红掌漆酶基因的克隆及表达载体构建制造技术

技术编号：4294665 阅读：397 留言：0更新日期：2012-04-11 18:40

本发明专利技术涉及红掌漆酶基因及其植物表达载体，是分别提取红掌“阿拉巴马”及其白色佛焰苞突变体中的总ＲＮＡ，纯化ｍＲＮＡ，构建抑制差减杂交文库，然后设计特异引物，以红掌总ＲＮＡ反转录后的ｃＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ方法获得漆酶基因的全长ｃＤＮＡ，与ｐＭＤ－１８Ｔ载体连接，转化大肠杆菌ＪＭ１０９感受态细胞，挑取阳性克隆得到红掌漆酶基因，以其取代植物表达载体ｐＢＩ１２１上的报告基因ＧＵＳ，构建一个新的植物表达载体，命名为ｐＬａｃＢＩ１２１。本发明专利技术利用红掌“阿拉巴马”及其白色佛焰苞突变体获得与原花青素和植株的抗性有关的漆酶基因，为红掌不同佛焰苞颜色品种及红掌抗寒、抗病等品种的转基因培育奠定了基础，具有重要的理论及实践意义。