【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于牛黄体内培植的，具体涉及一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法。
技术介绍
1、牛黄是脊索动物门哺乳纲牛科动物牛肝脏的胆结石。在胆囊中产生的称“胆黄”或“蛋黄”，在胆管中产生的称“管黄”，在肝管中产生的称“肝黄”。传统的人工牛黄在制造过程中牛黄的成形差，牛黄的制造质量低，主要原因包括：无额外注入的大肠杆菌使牛的胆囊或胆管发生细菌或寄生虫感染，无法形成持续有效的牛黄小颗粒；其次，牛黄小颗粒形成时无相应结构对这些小颗粒进行富集，导致牛黄核心成型速度极慢，最终的牛黄成品不是很少就是没有。为此，需要借助牛黄床，牛黄床(核心)的制作是牛黄生成的基质，是牛黄培植的关键。
2、现有专利cn202210870068.x公开了三维复合牛黄体内培植方法，包括如下步骤，s1：植入牛黄床，s2：植入牛黄菌，s3：饲养，s4：添加剂添加进行饲养；该三维复合牛黄体内培植方法。具有附着性更好的特点，更容易聚集胆汁中的游离胆盐颗粒。现有专利cn202010124954.9公开了一种可拆卸牛黄床及牛黄培植方法，可拆卸牛黄床包括网格状骨架和吸附薄膜，吸附薄膜设置在骨架内表面，骨架从上到下依次包括上盖、床体和下盖，上盖、床体和下盖相互之间活动连接，上盖、床体和下盖内均设置有相匹配的孔隔，骨架侧面设置有缓冲层。然而，上述公开的牛黄床具有以下缺陷：
3、①牛黄床的骨架结构固定，整体外形不可变，植入牛体内时需要切割的创口比较大，不利于牛体健康的恢复。在进行样胆囊插管植黄床手术时，切口一般需要10cm；三维复合牛黄体内培植方法采用开腹手术
4、②主体组合式连接结构的牛黄床整体稳定性较差，当黄床主体内部胆汁硬化结块后，产生的膨胀可能导致连接件松动失效，进一步导致牛黄床组件脱离，影响植体牛的健康；
5、③牛黄床中的多层结构容易导致胆汁流动受阻，很难穿过黄床内部，且牛黄的收集方式为单向收集，会导致牛黄小颗粒的大量流失，培植的牛黄质量差。
6、现有专利cn118020715 a公开了一种牛黄体内培植方法，包括：用注射器对牛胆囊进行穿刺，抽离胆汁；步骤二、抽离胆汁后，先注射钙盐溶液至胆囊，然后立刻注射多糖溶液至胆囊，使两种溶液在胆囊内产生交联反应，形成网状凝胶状牛黄床；本专利技术采用注射方式在牛胆囊内生产有机牛黄床，在胆囊内有很好的吸附性，有利于牛黄晶体的吸附，缩短牛黄生产周期，有效解决了以往手术植入牛黄床对牛的刺激，牛黄吸附性差，手术感染造成疾病的各种问题。然而，由于牛胆囊内的液体是动态的，该方法无法保证在牛胆囊内可以稳定的形成网状凝胶状牛黄床，其次，钙盐和多糖溶液生成弱凝胶，生成的网状凝胶状牛黄床的交联度以及网络结构不可控，无法满足在形成牛黄初始核心期间不降解。该方法也无法保证形成形状规则的牛黄床，很难达到一般牛黄床的富集效果。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，旨在解决上述的问题。本专利技术可以适用于牛、羊等动物体内结石或者结晶的富集成型。
2、本专利技术主要通过以下技术方案实现：
3、一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，包括以下步骤：
4、步骤s1：制备常温下可注射的温敏性聚丙烯酰胺水凝胶；
5、步骤s2：将牛黄床植入到牛胆囊内；
6、步骤s3：将所述步骤s1制备的温敏性聚丙烯酰胺水凝胶与牛黄转化菌混合，并注射导入牛黄床内；
7、或者先将所述步骤s1制备的温敏性聚丙烯酰胺水凝胶注射导入牛黄床内，然后，将牛黄转化菌注射导入牛黄床内；
8、步骤s4：进行正常饲养。
9、为了更好地实现本专利技术，进一步地，所述步骤s1中，采用n-异丙基丙烯酰胺、丙烯酰胺和n,n′-亚甲基双丙烯酰胺聚合反应，得到常温下可注射的温敏性聚丙烯酰胺水凝胶；所述n-异丙基丙烯酰胺和丙烯酰胺的摩尔比为10-3：1；所述n,n′-亚甲基双丙烯酰胺的含量为单体总摩尔数的1％-2％。
10、为了更好地实现本专利技术，进一步地，所述步骤s1包括以下步骤：
11、步骤s11：将n-异丙基丙烯酰胺、丙烯酰胺、n,n′-亚甲基双丙烯酰胺和表面活性剂加入反应器中搅拌溶解；
12、步骤s12：在惰性气体环境中加热到40-80℃，然后，在反应器中加入引发剂，反应得到凝胶分散水溶液。
13、为了更好地实现本专利技术，进一步地，在50ml的溶液中，所述n-异丙基丙烯酰胺、丙烯酰胺和n,n′-亚甲基双丙烯酰胺的用量分别为42mmol、7.4mmol和0.53mmol；所述引发剂为过硫酸钾，所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠，所述十二烷基硫酸钠和过硫酸钾的用量分别为0.08g和0.22g。
14、为了更好地实现本专利技术，进一步地，所述步骤s1还包括步骤s13：在步骤s12制备的凝胶分散水溶液中加入海藻酸钠以及相容单体和/或相容剂，混合搅拌均匀；然后，加入黏蛋白和牛黄转化菌的营养物质，混合搅拌均匀，得到可注射的凝胶水溶液；所述步骤s3中，先将步骤s13制备的可注射的凝胶水溶液导入牛黄床，然后，将牛黄转化菌和钙盐溶液注射导入牛黄床内。
15、为了更好地实现本专利技术，进一步地，所述步骤s1还包括步骤s13：在步骤s12制备的凝胶分散水溶液中加入海藻酸钠以及相容单体和/或相容剂，混合搅拌均匀；然后，加入牛黄转化菌以及黏蛋白、牛黄转化菌的营养物质，混合搅拌均匀，得到可注射的凝胶水溶液；所述步骤s3中，先将步骤s13制备的可注射的凝胶水溶液导入牛黄床，然后，将钙盐溶液注射导入牛黄床内。
16、为了更好地实现本专利技术，进一步地，所述步骤s13中，所述相容单体、相容剂、海藻酸钠和钙盐的摩尔比为0.01-0.1：0.015-0.2：1-20：0.5-5；所述相容单体为多巴胺、单宁酸、花青素、儿茶素、木质素中的任意一种或者多种，所述相容剂为聚乙烯醇、聚乙二醇、淀粉、纤维素中的任意一种或者多种。
17、为了更好地实现本专利技术，进一步地，所述相容单体为单宁酸，所述相容剂为聚乙烯醇，且聚乙烯醇的型号为1788型，所述钙盐为乳酸钙；在50ml的溶液中，所述单宁酸、聚乙烯醇、海藻酸钠和乳酸钙的用量分别为0.044mmol、0.067mmol、8.7mmol和2.3mmol。
18、为了更好地实现本专利技术，进一步地，所述步骤s2中，所述牛黄床为可压缩结构，将压缩状态的牛黄床植入到牛胆囊内，牛胆囊内的牛黄床处于膨胀状态。
19、为了更好地实现本专利技术，进一步地，采用微创的形式将压缩状态的牛黄床植入到牛胆囊内。本专利技术可以将压缩状态的牛黄床以微创的方式植入到牛胆囊内，所述微创的植入方式为现有技术，具体可以选择内本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤S1中，采用N-异丙基丙烯酰胺、丙烯酰胺和N,N´-亚甲基双丙烯酰胺聚合反应，得到常温下可注射的温敏性聚丙烯酰胺水凝胶；所述N-异丙基丙烯酰胺和丙烯酰胺的摩尔比为10-3：1；所述N,N´-亚甲基双丙烯酰胺的含量为单体总摩尔数的1%-2%。
3.根据权利要求2所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤S1包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤S1还包括步骤S13：在步骤S12制备的凝胶分散水溶液中加入海藻酸钠以及相容单体和/或相容剂，混合搅拌均匀；然后，加入黏蛋白和牛黄转化菌的营养物质，混合搅拌均匀，得到可注射的凝胶水溶液；所述步骤S3中，先将步骤S13制备的可注射的凝胶水溶液导入牛黄床，然后，将牛黄转化菌和钙盐溶液注射导入牛黄床内。
5.根据权利要求3所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征
6.根据权利要求4或5所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤S13中，所述相容单体、相容剂、海藻酸钠和钙盐的摩尔比为0.01-0.1：0.015-0.2：1-20：0.5-5；所述相容单体为多巴胺、单宁酸、花青素、儿茶素、木质素中的任意一种或者多种，所述相容剂为聚乙烯醇、聚乙二醇、淀粉、纤维素中的任意一种或者多种。
7.根据权利要求1所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述牛黄床为可压缩结构，将压缩状态的牛黄床植入到牛胆囊内，牛胆囊内的牛黄床处于膨胀状态。
8.根据权利要求7所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述牛黄床包括黄床主体（1）和盖体（2）以及弹性骨架（3），所述黄床主体（1）的两端分别沿周向设置有波浪状的弹性骨架（3），所述黄床主体（1）为镂空结构，且黄床主体（1）的两端端部分别设置有柔性的盖体（2），所述盖体（2）的中部设置有流动孔（4）。
9.根据权利要求8所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述黄床主体（1）由纱网制备得到，所述盖体（2）由PET网布制备得到，所述弹性骨架（3）由形状记忆合金制备得到。
10.根据权利要求7-9任一项所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，采用微创的形式将压缩状态的牛黄床植入到牛胆囊内。
...【技术特征摘要】
1.一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤s1中，采用n-异丙基丙烯酰胺、丙烯酰胺和n,n´-亚甲基双丙烯酰胺聚合反应，得到常温下可注射的温敏性聚丙烯酰胺水凝胶；所述n-异丙基丙烯酰胺和丙烯酰胺的摩尔比为10-3：1；所述n,n´-亚甲基双丙烯酰胺的含量为单体总摩尔数的1%-2%。
3.根据权利要求2所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤s1包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤s1还包括步骤s13：在步骤s12制备的凝胶分散水溶液中加入海藻酸钠以及相容单体和/或相容剂，混合搅拌均匀；然后，加入黏蛋白和牛黄转化菌的营养物质，混合搅拌均匀，得到可注射的凝胶水溶液；所述步骤s3中，先将步骤s13制备的可注射的凝胶水溶液导入牛黄床，然后，将牛黄转化菌和钙盐溶液注射导入牛黄床内。
5.根据权利要求3所述的一种基于温敏性凝胶的牛黄体内培植方法，其特征在于，所述步骤s1还包括步骤s13：在步骤s12制备的凝胶分散水溶液中加入海藻酸钠以及相容单体和/或相容剂，混合搅拌均匀；然后，加入牛黄转化菌以及黏蛋白、牛黄转化菌的营养物质，混合搅拌均匀，得到可注射的凝胶水溶液；所述步骤s3中，先将步骤s13制备的可注射的凝胶水溶液导入牛黄...
【专利技术属性】
技术研发人员：张轶，刘英，奉天一，赵凡瑜，尹思淼，
申请(专利权)人：四川微流控科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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