【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测，特别涉及一种基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法。
技术介绍
1、对相关生物标志物的系统检测和监测，为疾病的发生、发展和治疗过程提供了必要的诊断基础。在现有检测生物标志物的方法中，免疫分析是最常用的方法之一，已被广泛用于临床检测中。免疫分析是基于抗原抗体的高专一性作用，结合了诸如放射性标记、酶催化、荧光、化学发光等的检测方法。
2、数字酶联免疫吸附法(digital elisa)可以通过读取单个蛋白质分子的信号来实现绝对计数，因而具有超高的灵敏度，从而引起广泛关注。但是，天然酶存在成本高、操作稳定性低、催化活性对环境条件的敏感性等固有缺点，因而限制了其在商业免疫分析中的应用。
3、寻找可替代天然酶的物质，克服天然酶的固有缺点，成为本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的问题和不足，本专利技术提供一种基于纳米材料的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，通过将使用纳米颗粒替换天然酶，从而解决了天然酶存在的成本高、稳定性低、对环境条件要求高的缺点，降低了免疫分析的成本，提高了免疫分析方法的稳定性，且能在更广泛的环境条件下使用。
2、具体地，本专利技术提供一种基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，所述基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法包括：
3、标记，将纳米颗粒加入含有待测复合物的第一混合溶液，在第一预设温度下孵育，得到第二混合溶液；
4、信号放大，在所述第二混合
5、计数分析，对所述待检溶液进行检测，根据所述待检溶液的检测结果绘制标准曲线，计算待测复合物中所述待测物质的含量。
6、可选地，所述待测复合物的制备包括：
7、获取第一结合体包被的载体粒子；
8、在所述第一结合体包被的载体粒子中加入待测物质，在第三预设温度下孵育，得到待测物质包被的载体粒子；
9、在所述待测物质包被的载体粒子中，加入第二结合体，在第四预设温度下孵育，得到待测复合物。
10、可选地，所述载体粒子的粒径为3～4.5um。
11、可选地，在所述的信号放大步骤中，所述标记物为荧光酪胺偶联试剂。
12、可选地，所述的在所述混合溶液中加入标记物和h2o2包括：
13、在所述混合溶液中依次加入生物素化酪胺、链霉亲和素化荧光材料和h2o2。
14、可选地，所述的在所述混合溶液中加入标记物和h2o2包括：
15、在所述混合溶液中依次加入酪胺、带羧基的荧光材料和h2o2。
16、可选地，所述纳米颗粒为普鲁士蓝粒子、四氧化三铁、氧化铜、金纳米颗粒、石墨烯等具有的纳米材料中的一种或多种。
17、可选地，所述第一预设温度为25～37℃；
18、所述第二预设温度为4～60℃；
19、所述第三预设温度为25～37℃；
20、所述第四预设温度为25～37℃。
21、可选地，所述待测物质是抗体、小分子化合物、核酸、囊泡、细菌、病毒、多肽、抗原或半抗原中的一种；
22、所述第一结合体是抗体、受体蛋白、互补核酸或适配体中的一种；
23、所述第二结合体是抗体、受体蛋白、互补核酸或适配体中的一种。
24、在本专利技术中，基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法中通过纳米颗粒对待测复合物进行标记，酪胺和荧光材料与纳米颗粒结合，对待测复合物信号进行放大，最终测得待测物质。在本专利技术中，使用纳米颗粒代替天然酶，克服了天然酶成本高、稳定性低、对环境条件要求高的缺点，降低了免疫分析的成本，提高了免疫分析方法的稳定性，且能适用于更广泛的温度范围和酸碱度范围。
25、根据下文结合附图对本专利技术具体实施例的详细描述，本领域技术人员将会更加明了本专利技术的上述以及其他目的、优点和特征。
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1.一种基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述待测复合物的制备包括：
3.根据权利要求2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述载体粒子的粒径为3～4.5um。
4.根据权利要求1或2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，在所述信号放大步骤中，所述标记物为荧光酪胺偶联试剂。
5.根据权利要求1或2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述的在所述混合溶液中加入标记物和H2O2包括：
6.根据权利要求1或2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述的在所述混合溶液中加入标记物和H2O2包括：
7.根据权利要求1所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述纳米颗粒为普鲁士蓝粒子、四氧化三铁、氧化铜、金纳米颗粒、石墨烯等具有的纳米材料中的一种或多种。
8.根据权利要求2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的
9.根据权利要求2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.一种基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述待测复合物的制备包括：
3.根据权利要求2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述载体粒子的粒径为3～4.5um。
4.根据权利要求1或2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，在所述信号放大步骤中，所述标记物为荧光酪胺偶联试剂。
5.根据权利要求1或2所述的基于纳米材料的低丰度待测物质的检测方法，其特征在于，所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：顾宁，张璐斯，王杰锐，金晶，王西龙，
申请(专利权)人：南京仁迈生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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