成分为第一免疫复合物，所述第一免疫复合物为碱性磷酸酶alp标记的第一单克隆抗体，所述第一单克隆抗体与细胞角蛋白18的m3表位特异性结合，该表位由seq id no:1中定义的氨基酸序列nslrevearyalqmeqlng组成；
4、抗试剂b，其有效成分为第二免疫复合物，所述第二免疫复合物为异硫氰酸荧光素fitc标记的第二单克隆抗体，所述第二单克隆抗体与细胞角蛋白18的m21表位特异性结合，该表位由seq id no:2中定义的氨基酸序列vdgkvvsetndtkvlr组成；
5、磁微粒试剂，其有效成分为羊抗fitc磁珠作为固相载体使用；
6、及碱性磷酸酶底物。
7、根据本专利技术的另一个实施例，所述第二免疫复合物包括与第一单克隆抗体和第二单克隆抗体中的另一个缀合的捕获配体，其中所述固相载体包括特异性结合捕获配体的固定化捕获抗体。
8、根据本专利技术的另一个实施例，所述第二免疫复合物包括与第一单克隆抗体和第二单克隆抗体中的另一个缀合的异硫氰酸荧光素（fitc），所述固相载体包括特异性结合fitc的固定化羊抗fitc抗体。
9、根据本专利技术的另一个实施例，所述固相载体包括磁珠。
10、根据本专利技术的另一个实施例，所述第一免疫复合物包括第一单克隆抗体，第二免疫复合物包括第二单克隆抗体。
11、根据本专利技术的另一个实施例，进一步包括，所述第一单克隆抗体还包括：
12、如seq id no:3中所定义的氨基酸序列nytih的vh结构域互补决定区cdr1；
13、如seq id no:4中所定义的氨基酸序列yfnpssgynnynqkfrd的vh结构域互补决定区cdr2；
14、如seq id no:5中所定义的氨基酸序列lippfty的vh结构域互补决定区cdr3；
15、如seq id no:6中所定义的氨基酸序列rasesvdnygisfmn的vl结构域互补决定区cdr1；
16、如seq id no:7中所定义的氨基酸序列aaskegs的vl结构域互补决定区cdr2；
17、及如seq id no:8中所定义的氨基酸序列lqskevpft的vl结构域互补决定区cdr3。
18、根据本专利技术的另一个实施例，所述第一单克隆抗体还包括：
19、如seq id no:9中所定义的氨基酸序列的vh结构域；
20、和/或如seq id no:10中所定义的氨基酸序列的vl结构域。
21、根据本专利技术的另一个实施例，所述第一单克隆抗体还包括：
22、如seq id no:11中所定义的氨基酸序列的重链；
23、和/或如seq id no:12中所定义的氨基酸序列的轻链。
24、根据本专利技术的另一个实施例，所述第二单克隆抗体还包括：
25、如seq id no:13中所定义的氨基酸序列sfwmn的vh结构域互补决定区cdr1；
26、如seq id no:14中所定义的氨基酸序列mlqpadnetkinqklkd的vh结构域互补决定区cdr2；
27、如seq id no:15中所定义的氨基酸序列ggvvtsywyfdv的vh结构域互补决定区cdr3；
28、如seq id no:16中所定义的氨基酸序列kasqdvgtava的vl结构域互补决定区cdr1；
29、如seq id no:17中所定义的氨基酸序列wastrht的vl结构域互补决定区cdr2；
30、及如seq id no:18中所定义的氨基酸序列qqfsrypvt的vl结构域互补决定区cdr3。
31、根据本专利技术的另一个实施例，所述第二单克隆抗体还包括：
32、如seq id no:19中所定义的氨基酸序列的vh结构域；
33、和/或如seq id no:20中所定义的氨基酸序列的vl结构域。
34、根据本专利技术的另一个实施例，所述第二单克隆抗体包括：
35、如seq id no:21中所定义的氨基酸序列的重链；
36、和/或如seq id no:22中所定义的氨基酸序列的轻链。
37、根据本专利技术的另一个实施例，进一步包括，所述碱性磷酸酶底物为aps-5、amppd、pnpp、abts、邻苯二本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，包括：
2.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，所述第二免疫复合物包括与第一单克隆抗体和第二单克隆抗体中的另一个缀合的捕获配体，其中所述固相载体包括特异性结合捕获配体的固定化捕获抗体。
3.根据权利要求2所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，所述第二免疫复合物包括与第一单克隆抗体和第二单克隆抗体中的另一个缀合的异硫氰酸荧光素（FITC），所述固相载体包括特异性结合FITC的固定化羊抗FITC抗体。
4.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，所述磁珠为羊抗FITC磁珠。
5.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，所述第一单克隆抗体还包括：
6.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，所述第二单克隆抗体还包括：
7.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测
8.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，还包括底物缓冲液，所述底物缓冲液包括0.1-1.0M的Tris、0.1-0.5%的亚硫酸钠、0.5-2.0%的十二烷基硫酸钠及0.15-0.5％的牛血清白蛋白，其pH9.0-10.0。
9.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，还包括校准品，所述校准品标准品包括摩尔比为1:1的重组人细胞角蛋白8和重组人细胞角蛋白18。
10.根据权利要求1所述的用于测定TPS的化学发光免疫测定CLIA试剂盒，其特征是，还包括抗体缓冲溶液，所述抗体缓冲溶液包括磷酸盐缓冲液、约1%的牛血清白蛋白、约1%的牛IgG及0.05%的防腐剂，其pH7.0。
11.一种测定TPS的方法，其特征是，使用权利要求1-10任一项所述的CLIA试剂盒，且包括如下步骤：
12.根据权利要求11所述的测定TPS的方法，其特征是，
13. 根据权利要求11所述的测定TPS的方法，其特征是， S2包括，将结合后的磁珠暴露在磁场中，磁场吸附磁珠，再将上清液去除。
...【技术特征摘要】
1.一种用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，其特征是，包括：
2.根据权利要求1所述的用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，其特征是，所述第二免疫复合物包括与第一单克隆抗体和第二单克隆抗体中的另一个缀合的捕获配体，其中所述固相载体包括特异性结合捕获配体的固定化捕获抗体。
3.根据权利要求2所述的用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，其特征是，所述第二免疫复合物包括与第一单克隆抗体和第二单克隆抗体中的另一个缀合的异硫氰酸荧光素（fitc），所述固相载体包括特异性结合fitc的固定化羊抗fitc抗体。
4.根据权利要求1所述的用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，其特征是，所述磁珠为羊抗fitc磁珠。
5.根据权利要求1所述的用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，其特征是，所述第一单克隆抗体还包括：
6.根据权利要求1所述的用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，其特征是，所述第二单克隆抗体还包括：
7.根据权利要求1所述的用于测定tps的化学发光免疫测定clia试剂盒，其特征是，所述碱性磷酸酶底物为aps-5、amppd、pnpp、abts、邻苯二胺或...
【专利技术属性】
技术研发人员：夏振伟，刘振世，薛玲，基兰·贾加拉穆迪，
申请(专利权)人：泰州泽成生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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