【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于检测，涉及一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒和方法。
技术介绍
1、在医学检验中，与健康状态相关的微量元素元素种类繁多，包括营养性元素与中毒性元素。同时对多种微量元素，尤其是10种以上微量元素同时定量检测，有助于同时评估人体综合营养元素缺乏状态或中毒元素暴露情况。
2、在医学检验领域，血细胞、血浆和尿作为医学检验中常用的三种标本，三者之间基质差异巨大，不同标志物或同一标志物在不同疾病之间，这三种标本均具有显著差异的检测特异度或灵敏度。不同微量元素，在血细胞、血浆和尿中的稳态和代谢路径差异巨大，使得不同的微量元素在血细胞、血浆和尿中具有不同的浓度以及半衰期，因而具有不同检测特异性。比如，铜主要分布在血清中，铁主要分布在红细胞中，重金属如铅、汞等也主要蓄积在血细胞中，另外，血浆，血细胞以及尿标本具有不同的组成成分和分布，不同标本类型基质差异巨大，金属元素的形态以及检测时受到的干扰差别巨大。因此，同时对多种标本类型同时检测，相互比较和印证，有利于对微量元素体内状态进行综合、准确判断。
3、目前市面上没有针对血细胞微量元素检测的试剂盒，而对于血清/血浆和尿微量元素检测，目前市面上的试剂盒，主要是单一前处理步骤和单一标准曲线配制方法，缺乏分别针对血浆和尿标本进行设计和优化，事实上，仅使用单一的样本前处理和标准曲线组合的试剂盒，在同时进行血浆或尿标本金属元素检测，无法满足临床多种标本检测需求。
4、另一方面，如果使用血浆和尿的两种试剂盒进行直接组合使用，则会
5、因此，有必要开发一种具有较高的灵敏度、准确性及精密度，检测性能优异的用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒和方法。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，使用最小的试剂组合，最大化地实现同时对血细胞、血浆和尿15种金属元素的进行检测，微量元素检测结果更丰富，减少批次差异，增加检测效率，降低成本，使得检测结果更具有标本类型间的可比性和信息完整性。该试剂盒适用于血浆、血细胞、尿液等多种样本类型，样品前处理简单，成本低廉、准确度和精密度高，适合于临床高通量样本的检测。
2、本专利技术通过以下技术方案实现：
3、在本专利技术的第一方面，提供了一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，所述试剂盒包括：
4、样本稀释液；
5、内标液：终浓度为100±10ug/l内标元素的水溶液，所述内标元素含有bi,ge72,in115,li6,lu175,rh,sc45,tb；
6、标准曲线工作液：包含17个工作液，分为c0-c16工作液，具体如下：
7、c0-c5工作液：用0.1±0.02％ hno3将多元素混合标准品原液依次稀释为0，0.04，0.2，1，5，20ug/l；
8、c6-c8工作液：用0.1％±0.02hno3/200ppb au将汞单元素标准品原液依次稀释为0.04，0.2，1.0ug/l；
9、c9-c12工作液：用0.1％±0.02hno3将铜，锌，钙，铁，镁单元素标准品原液分别依次稀释为具有浓度梯度的铜，锌，钙，铁，镁的稀释液，其中铜和锌的浓度梯度均为4，20，100，500ug/l；钙和镁的浓度梯度为1，2，4，8mg/l；铁的浓度梯度为5，10，20，40mg/l；
10、c13-c16工作液：用0.1％±0.02hno3将铜，锌，钙，铁，镁单元素标准原液分别依次稀释为具有浓度梯度的铜，锌，钙，铁，镁的稀释液，其中铜、锌和铁的浓度梯度均为4，20，100，500ug/l；钙和镁的浓度梯度均为1，2，4，8mg/l；
11、质控品：包括血浆质控品、血细胞质控品和尿液质控品。
12、在本专利技术的第二方面，提供了一种采用所述试剂盒对血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素进行定量检测的方法，所述方法包括：
13、对待测样本和质控品加入样本稀释液混匀进行前处理，与标准曲线工作液c0-c16在同一个批次内采用电感耦合等离子质谱仪进行检测，通过建立标准曲线工作液，分别计算血细胞、血浆和尿中15种金属元素浓度；
14、其中，计算金属元素浓度时，血细胞标本使用标准曲线工作液c0-c12；尿液标本使用标准曲线工作液c0-c8及c13-c16(仅钙、镁)；血浆样本使用标准曲线工作液c0-c8及c13-c16。
15、进一步地，所述电感耦合等离子质谱仪的参数包括：rf功率1550w，雾化气流速15l/min，载气流速0.95l/min，稀释气流速0.25l/min，雾化室冷却温度2℃，扫描叠加100。
16、进一步地，所述检测模式分为动态反应池，即碰撞气模式(氦，5ml/min)和标准模式(无气体)；
17、采用动态反应池模式的元素包括镁，钙，铬，锰，铁，钴，镍，铜，锌，砷，硒；
18、采用标准模式的元素包括镉，汞，铊，铅。
19、上述技术方案中15种金属元素的标准曲线(以血标本为例)分别见图1-图3所示，将检测的各元素的相应值(cps)带入所述标准曲线即可对所述15种金属元素进行定量。
20、本专利技术实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：
21、1、本专利技术提供的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒和方法，可同时快速定量检测血细胞、血浆和尿液中15种微量元素：镁、钙、铬、锰、铁、钴、镍、铜、锌、砷、硒、镉、汞、铊和铅，这对于综合、系统评估人体内金属元素状态具有重要临床价值。目前市场上检测试剂盒都是一种前处理方法和一种标准曲线配制方法，无法满足多标本检测需求，而若将针对血浆、血细胞和尿的几个试剂直接组合后的技术难题是无法实现同时检测，本申请人通过了技术改进：调整标准品(15种元素用了混合标准品+5个单标准品来配)和稀释倍数解决了这个难题。
22、2、本试剂盒试剂组成包括:样本稀释液，内标液，标准曲线液和质控品4种试剂。试剂盒配制简单，并且成本相对低廉，成本主要来自于金属元素标准品，由于我们对于痕量微量元素，如铬、锰、钴、镍、砷、硒、镉、汞、铊、铅等，采用了混合多元素标准品进行试剂盒制备，相比单元素标准品，不仅成本低廉，更减少了制备过程的批次效应和制备误差。
23、3、目前市面上缺乏同时准确测定血细胞、血浆和尿液中的超过10种以上的微量元素，且对某些元素测定检测限或性能达不到指标要求、检测准确性低、干扰严重。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
2.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液：以质量分数计包括0.1％HNO3、0.1％TrionX-100、200ppb Au。
3.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述标准曲线工作液，元素包含：铬、锰、钴、镍、铁、铜、锌、钙、镁、砷、硒、镉、汞、铊、铅。
4.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述血浆质控品采用由15种元素的标准物质和正常的人血浆混合池配制而成。
5.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述血细胞质控品采用由15种元素的标准物质和正常的人抗凝全血提取血细胞混合池配制而成。
6.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆
7.一种采用权利要求1-6所述试剂盒对血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素进行定量检测的方法，其特征在于，所述方法包括：
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述电感耦合等离子质谱仪的参数包括：RF功率1550W，雾化气流速15L/min，载气流速0.95L/min，稀释气流速0.25L/min，雾化室冷却温度2℃，扫描叠加次数100。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述电感耦合等离子质谱仪的检测模式分为动态反应池，即碰撞气模式(氦，5mL/min)和标准模式(无气体)；
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述通过建立标准曲线工作液，分别计算血细胞、血浆和尿中15种金属元素浓度，具体包括：
...【技术特征摘要】
1.一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
2.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液：以质量分数计包括0.1％hno3、0.1％trionx-100、200ppb au。
3.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述标准曲线工作液，元素包含：铬、锰、钴、镍、铁、铜、锌、钙、镁、砷、硒、镉、汞、铊、铅。
4.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述血浆质控品采用由15种元素的标准物质和正常的人血浆混合池配制而成。
5.根据权利要求1所述的一种用于快速定量血细胞、血浆和尿三种标本类型的15种金属元素的试剂盒，其特征在于，所述血细胞质控品采用由15种元素的标准物质和正常的人抗凝全...
【专利技术属性】
技术研发人员：曾浩龙，程黎明，陆捷，李辉军，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属同济医院，
类型：发明
国别省市：
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