【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医学检验，具体为一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒。
技术介绍
1、达比加群酯是一种抗凝药物，主要成分是达比加群酯。达比加群酯是一个前体药物，口服之后达比加群酯可以水解为达比加群。达比加群就是一个强效竞争性的可逆性的直接凝血酶抑制剂，它在凝血级联反应中起到了抗凝的作用，它可以抑制凝血酶，可以预防血栓的形成。达比加群可以抑制游离的凝血酶，也可以抑制与纤维蛋白结合的凝血酶，并且还能够抑制凝血酶诱导的血小板聚集，因此它具有比较强的抗凝的作用。在临床上，用于预防有危险因素的房颤患者的脑卒中和心肌梗死的发生，其对非瓣膜性房颤患者脑卒中预防效果也得到众多临床研究的证实。
2、尽管达比加群无需常规抗凝监测，但是，在一些特殊情况下，可能需要评估接受达比加群治疗患者的抗凝状态，包括怀疑用药过量、出现临床相关严重出血、需要紧急计划外手术或操作。因此，在调整药物剂量，降低患者用药风险时，仍然需要对血液中达比加群浓度进行检测及监测。
3、目前，临床上用于检测达比加群的有tt(凝血酶时间)、aptt(活化部分凝血活酶时间)与lc-ms/ms(液相色谱串联质谱)等项目。达比加群与tt(凝血酶时间)：达比加群直接抑制凝血酶，因此检测tt能够最敏感、最直接地反映达比加群的抗凝活性。tt值的大小和达比加群药物浓度有线性关系，但其对达比加群过于敏感，一般仅用于判断达比加群是否存在。达比加群与aptt(活化的部分凝血活酶时间)：aptt主要用于内源性凝血系统的监测，在低浓度的达比加群药时aptt基本不改变，在较高药物浓度时和
技术实现思路
1、本专利技术克服了上述现有技术的不足，提供一种操作简单、重复性高、灵敏度高、可抵抗血浆样本中肝素影响、纤维蛋白聚合抑制剂影响的达比加群检测试剂盒。
2、本专利技术提供了一种基于发色底物法检测达比加群含量并提高准确度的试剂盒，包括凝血酶稀释液、人凝血酶、发色底物、肝素拮抗剂、纤维蛋白聚合抑制剂、含有达比加群的人血浆标准品和缓冲液。由于所述试剂盒添加了肝素拮抗剂和纤维蛋白聚合抑制剂能够特异性的反映达比加群对酶的抑制，抗干扰能力强，从而实现快速准确的检测达比加群含量，达比加群在0-500ng/ml的范围内，r≧0.98，线性关系好，所述试剂盒相对偏差小于1％，准确度高。
3、人凝血酶稀释液组分包括柠檬酸缓冲体系、无机盐、酶蛋白稳定剂、表面活性剂、防腐剂。所述柠檬酸缓冲体系包括0.1mol/l柠檬酸一水、0.1mol/l二水合柠檬酸三钠按照1:9的比例混合配制，ph值为6.0～6.5；所述无机盐为氯化钠；氯化钠的摩尔浓度为0.1～0.25mol/l，所述稳定剂为牛血清白蛋白，牛血清白蛋白浓度为0.5％～2％，所述的表面活性剂为聚乙二醇-8000，聚乙二醇-8000的质量浓度为0.05％～1％。所述防腐剂为proclin300或叠氮钠，防腐剂的质量浓度为0.005％～0.03％。
4、人凝血酶的工作浓度为2.5～3.5u/ml。
5、发色底物的工作浓度为1～3mg/ml。优选的发色底物为；tos-gly-pro-arg-pna.acoh。溶剂包括稳定性、防腐剂。所述稳定剂为甘露醇，浓度为1％～3％，所述防腐剂为proclin300或叠氮钠，防腐剂的质量浓度为0.005％～0.03％。
6、优选的，所述肝素拮抗剂为聚赖氨酸盐酸盐，工作浓度为0.1-0.5ug/ml。
7、优选的，所述纤维蛋白聚合抑制剂为h-gly-pro-arg-pro-oh醋酸盐，工作浓度为0.1～0.4mm。
8、缓冲液的组分包括缓冲液、无机盐、稳定剂、防腐剂。所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液，ph值为8.2～8.8。优选的，所述无机盐为氯化钠，无机盐的摩尔浓度为0.1～0.25mol/l，所述稳定剂为牛血清白蛋白，稳定剂浓度为0.5％～2％，所述防腐剂为proclin300或叠氮钠，防腐剂的质量浓度为0.005％～0.03％。
9、有益效果
10、(1)本专利技术试剂盒为全液体试剂，有效的解决瓶间差异问题，从2～8℃冰箱中取出直接使用，具有方便快捷、成本低廉、稳定性好的特点，可以实现对进口同类试剂盒的替代，减少病人的检测费用。
11、(2)临床上肝素钠作为常用的抗凝剂，抑制血小板凝集，对抗血液凝集，并在溶栓中起作用。本专利技术试剂盒中添加了肝素拮抗剂可中和肝素钠，提高临床上对用药房颤，血液高凝状态的患者或心脏瓣膜疾病的患者检测达比加群的准确度，减少干扰因素。
12、(3)本专利技术试剂盒试剂中添加了纤维蛋白聚合抑制剂。因其能结合纤维蛋白原，抑制血小板对纤维蛋白原的粘附和血小板聚集，故加入底物溶液中可降低对试剂检测的干扰影响，提高对某些特殊样本的检测的准确度。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述包括凝血酶稀释液、人凝血酶、发色底物、肝素拮抗剂、纤维蛋白聚合抑制剂、含有达比加群的人血浆标准品和缓冲液，人凝血酶的工作浓度为2.5～3.5U/ml，发色底物的工作浓度为1～
2.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述发色底物Tos-Gly-Pro-Arg-pNa.AcOH。
3.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述肝素拮抗剂为聚赖氨酸盐酸盐。
4.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述纤维蛋白聚合抑制剂为H-Gly-Pro-Arg-Pro-OH醋酸盐。
5.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述人凝血酶稀释液组分包括柠檬酸缓冲体系、无机盐、酶蛋白稳定剂、表面活性剂、防腐剂。
6.根据权利要求5所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述柠檬酸缓冲体系包括0.1mol/L柠檬酸一水、0.1mo
7.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述缓冲液的组分包括三羟甲基氨基甲烷缓冲液、无机盐、稳定剂、防腐剂。
8.根据权利要求7所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述三羟甲基氨基甲烷缓冲液pH值为8.2～8.8；所述无机盐为氯化钠，无机盐的摩尔浓度为0.1～0.25mol/L；所述稳定剂为牛血清白蛋白，稳定剂浓度为0.5％～2％；所述防腐剂为Proclin300或叠氮钠，防腐剂的质量浓度为0.005％～0.03％。
9.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述发色底物中还包括溶剂，溶剂包括稳定剂、防腐剂，所述稳定剂为甘露醇，浓度为1％～3％，所述防腐剂为Proclin300或叠氮钠，防腐剂的质量浓度为0.005％～0.03％。
...【技术特征摘要】
1.一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述包括凝血酶稀释液、人凝血酶、发色底物、肝素拮抗剂、纤维蛋白聚合抑制剂、含有达比加群的人血浆标准品和缓冲液，人凝血酶的工作浓度为2.5～3.5u/ml，发色底物的工作浓度为1～
2.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述发色底物tos-gly-pro-arg-pna.acoh。
3.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述肝素拮抗剂为聚赖氨酸盐酸盐。
4.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述纤维蛋白聚合抑制剂为h-gly-pro-arg-pro-oh醋酸盐。
5.根据权利要求1所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述人凝血酶稀释液组分包括柠檬酸缓冲体系、无机盐、酶蛋白稳定剂、表面活性剂、防腐剂。
6.根据权利要求5所述的一种抗干扰性强的达比加群含量检测试剂盒，其特征在于：所述柠檬酸缓冲体系包括0.1mol/l柠檬酸一水、0.1mol/l二水合柠檬酸三钠按照1:9的比例混合配制，ph值为6.0～6.5；...
【专利技术属性】
技术研发人员：闫秋婷，王醒，周文宾，刘慧，邵冰心，
申请(专利权)人：山东艾科达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。