System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法技术_技高网
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一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法技术

技术编号:42955484 阅读:14 留言:0更新日期:2024-10-11 16:13
本发明专利技术提供一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法,具体步骤如下:S1:配制混合标准储备液;S2:配制内标混合液;S3:绘制标准曲线;S4:样品前处理:取血清于玻璃试管中,依次加入内标混合液、甲酸以及乙腈,涡旋混匀后离心,分离得到上清液和残余部分;转移上清液于另一玻璃试管中,再向残余部分加入乙腈,离心后取上清液;合并上清液后进行氮吹浓缩,加乙腈水溶液,超声复溶,最后将复溶液通过尼龙针式滤膜转移至进样小瓶中,留待上机检测;S5:检测和结果分析:采用液相色谱‑质谱仪进行血清中有机酸磷酯含量的检测和结果分析。本发明专利技术开发的方法具有灵敏度高、定量准确、血清用量少、操作简单和分析时间短的特点,可用于人群OPEs的常规生物监测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物样品有机污染物检测,具体涉及一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法


技术介绍

1、自2003年起,作为持久性有机污染物的多溴联苯醚(polybrominated diphenylethers,pbdes)等溴化阻燃剂(brominated flame retardants,bfr)在全球范围内被逐渐限制使用,有机磷阻燃剂(organophosphorus flame retardant,opfrs)作为其主要替代品在全球的产量及用量迅速增长。2022年全球阻燃剂消费量超过270万吨,其中磷系阻燃剂占比28%,相较于2008年的11%,这个比例提升了2.5倍,opfrs在阻燃剂市场中正逐步占据主导地位,使用量急剧增加。有机磷酸酯(organophosphate esters,opes)是应用最为广泛的opfrs,同时兼有增塑及润滑的作用,被大量应用于电子设备、家装饰品、食品包装、纺织品和工程塑料等领域。opes属于添加型阻燃剂,容易在产品的生产、使用及回收过程中通过挥发、磨损、渗透和溶解等方式泄漏到环境中。目前在水、空气、灰尘、土壤及生物体等多种环境介质中均有opes的检出。大量研究显示,opes具有神经毒性、发育毒性、生殖毒性、致癌作用和内分泌干扰作用等。opes的健康风险问题正在日益凸显,这些化合物是否真的比传统溴系阻燃剂更安全也引起了广泛的思考和研究。

2、目前关于opes环境外暴露评价的研究较多,而评估人体内暴露状况的研究则相对较少。由于opes的应用场景广泛,人体的暴露途径多种多样,内暴露评估能更真实地反映人类对opes的暴露状况。考虑到多种opes在人体内代谢较快、排泄率高且肾脏是主要的排泄器官,所以很多研究以尿液中opes的二酯代谢物水平表征人体opes的暴露负荷,然而近期的研究提示血液opes水平可能是更好的内暴露评估指标,例如wang等[1]的研究显示部分芳基opes和烷基opes在体内代谢相对较快,半衰期小于10天,而氯代烷基opes的半衰期则普遍较长,如tris-chloropropyl-phosphate(tcipp)为15.2天、tris-2-chloroethyl-phosphate(tcep)为17.4天,tris-1,3-dichloro-2-propyl-phosphate(tdcipp)的半衰期甚至达到了53.8天。此外许多opes经体内代谢后可产生相同的二酯类opes,例如磷酸二苯酯(diphenyl phosphate,dphp)可由磷酸三苯酯(triphenyl phosphate,tphp)、磷酸二苯基异辛酯(diphenyl-2-ethylhexyl phosphate,ehdpp)及1,3-苯二酚双(二苯基磷酸酯)(1,3-phenylene bis(diphenyl phosphate,rdp)代谢产生。因此,对于某些opes来说,血液中的浓度水平更能准确地反映人体的累积暴露负荷。此外血液与人体各组织、器官直接接触,污染物容易由此进入组织,血液中化合物的浓度更能代表到达靶部位的剂量,为人体暴露风险评估提供更准确的基础数据。

3、目前已有部分研究对人类血液的opes进行了检测,如qiao等[2]通过索氏提取法结合固相萃取(solid phase extraction,spe)小柱对5ml血清进行预处理,并通过气相色谱-质谱仪(gas chromatography-mass spectrometer,gc-ms)测定opes。wang等[3]采用液液萃取(liquid-liquid extraction,lle)结合双固相萃取柱的预处理方式提取了1ml全血中的opes,并通过超高效液相色谱串联质谱仪(ultra high performance liquidchromatography tandem mass spectrometer,uplc-ms/ms)测定。liu等[4]开发了一种固相萃取的前处理方法,用于500μl血清中opes的提取。但是以上分析方法基本都存在血清用量大、实验成本高(固相萃取柱和大量有机溶剂的消耗等)以及预处理流程繁琐、耗时等问题。

4、基于上述问题,本专利技术提供一种更加简便和高效的人类血清中opes的检测方法,根据取代基不同,opes可分为烷基类opes、卤代类opes和芳基类opes,本专利技术在三类opes中分别选择了一些典型的opes作为研究物质。本专利技术旨在建立并验证一种预处理流程更简单,实验效率更高的人类血清中opes的检测方法。同时,我们还致力于减少血清样本的消耗量,以便更轻松地进行人群opes的暴露评估研究。

5、参考文献:

6、[1]x.wang,q.liu,w.zhong,l.yang,j.yang,a.covaci,l.zhu,estimatingrenaland hepatic clearance rates of organophosphate esters in humans:impactsof intrinsic meta bolism and binding affinity with plasma proteins,environ.int.134(2020)105321.https://doi.org/10.1016/j.envint.2019.105321.

7、[2]l.qiao,x.-b.zheng,j.zheng,w.-x.lei,h.-f.li,m.-h.wang,c.-t.he,s.-j.chen,j.-g.yuan,x.-j.luo,y.-j.yu,z.-y.yang,b.-x.mai,analysis ofhuman hair toassess exposure to organophosphate flame retardants:influence of hairsegments and gender differences,environ.res.148(2016)177-183.https://doi.org/10.1016/j.envres.2016.03.032.

8、[3]x.wang,p.chen,l.zhao,l.zhu,f.wu,transplacental behaviors oforganophos phate tri-and diesters based on paired human maternal and cordwhole blood:efficienc ies and impact factors,environ.sci.technol.55(2021)3091-3100.https://doi.org/10.1021/acs.est.0c06095.

9、[4]y.liu,y.li,n.xiao,m.liu,y.wang,h.luo,y.yao,y.feng,s.wang,seru morganophosphate flame retardants and plasticizers in chine本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法,其特征在于,具体步骤如下:

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述有机酸磷酯包括TBP、TCEP、TDCPP、TBEP、TPrP、TPhP、TCIPP、TEP和TDBPP。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S4的乙腈水溶液中乙腈和水的体积比为1:1。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述S5中液相色谱-质谱仪的液相色谱仪为Waters超高效液相色谱仪;预柱为Waters的BEH C18柱,规格为2.1mm×5mm,1.7μm;色谱柱为Waters的ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,规格为2.1mm×100mm,1.8μm;隔离柱为Waters规格为2.1mm×50mm的隔离柱;质谱仪为Waters的Xevo G2-XS四级杆-飞行时间高分辨质谱仪。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪的工作条件为:

6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述质谱仪的工作条件为:

【技术特征摘要】

1.一种检测人体血清中有机酸磷酯含量的方法,其特征在于,具体步骤如下:

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述有机酸磷酯包括tbp、tcep、tdcpp、tbep、tprp、tphp、tcipp、tep和tdbpp。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述s4的乙腈水溶液中乙腈和水的体积比为1:1。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述s5中液相色谱-质谱仪的液相色谱仪为waters超高效液相色谱仪;预柱为wat...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑唯韡杜志远胡晓华施烨闻
申请(专利权)人:复旦大学
类型:发明
国别省市:

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